缩略词表 | 第4-5页 |
中文摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第一部分 前言 | 第11-21页 |
1.1 生长素与植物发育 | 第11-12页 |
1.2 植物生长素极性运输 | 第12-16页 |
1.2.1 生长素极性运输 | 第13页 |
1.2.2 生长素极性运输的机理 | 第13页 |
1.2.3 生长素的输入载体AUX/LAX | 第13-14页 |
1.2.4 生长素输出载体PINs | 第14-16页 |
1.3 细胞囊泡运输 | 第16-17页 |
1.4 拟南芥向性研究 | 第17-21页 |
1.4.1 生长素与植物的向地性 | 第17-18页 |
1.4.2 花序茎的向地性反应 | 第18页 |
1.4.3 拟南芥中有向地性缺陷的突变体 | 第18-21页 |
第二部分 材料与方法 | 第21-33页 |
2.1 ecs1基因的克隆 | 第21-25页 |
2.1.1 ecs1突变体的筛选与鉴定 | 第21页 |
2.1.2 初定位 | 第21页 |
2.1.3 精细定位 | 第21-22页 |
2.1.4 ecs1突变位点的测定 | 第22-25页 |
2.2 植物激素对突变体ecs1发育的影响 | 第25-26页 |
2.2.1 拟南芥培养 | 第25页 |
2.2.2 外源性NAA对突变体ecs1根发育的影响 | 第25-26页 |
2.2.3 NPA对突变体ecs1表皮细胞发育的影响 | 第26页 |
2.3 qRT-PCR检测基因的表达量 | 第26-28页 |
2.3.1 E.Z.N.A~(TM)植物RNA提取试剂盒提取总RNA | 第26页 |
2.3.2 cDNA合成 | 第26-27页 |
2.3.3 标准曲线的制作 | 第27-28页 |
2.3.4 基因表达量分析 | 第28页 |
2.4 ecs1与生长素突变体杂交获得双突变体 | 第28页 |
2.5 FM4-64染色 | 第28页 |
2.6 酵母双杂交系统 | 第28-30页 |
2.6.1 制备酵母细胞感受态(LiAc法) | 第28-29页 |
2.6.2 转化酵母感受态 | 第29页 |
2.6.3 酵母显色反应 | 第29页 |
2.6.4 所需溶液及配方 | 第29-30页 |
2.7 ECS1酵母双杂载体构建 | 第30-31页 |
2.8 GUS标记的ecs1筛选及观察 | 第31页 |
2.9 GFP标记的ecs1筛选及观察 | 第31-32页 |
2.10 突变体ecs1向地性实验 | 第32-33页 |
第三部分 结果分析 | 第33-46页 |
3.1 拟南芥ecs1突变体的筛选与表型分析 | 第33-35页 |
3.1.1 ecs1显示主根变短,暗培养下胚轴弯曲 | 第33-34页 |
3.1.2 ecs1突变体侧根数目增多 | 第34-35页 |
3.1.3 ecs1突变体根的向地性延迟 | 第35页 |
3.2 ECS1基因图位克隆 | 第35-37页 |
3.3 生长素对ecs1根的影响 | 第37-38页 |
3.3.1 ecs1根伸长对NAA敏感,但是对NPA敏感程度降低 | 第37页 |
3.3.2 NAA和NPA处理ecs1突变体对根尖生长素积累的影响 | 第37-38页 |
3.3.3 外源施加NAA和NPA对于ECS1表达量的影响 | 第38页 |
3.4 ecs1突变体中PIN2积累增加 | 第38-41页 |
3.5 ecs1突变体囊泡运输增强,并对BFA敏感度降低 | 第41页 |
3.6 酵母双杂交验证ECS1蛋白和其他蛋白的相互作用 | 第41-44页 |
3.6.1 酵母双杂交载体构建 | 第41-43页 |
3.6.2 ECS1蛋白和乙烯相关蛋白相互作用 | 第43页 |
3.6.3 ECS1蛋白和生长素相关蛋白相互作用 | 第43-44页 |
3.7 暗培养的ecs1下胚轴表皮细胞螺旋能够被NPA部分恢复 | 第44页 |
3.8 黑暗培养的ecs1突变体下胚轴中PIN3蛋白的积累增加 | 第44-45页 |
3.9 ECS1的突变不能影响aux1-7的根向地性消失的表型 | 第45-46页 |
第四部分 讨论 | 第46-49页 |
4.1 拟南芥ecs1是一个生长素相关的突变体 | 第46页 |
4.2 ecs1突变体内生长素的极性运输出现异常 | 第46-47页 |
4.3 ecs1侧根增多及对外源生长素反应敏感 | 第47页 |
4.4 ecs1突变体体内囊泡运输增强 | 第47-48页 |
4.5 ECS1的突变不能影响生长素信号通路突变体AUX1-7的表型 | 第48-49页 |
小结 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-54页 |
致谢 | 第54页 |