摘要 | 第3-5页 |
abstract | 第5-7页 |
中英文缩略词表 | 第10-11页 |
第1章 引言 | 第11-14页 |
第2章 材料与方法 | 第14-32页 |
2.1 材料 | 第14-17页 |
2.1.1 细胞与药物 | 第14页 |
2.1.2 主要试剂 | 第14-16页 |
2.1.3 主要仪器 | 第16-17页 |
2.1.4 慢病毒 | 第17页 |
2.2 方法 | 第17-31页 |
2.2.1 MEF细胞传代培养 | 第17-18页 |
2.2.2 mESC-D3细胞传代培养 | 第18页 |
2.2.3 细胞冻存 | 第18页 |
2.2.4 细胞复苏 | 第18-19页 |
2.2.5 细胞计数 | 第19页 |
2.2.6 逆转录病毒和mESC-D3细胞逆转录病毒转导 | 第19-22页 |
2.2.7 细胞分组后Hanging Drops定向分化 | 第22-24页 |
2.2.8 RNA提取与q-RT PC R测定 | 第24-26页 |
2.2.9 Western blot检测 | 第26-30页 |
2.2.10 免疫荧光染色 | 第30-31页 |
2.3 统计学分析 | 第31-32页 |
第3章 结果 | 第32-48页 |
3.1 形态学分析 | 第32-36页 |
3.1.1 MEF饲养层细胞稳定传代及其形态学特点 | 第32页 |
3.1.2 胚胎干细胞生长于MEF饲养层细胞之上及其形态学特点 | 第32页 |
3.1.3 Hanging drops | 第32-33页 |
3.1.4 EB种板各天数观察 | 第33-34页 |
3.1.5 目的基因转染后,mESC-D3细胞表型 | 第34-35页 |
3.1.6 mESC-D3细胞最佳转染条件 | 第35-36页 |
3.2 miR-322 在心肌发育过程中起到关键作用 | 第36-40页 |
3.2.1 上调miR-322 会显著促进心肌细胞的分化 | 第36-38页 |
3.2.2 对miR-322 进行下调,会抑制心肌细胞的分化 | 第38-40页 |
3.3 Celf1是心肌发育中一个关键性的调控因素 | 第40-44页 |
3.3.1 Celf1的过表达将会引起心肌细胞的分化受到抑制 | 第40-42页 |
3.3.2 对celf1基因敲减,发现对心肌细胞发育有正向调节作用 | 第42-44页 |
3.4 Celf1是miR-322 调控心肌分化的下游靶基因 | 第44-48页 |
第4章 讨论 | 第48-51页 |
第5章 结论 | 第51-52页 |
致谢 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-57页 |
综述 | 第57-66页 |
参考文献 | 第64-66页 |