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鼠疫菌Ⅲ型分泌系统蛋白YscI-YscF相互作用的研究以及蛋白质分泌组新毒力因子的鉴定

缩略语第7-8页
摘要第8-12页
Abstract第12-16页
第一部分 鼠疫耶尔森氏菌Ⅲ型分泌系统蛋白YscI-YscF相互作用的研究第17-65页
    第一章 前言第17-23页
        1.鼠疫的传播与流行第17-18页
        2.鼠疫菌的生理特性第18页
        3.鼠疫菌的III型分泌系统第18-21页
        4.鼠疫菌III型分泌系统蛋白的相互作用第21-22页
        5.本研究意义第22-23页
    第二章 yscI突变株的构建第23-33页
        1.引言第23页
        2.材料及方法第23-30页
            2.1 材料第23-27页
            2.2 方法第27-30页
        3.结果及讨论第30-32页
            3.1 yscI突变株的构建第30-31页
            3.2 YscI目的蛋白的纯化第31-32页
            3.3 yscI基因突变株免疫印迹验证第32页
        4.小结第32-33页
    第三章 鼠疫菌T3SS蛋白YscI与YscF体内相互作用第33-40页
        1.引言第33页
        2.材料和方法第33-37页
            2.1 材料第33-34页
            2.2 方法第34-37页
        3.结果与讨论第37-39页
            3.1 yscI互补株及yscI截短突变株的构建第37页
            3.2 pBAD24载体阿拉伯糖诱导浓度的验证第37页
            3.3 yscI截短体突变株的免疫印迹验证第37-38页
            3.4 免疫共沉淀验证YscI及其截短蛋白与YscF体内相互作用第38-39页
        4.小结第39-40页
    第四章 鼠疫菌YscF-YscI相互作用的生理功能研究第40-45页
        1.引言第40页
        2.材料和方法第40-41页
            2.1 材料第40页
            2.2 方法第40-41页
        3.结果及讨论第41-44页
            3.1 鼠疫菌及其突变株组装YscF针状结构的能力第41-42页
            3.2 鼠疫菌yscI截短突变株YscI和YscF的表达及分泌第42-43页
            3.3 鼠疫菌yscI互截短突变株Yops蛋白分泌情况第43-44页
        4.小结第44-45页
    第五章 鼠疫菌YscI点突变蛋白与YscF间的相互作用第45-55页
        1.引言第45页
        2.材料及方法第45-50页
            2.1 材料第45-46页
            2.2 方法第46-50页
        3.结果与讨论第50-53页
            3.1 pBAD24-YscI-FLAG点突变体的构建第50页
            3.2 yscI点突变株的免疫印迹验证第50-51页
            3.3 pBAD24-YscI点突变蛋白与YscF体内相互作用第51页
            3.4 pGEX-4T2YscI点突变体蛋白的纯化第51-52页
            3.5 His-YscF蛋白的表达与纯化第52-53页
            3.6 GST-pull down验证YscI点突变蛋白与YscF体外相互作用第53页
        4.小结第53-55页
    第六章 鼠疫菌yscI点突变株生理功能的研究第55-58页
        1.引言第55页
        2.材料及方法第55页
            2.1 材料第55页
            2.2 方法第55页
        3.结果及讨论第55-57页
            3.1 鼠疫菌yscI点突变株组装YscF针状结构的能力第55-56页
            3.2 鼠疫菌yscI点突变株Yops蛋白分泌情况第56-57页
        4.小结第57-58页
    第七章 鼠疫菌yscI截短及点突变株细胞毒力及转运效应蛋白的能力第58-63页
        1.引言第58页
        2.材料及方法第58-60页
            2.1 材料第58-59页
            2.2 方法第59-60页
        3.结果及讨论第60-63页
            3.1 鼠疫菌yscI截短及点突变株对Hela细胞的毒力第60-61页
            3.2 鼠疫菌yscI点突变株感染Hela细胞的RTCA第61-62页
            3.3 鼠疫菌yscI截短及点突变株效应蛋白的转运第62-63页
        4.小结第63页
    第八章 总结第63-65页
第二部分 鼠疫耶尔森氏菌蛋白质组学分析及新毒力因子的鉴定第65-99页
    第一章 前言第65-71页
        1.蛋白质组概述第65页
        2.细菌的分泌途径第65-68页
            2.1 两步分泌途径第66-67页
            2.2 一步分泌途径第67-68页
        3.细菌分泌蛋白质组的研究第68-69页
            3.1 细菌分泌蛋白质组研究的技术和方法第68页
            3.2 细菌不同生理条件下分泌蛋白质组的研究第68页
            3.3 细菌不同菌株蛋白质组的研究第68-69页
            3.4 新抗生素的发现及耐药机制的研究第69页
            3.5 细菌分泌蛋白中药物靶标的研究第69页
        4.鼠疫耶尔森氏菌蛋白质组的研究第69-70页
        5.本研究意义第70-71页
    第二章 鼠疫耶尔森氏菌蛋白质组样品的制备第71-77页
        1.引言第71页
        2.材料及方法第71-73页
            2.1 材料第71-72页
            2.2 方法第72-73页
        3.结果及讨论第73-76页
            3.1 鼠疫菌蛋白质组样品第73-74页
            3.2 鼠疫菌不同时序蛋白质组样品第74-76页
        4.小结第76-77页
    第三章 蛋白质组的质谱分析第77-82页
        1.引言第77-78页
        2.材料及方法第78-79页
            2.1 材料第78页
            2.2 方法第78-79页
        3.结果及讨论第79-82页
    第四章 鼠疫菌蛋白质组质谱结果分析第82-88页
        1.比较蛋白质组学分析第82-83页
        2.鼠疫菌分泌蛋白质组的定义第83-84页
        3.鼠疫菌T3SS相关蛋白质组动态变化第84-88页
    第五章 鼠疫菌五个新的毒力相关基因功能的研究第88-97页
        1.引言第88页
        2.材料及方法第88-92页
            2.1 材料第88页
            2.2 方法第88-92页
        3.结果及讨论第92-96页
            3.1 鼠疫菌yp_3416、yp_3418、yp_3416-3418基因敲除第92-93页
            3.2 鼠疫菌基因突变株感染小鼠的生存曲线第93-95页
            3.3 β-内酰胺酶(TEM)报告质粒的构建第95页
            3.4 鼠疫菌向细胞内转运靶蛋白的 β-内酰胺酶(TEM)报告实验第95-96页
        4.小结第96-97页
    第六章 总结第97-99页
参考文献第99-109页
附录第109-195页
个人简历第195-196页
博士期间发表论文第196-197页
致谢第197-198页

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