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Th1和Th2型细胞因子在不同MHC-B单倍型鸡群中的表达分析

摘要第1-8页
Abstract第8-14页
第一章 引言第14-24页
   ·研究目的及意义第14页
   ·国内外研究现状第14-24页
     ·禽免疫相关器官第14-18页
     ·禽细胞因子第18-20页
     ·鸡MHC单倍型与抗病性第20-21页
     ·MD中的免疫反应第21-24页
第二章 不同单倍型G系鸡群中细胞因子转录水平的研究第24-42页
   ·材料和方法第24-29页
     ·试验动物、感受态细胞第24页
     ·主要试剂第24页
     ·主要仪器第24页
     ·各细胞因子双重荧光定量PCR重组质粒及标准曲线的构建第24-28页
     ·70 日龄5 个鸡群不同组织中细胞因子转录水平的比较第28页
     ·14~70 日龄5 个鸡群PBL中细胞因子转录水平的动态分析第28页
     ·35 日龄与70 日龄G2 系及G5 系SPF鸡细胞因子转录水平的的比较第28-29页
     ·14~35 日龄G2 和G5 系鸡群不同组织中细胞因子转录水平动态分析第29页
   ·结果第29-38页
     ·目的基因和内参基因重组质粒的鉴定第29页
     ·双重荧光定量PCR标准曲线的建立第29-30页
     ·70 日龄5 个鸡群不同组织中细胞因子转录水平的比较第30-32页
     ·14~70 日龄5 个鸡群PBL中细胞因子转录水平的动态分析第32-34页
     ·35 日龄与70 日龄的G2 系及G5 系SPF鸡细胞因子转录水平的比较第34-36页
     ·14~35 日龄G2 和G5 系鸡群不同组织中细胞因子转录水平动态分析第36-38页
   ·讨论第38-42页
     ·70 日龄5 个鸡群不同组织中细胞因子转录水平的比较第39-40页
     ·14~70 日龄5 个鸡群PBL中细胞因子转录水平的比较第40页
     ·35 日龄与70 日龄G2 系及G5 系SPF鸡细胞因子转录水平的比较第40页
     ·14~35 日龄G2 和G5 系鸡群不同组织中细胞因子转录水平动态分析第40-42页
第三章 G2 系和G5 系SPF鸡感染MDV早期的研究第42-54页
   ·材料和方法第42-44页
     ·试验动物、毒株及质粒第42页
     ·主要试剂第42页
     ·主要仪器第42页
     ·鸡胚成纤维细胞(CEF)的制备第42页
     ·病毒的增殖及毒株蚀斑形成单位(plaque forming unit, PFU)的测定第42-43页
     ·G2 系和G5 系SPF鸡的MDV攻毒实验第43页
     ·荧光定量PCR引物及探针的合成第43页
     ·meq基因双重荧光定量PCR标准曲线的构建第43-44页
     ·肺脏、脾脏和PBL中病毒及细胞因子mRNA含量的定量检测第44页
   ·结果第44-49页
     ·毒株PFU的测定第44页
     ·meq基因双重荧光定量PCR标准曲线的构建第44页
     ·各组织中MDV转录水平的比较第44-45页
     ·各组织中细胞因子的转录水平比较第45-49页
   ·讨论第49-54页
     ·关于MDV的接种方式第49-50页
     ·关于MDV的检出时间第50-51页
     ·IFN-γ的影响第51-52页
     ·IL-18 的影响第52页
     ·IL-4 和IL-10 的影响第52-53页
     ·Mφ和NK细胞的影响第53-54页
第四章 不同B单倍型鸡群肺脏中IL-4 蛋白含量的比较第54-63页
   ·材料和方法第54-58页
     ·试验动物、感受态细胞和原核表达载体第54页
     ·主要试剂第54页
     ·主要仪器第54页
     ·引物设计第54页
     ·重组质粒pMD-IL-4 的构建第54-55页
     ·重组表达质粒pET-IL-4 的构建第55-56页
     ·重组蛋白的表达第56-57页
     ·兔抗ChIL-4 多抗血清的制备及鉴定第57-58页
     ·不同B单倍型鸡群肺脏中IL-4 的蛋白含量比较第58页
   ·结果第58-62页
     ·重组质粒pMD-IL-4 的鉴定第58-60页
     ·重组表达质粒pET-IL-4 的鉴定第60页
     ·重组蛋白的SDS-PAGE分析第60-61页
     ·兔抗血清的免疫学鉴定第61页
     ·不同B单倍型鸡群肺组织中IL-4 的蛋白含量比较第61-62页
   ·讨论第62-63页
第五章 全文结论第63-64页
参考文献第64-73页
致谢第73-74页
作者简介第74页

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