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miR-322在胚胎干细胞向心肌细胞定向分化中的作用与机制研究

摘要第3-5页
abstract第5-7页
中英文缩略词表第10-11页
第1章 引言第11-14页
第2章 材料与方法第14-32页
    2.1 材料第14-17页
        2.1.1 细胞与药物第14页
        2.1.2 主要试剂第14-16页
        2.1.3 主要仪器第16-17页
        2.1.4 慢病毒第17页
    2.2 方法第17-31页
        2.2.1 MEF细胞传代培养第17-18页
        2.2.2 mESC-D3细胞传代培养第18页
        2.2.3 细胞冻存第18页
        2.2.4 细胞复苏第18-19页
        2.2.5 细胞计数第19页
        2.2.6 逆转录病毒和mESC-D3细胞逆转录病毒转导第19-22页
        2.2.7 细胞分组后Hanging Drops定向分化第22-24页
        2.2.8 RNA提取与q-RT PC R测定第24-26页
        2.2.9 Western blot检测第26-30页
        2.2.10 免疫荧光染色第30-31页
    2.3 统计学分析第31-32页
第3章 结果第32-48页
    3.1 形态学分析第32-36页
        3.1.1 MEF饲养层细胞稳定传代及其形态学特点第32页
        3.1.2 胚胎干细胞生长于MEF饲养层细胞之上及其形态学特点第32页
        3.1.3 Hanging drops第32-33页
        3.1.4 EB种板各天数观察第33-34页
        3.1.5 目的基因转染后,mESC-D3细胞表型第34-35页
        3.1.6 mESC-D3细胞最佳转染条件第35-36页
    3.2 miR-322 在心肌发育过程中起到关键作用第36-40页
        3.2.1 上调miR-322 会显著促进心肌细胞的分化第36-38页
        3.2.2 对miR-322 进行下调,会抑制心肌细胞的分化第38-40页
    3.3 Celf1是心肌发育中一个关键性的调控因素第40-44页
        3.3.1 Celf1的过表达将会引起心肌细胞的分化受到抑制第40-42页
        3.3.2 对celf1基因敲减,发现对心肌细胞发育有正向调节作用第42-44页
    3.4 Celf1是miR-322 调控心肌分化的下游靶基因第44-48页
第4章 讨论第48-51页
第5章 结论第51-52页
致谢第52-53页
参考文献第53-57页
综述第57-66页
    参考文献第64-66页

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