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鱼类自主pogo转座子的挖掘、进化及活性验证

中文摘要第3-5页
Abstract第5-7页
英文缩略词第12-13页
前言第13-15页
第一篇 文献综述第15-24页
    1 转座子总述第15-16页
    2 DNA转座子第16-20页
    3 Pogo转座子第20-21页
    4 转座子应用第21-24页
        4.1 转基因第21-22页
        4.2 基因治疗第22-24页
第二篇 试验研究第24-82页
    第一章 9种硬骨鱼类转座组注释第24-35页
        1 材料与方法第24-25页
            1.1 基因组和已知重复序列库数据来源第24页
            1.2 基因组未知重复序列库一致序列的获得第24-25页
            1.3 重复序列参考库构建第25页
            1.4 基因组转座组注释第25页
        2 结果与分析第25-33页
            2.1 9种硬骨鱼转座组大小和构成比较第25-32页
            2.2 DNA转座子在硬骨鱼中分布第32-33页
        3 讨论第33-35页
    第二章 鱼类pogo转座子挖掘及其在脊椎动物基因组中的进化第35-53页
        1 材料与方法第35-36页
            1.1 pogo转座子及其驯化基因挖掘第35-36页
            1.2 结构域分析和POGK和POGZ的功能预测第36页
            1.3 密码子筛选的纯化实验第36页
            1.4 系统发生树构建第36页
        2 结果第36-51页
            2.1 pogo转座子在鱼类中分布及其在脊椎动物中的水平转移第36-42页
            2.2 pogo转座子在脊椎动物中的进化第42-46页
            2.3 POGK和POGZ的保守结构第46-50页
            2.4 人类POGK和POGZ的功能预测第50-51页
        3 讨论第51-53页
    第三章 PG转座子系列载体构建第53-70页
        1 材料与方法第53-58页
            1.1 菌株及试剂第53-54页
            1.2 PG转座元件的设计与合成第54页
            1.3 转座子载体构建第54-55页
            1.4 PG转座子介导的哺乳动物细胞表达载体构建第55页
            1.5 人POGZ和POGK基因克隆及表达载体构建第55-57页
            1.6 斑马鱼转座酶PGase克隆及表达载体构建第57-58页
        2 结果第58-69页
            2.1 PG转座元件合成第58页
            2.2 PG转座子载体的构建与鉴定第58-59页
            2.3 pPG-PGK-NEO载体的构建与鉴定第59-62页
            2.4 pT2-CMV- POGZ/ POGK构建与鉴定第62-66页
            2.5 pT2-CMV-PGase表达载体构建与鉴定第66-69页
        3 讨论第69-70页
    第四章 PG转座子活性验证第70-74页
        1 材料与方法第70-71页
            1.1 菌株及试剂第70页
            1.2 质粒制备第70页
            1.3 细胞Giemsa染色第70页
            1.4 细胞转染第70-71页
            1.5 G418筛选第71页
            1.6 统计分析第71页
        2 结果与分析第71-72页
            2.1 PG转座活性检测第71-72页
        3 讨论第72-74页
    第五章 斑马鱼PG转座子的表达特性第74-82页
        1 材料与方法第74-78页
            1.1 实验动物第74页
            1.2 药品试剂第74-75页
            1.3 试剂配制第75页
            1.4 原位杂交第75-78页
        2 结果第78-81页
            2.1 RNA探针体外转录合成第78-79页
            2.2 斑马鱼胚胎原位杂交第79-81页
        3 讨论第81-82页
全文结论第82-83页
参考文献( References)第83-91页
致谢第91-92页
附录第92-147页
攻读学位期间发表学位论文第147-148页

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