中文摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-7页 |
英文缩略词 | 第12-13页 |
前言 | 第13-15页 |
第一篇 文献综述 | 第15-24页 |
1 转座子总述 | 第15-16页 |
2 DNA转座子 | 第16-20页 |
3 Pogo转座子 | 第20-21页 |
4 转座子应用 | 第21-24页 |
4.1 转基因 | 第21-22页 |
4.2 基因治疗 | 第22-24页 |
第二篇 试验研究 | 第24-82页 |
第一章 9种硬骨鱼类转座组注释 | 第24-35页 |
1 材料与方法 | 第24-25页 |
1.1 基因组和已知重复序列库数据来源 | 第24页 |
1.2 基因组未知重复序列库一致序列的获得 | 第24-25页 |
1.3 重复序列参考库构建 | 第25页 |
1.4 基因组转座组注释 | 第25页 |
2 结果与分析 | 第25-33页 |
2.1 9种硬骨鱼转座组大小和构成比较 | 第25-32页 |
2.2 DNA转座子在硬骨鱼中分布 | 第32-33页 |
3 讨论 | 第33-35页 |
第二章 鱼类pogo转座子挖掘及其在脊椎动物基因组中的进化 | 第35-53页 |
1 材料与方法 | 第35-36页 |
1.1 pogo转座子及其驯化基因挖掘 | 第35-36页 |
1.2 结构域分析和POGK和POGZ的功能预测 | 第36页 |
1.3 密码子筛选的纯化实验 | 第36页 |
1.4 系统发生树构建 | 第36页 |
2 结果 | 第36-51页 |
2.1 pogo转座子在鱼类中分布及其在脊椎动物中的水平转移 | 第36-42页 |
2.2 pogo转座子在脊椎动物中的进化 | 第42-46页 |
2.3 POGK和POGZ的保守结构 | 第46-50页 |
2.4 人类POGK和POGZ的功能预测 | 第50-51页 |
3 讨论 | 第51-53页 |
第三章 PG转座子系列载体构建 | 第53-70页 |
1 材料与方法 | 第53-58页 |
1.1 菌株及试剂 | 第53-54页 |
1.2 PG转座元件的设计与合成 | 第54页 |
1.3 转座子载体构建 | 第54-55页 |
1.4 PG转座子介导的哺乳动物细胞表达载体构建 | 第55页 |
1.5 人POGZ和POGK基因克隆及表达载体构建 | 第55-57页 |
1.6 斑马鱼转座酶PGase克隆及表达载体构建 | 第57-58页 |
2 结果 | 第58-69页 |
2.1 PG转座元件合成 | 第58页 |
2.2 PG转座子载体的构建与鉴定 | 第58-59页 |
2.3 pPG-PGK-NEO载体的构建与鉴定 | 第59-62页 |
2.4 pT2-CMV- POGZ/ POGK构建与鉴定 | 第62-66页 |
2.5 pT2-CMV-PGase表达载体构建与鉴定 | 第66-69页 |
3 讨论 | 第69-70页 |
第四章 PG转座子活性验证 | 第70-74页 |
1 材料与方法 | 第70-71页 |
1.1 菌株及试剂 | 第70页 |
1.2 质粒制备 | 第70页 |
1.3 细胞Giemsa染色 | 第70页 |
1.4 细胞转染 | 第70-71页 |
1.5 G418筛选 | 第71页 |
1.6 统计分析 | 第71页 |
2 结果与分析 | 第71-72页 |
2.1 PG转座活性检测 | 第71-72页 |
3 讨论 | 第72-74页 |
第五章 斑马鱼PG转座子的表达特性 | 第74-82页 |
1 材料与方法 | 第74-78页 |
1.1 实验动物 | 第74页 |
1.2 药品试剂 | 第74-75页 |
1.3 试剂配制 | 第75页 |
1.4 原位杂交 | 第75-78页 |
2 结果 | 第78-81页 |
2.1 RNA探针体外转录合成 | 第78-79页 |
2.2 斑马鱼胚胎原位杂交 | 第79-81页 |
3 讨论 | 第81-82页 |
全文结论 | 第82-83页 |
参考文献( References) | 第83-91页 |
致谢 | 第91-92页 |
附录 | 第92-147页 |
攻读学位期间发表学位论文 | 第147-148页 |