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棉花(Gossypium hirsutum)JAZ11-D和XND1基因的生物学功能及调控研究

摘要第6-8页
Abstract第8-9页
第一章 前言第14-29页
    1.1 茉莉素(JA)信号通路第14-17页
        1.1.1 受体COI1第15页
        1.1.2 正调控因子MYC2第15页
        1.1.3 抑制因子JAZ第15-17页
    1.2 JAZ与蛋白之间的相互作用第17-20页
        1.2.1 NT结构域介导的相互作用第17页
        1.2.2 ZIM结构域介导的相互作用第17-18页
        1.2.3 Jas结构域介导的相互作用第18-20页
    1.3 乙烯(ET)信号通路第20-22页
    1.4 棉花的纤维发育第22-27页
        1.4.1 棉花纤维的起始期第24-25页
        1.4.2 棉花纤维的伸长期第25-27页
    1.5 立题依据和研究意义第27-29页
第二章 棉花JAZ家族基因的克隆及分析第29-46页
    2.1 实验材料第29页
        2.1.1 植物材料第29页
        2.1.2 工具酶和试剂盒第29页
        2.1.3 培养基第29页
        2.1.4 常用试剂、缓冲液第29页
    2.2 实验器材第29-30页
    2.3 实验方法第30-36页
        2.3.1 离体胚珠培养实验第30页
        2.3.2 陆地棉(G. hirsutum L.)JAZ家族基因的分离鉴定第30-32页
        2.3.3 GhJAZs基因结构分析和蛋白序列系统进化性分析、结构域分析第32页
        2.3.4 GhJAZs组织表达分析第32-36页
    2.4 结果第36-44页
        2.4.1 JA影响棉花纤维的起始第36页
        2.4.2 陆地棉(G. hirsutum L.)JAZ家族基因的鉴定第36-38页
        2.4.3 棉花JAZ蛋白的系统进化、基因结构和保守结构域分析第38-41页
        2.4.4 棉花JAZ基因的表达受JA诱导第41-42页
        2.4.5 棉花JAZ基因的组织表达模式分析第42-43页
        2.4.6 棉花JAZ基因在野生型棉花(徐州142)和无绒无絮突变体(fl)纤维起始时期的差异表达模式分析第43-44页
    2.5 讨论第44-46页
        2.5.1 陆地棉JAZ家族的进化关系及结构保守性第44-45页
        2.5.2 陆地棉JAZ基因参与调控棉花纤维起始和发育第45-46页
第三章 棉花JAZ蛋白亚细胞定位和互作模式分析第46-58页
    3.1 实验材料第46-47页
        3.1.1 植物材料第46页
        3.1.2 菌种和质粒第46页
        3.1.3 工具酶和试剂盒第46页
        3.1.4 培养基第46页
        3.1.5 常用试剂、缓冲液第46-47页
    3.2 实验方法第47-51页
        3.2.1 感受态的制备第47页
        3.2.2 感受态的转化第47-48页
        3.2.3 载体的构建第48-50页
        3.2.4 亚细胞定位实验第50页
        3.2.5 酵母双杂交实验第50-51页
    3.3 结果第51-56页
        3.3.1 GhJAZ蛋白亚细胞定位分析第51-52页
        3.3.2 GhJAZ蛋白之间的互作模式第52-53页
        3.3.3 GhJAZ与JA信号通路关键因子之间的互作模式第53-54页
        3.3.4 GhJAZ与调控棉花纤维起始关键转录因子之间的互作模式第54-56页
    3.4 讨论第56-58页
        3.4.1 棉花JAZ蛋白形成同源或异源二聚体参与JA通路第56-57页
        3.4.2 JAZ参与调控棉花纤维的起始第57-58页
第四章 GhJAZ11-D在棉花纤维发育中的功能研究第58-78页
    4.1 实验材料第58-59页
        4.1.1 植物材料第58页
        4.1.2 工具酶及试剂盒第58页
        4.1.3 常用试剂、缓冲液及培养基第58-59页
    4.2 实验方法第59-64页
        4.2.1 棉花转化第59-60页
        4.2.2 棉花基因组DNA的提取和鉴定第60-61页
        4.2.3 成熟纤维的品质测定第61页
        4.2.4 扫描电镜实验第61页
        4.2.5 离体胚珠培养实验第61页
        4.2.6 棉花胚珠和纤维的酵母双杂交cDNA文库的构建第61-64页
        4.2.7 酵母双杂交cDNA文库的筛选第64页
    4.3 结果第64-76页
        4.3.1 GhJAZ11-D的亚细胞定位分析第64-65页
        4.3.2 转基因棉花的表型分析第65-72页
        4.3.3 GhJAZ11-D互作蛋白的筛选第72-75页
        4.3.4 GhJAZ11-D对乙烯信号通路下游应答基因的调控作用第75-76页
    4.4 讨论第76-78页
        4.4.1 GhJAZ11-D不参与调控棉花纤维的起始第76-77页
        4.4.2 GhJAZ11-D促进棉花纤维的伸长第77-78页
第五章 GhXND1在植物木质部发育中的功能研究第78-90页
    5.1 前言第78-79页
    5.2 实验材料第79页
        5.2.1 植物材料第79页
        5.2.2 常用试剂、缓冲液第79页
    5.3 实验方法第79-81页
        5.3.1 GhXND1的组织表达分析第79页
        5.3.2 GhXND1的亚细胞定位分析第79-80页
        5.3.3 GhXND1的转录自激活活性分析第80页
        5.3.4 转基因拟南芥的表型分析第80-81页
    5.4 结果第81-89页
        5.4.1 GhXND1的分离鉴定第81-83页
        5.4.2 GhXND1的组织表达模式分析第83页
        5.4.3 GhXND1的亚细胞定位分析第83-84页
        5.4.4 GhXND1的转录自激活活性分析第84-85页
        5.4.5 GhXND1在转基因拟南芥中的功能分析第85-88页
        5.4.6 GhXND1负调控次生壁发育相关基因第88-89页
    5.5 讨论第89-90页
        5.5.1 GhXND1是一个转录因子第89页
        5.5.2 GhXND1负调控木质部发育第89页
        5.5.3 GhXND1影响植物细胞次生壁合成相关基因的表达第89-90页
结论第90-91页
本论文的主要创新点第91-92页
参考文献第92-103页
附录第103-105页
博士期间发表的学术论文第105-106页
致谢第106页

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