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拟南芥ECS1基因通过调节囊泡运输介导了根的向地性

缩略词表第4-5页
中文摘要第5-6页
Abstract第6-7页
第一部分 前言第11-21页
    1.1 生长素与植物发育第11-12页
    1.2 植物生长素极性运输第12-16页
        1.2.1 生长素极性运输第13页
        1.2.2 生长素极性运输的机理第13页
        1.2.3 生长素的输入载体AUX/LAX第13-14页
        1.2.4 生长素输出载体PINs第14-16页
    1.3 细胞囊泡运输第16-17页
    1.4 拟南芥向性研究第17-21页
        1.4.1 生长素与植物的向地性第17-18页
        1.4.2 花序茎的向地性反应第18页
        1.4.3 拟南芥中有向地性缺陷的突变体第18-21页
第二部分 材料与方法第21-33页
    2.1 ecs1基因的克隆第21-25页
        2.1.1 ecs1突变体的筛选与鉴定第21页
        2.1.2 初定位第21页
        2.1.3 精细定位第21-22页
        2.1.4 ecs1突变位点的测定第22-25页
    2.2 植物激素对突变体ecs1发育的影响第25-26页
        2.2.1 拟南芥培养第25页
        2.2.2 外源性NAA对突变体ecs1根发育的影响第25-26页
        2.2.3 NPA对突变体ecs1表皮细胞发育的影响第26页
    2.3 qRT-PCR检测基因的表达量第26-28页
        2.3.1 E.Z.N.A~(TM)植物RNA提取试剂盒提取总RNA第26页
        2.3.2 cDNA合成第26-27页
        2.3.3 标准曲线的制作第27-28页
        2.3.4 基因表达量分析第28页
    2.4 ecs1与生长素突变体杂交获得双突变体第28页
    2.5 FM4-64染色第28页
    2.6 酵母双杂交系统第28-30页
        2.6.1 制备酵母细胞感受态(LiAc法)第28-29页
        2.6.2 转化酵母感受态第29页
        2.6.3 酵母显色反应第29页
        2.6.4 所需溶液及配方第29-30页
    2.7 ECS1酵母双杂载体构建第30-31页
    2.8 GUS标记的ecs1筛选及观察第31页
    2.9 GFP标记的ecs1筛选及观察第31-32页
    2.10 突变体ecs1向地性实验第32-33页
第三部分 结果分析第33-46页
    3.1 拟南芥ecs1突变体的筛选与表型分析第33-35页
        3.1.1 ecs1显示主根变短,暗培养下胚轴弯曲第33-34页
        3.1.2 ecs1突变体侧根数目增多第34-35页
        3.1.3 ecs1突变体根的向地性延迟第35页
    3.2 ECS1基因图位克隆第35-37页
    3.3 生长素对ecs1根的影响第37-38页
        3.3.1 ecs1根伸长对NAA敏感,但是对NPA敏感程度降低第37页
        3.3.2 NAA和NPA处理ecs1突变体对根尖生长素积累的影响第37-38页
        3.3.3 外源施加NAA和NPA对于ECS1表达量的影响第38页
    3.4 ecs1突变体中PIN2积累增加第38-41页
    3.5 ecs1突变体囊泡运输增强,并对BFA敏感度降低第41页
    3.6 酵母双杂交验证ECS1蛋白和其他蛋白的相互作用第41-44页
        3.6.1 酵母双杂交载体构建第41-43页
        3.6.2 ECS1蛋白和乙烯相关蛋白相互作用第43页
        3.6.3 ECS1蛋白和生长素相关蛋白相互作用第43-44页
    3.7 暗培养的ecs1下胚轴表皮细胞螺旋能够被NPA部分恢复第44页
    3.8 黑暗培养的ecs1突变体下胚轴中PIN3蛋白的积累增加第44-45页
    3.9 ECS1的突变不能影响aux1-7的根向地性消失的表型第45-46页
第四部分 讨论第46-49页
    4.1 拟南芥ecs1是一个生长素相关的突变体第46页
    4.2 ecs1突变体内生长素的极性运输出现异常第46-47页
    4.3 ecs1侧根增多及对外源生长素反应敏感第47页
    4.4 ecs1突变体体内囊泡运输增强第47-48页
    4.5 ECS1的突变不能影响生长素信号通路突变体AUX1-7的表型第48-49页
小结第49-50页
参考文献第50-54页
致谢第54页

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