致谢 | 第5-6页 |
中文摘要 | 第6-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
绪论 | 第14-16页 |
1 引言 | 第16-19页 |
2 实验仪器与材料 | 第19-23页 |
2.1 细胞株 | 第19页 |
2.2 主要药物与试剂 | 第19-21页 |
2.3 实验动物 | 第21-22页 |
2.4 实验仪器 | 第22-23页 |
3 实验方法 | 第23-31页 |
3.1 细胞培养 | 第23页 |
3.2 小鼠骨髓源性的巨噬细胞分离和分化诱导 | 第23页 |
3.3 条件培养基的制备和刺激 | 第23页 |
3.4 免疫组化 | 第23-25页 |
3.5 组织切片苏木素&伊红染色法 | 第25页 |
3.6 免疫荧光 | 第25页 |
3.7 流式细胞术检测细胞表面抗原 | 第25-26页 |
3.8 划痕修复实验 | 第26页 |
3.9 Real-time PCR | 第26-27页 |
3.10 Transwell迁移试验 | 第27-28页 |
3.11 Transwell侵袭实验 | 第28页 |
3.12 SRB法测定细胞增殖 | 第28页 |
3.13 流式细胞术测定细胞凋亡 | 第28页 |
3.14 Western Blot法检测蛋白表达 | 第28-29页 |
3.15 MMP12和MMP13分泌水平检测 | 第29-30页 |
3.16 基因表达芯片谱 | 第30页 |
3.17 骨肉瘤肺转移模型建立 | 第30页 |
3.18 统计学分析 | 第30-31页 |
4 实验结果 | 第31-85页 |
4.1 巨噬细胞M2型极化可促进骨肉瘤的肺转移 | 第31-36页 |
4.2 ATRA可选择性抑制巨噬细胞的M2型极化 | 第36-39页 |
4.3 ATRA在一定程度上促进巨噬细胞的M1型极化,但不具普遍性 | 第39-42页 |
4.4 ATRA可显著抑制M2型巨噬细胞诱导的骨肉瘤细胞运动迁移能力 | 第42-46页 |
4.5 ATRA对巨噬细胞的增殖和凋亡以及ATRA作用后巨噬细胞上清对骨肉瘤细胞株的增殖和凋亡均无明显影响 | 第46-48页 |
4.6 ATRA可在体内显著抑制骨肉瘤转移,并减少肿瘤转移灶内的TAM M2型极化 | 第48-59页 |
4.7 SATA、c/EBPβ和JNK通路都不参与ATRA对巨噬细胞M2型极化的抑制作用 | 第59-63页 |
4.8 ATRA调控的肿瘤转移相关通路在其发挥抗骨肉瘤转移作用中是至关重要的 | 第63-68页 |
4.9 在M2型极化过程中,ATRA抑制巨噬细胞释放的MMP12 | 第68-85页 |
5 讨论 | 第85-90页 |
6 总结与展望 | 第90-91页 |
参考文献 | 第91-101页 |
综述 基于肿瘤微环境理论的骨肉瘤转移机制研究进展 | 第101-128页 |
参考文献 | 第117-128页 |
作者简历及在学期间所取得的科研成果 | 第128-129页 |