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SWI/SNF染色质重塑复合物的不同组分在人类胚胎干细胞中的功能研究

摘要第6-9页
ABSTRACT第9-11页
第一章 综述第14-22页
    第一节 染色质重塑复合物的介绍第14-16页
    第二节 染色质重塑复合物的生物功能第16-19页
    第三节 SWI/SNF染色质重塑复合物在发育过程中的作用第19-20页
    第四节 SWI/SNF染色质重塑复合物在胚胎干细胞中的功能第20-22页
第二章 实验材料和方法第22-57页
    第一节 实验材料第22-35页
        1. 细胞株第22页
        2. 小鼠种类第22页
        3. 菌株第22-23页
        4. 质粒第23-24页
        5. shRNA序列第24-27页
        6. 引物序列:RT-PCR,Q-RT-PCR,PCR引物第27-28页
        7. 抗体第28页
        8. 主要试剂和试剂盒第28-31页
        9. 主要仪器及实验耗材第31-33页
        10. 主要溶液配制第33-35页
    第二节 实验方法第35-57页
        1. 质粒小量提取步骤第35-36页
        2. 质粒大量提提步骤第36-37页
        3. 感受态制备第37页
        4. 感受态制备时用到的溶液配方第37-38页
        5. 细胞培养第38-39页
        6. MEF的培养及其冻存过程第39页
        7. 人类胚胎干细胞系(H1)培养时MEF的准备及其步骤第39-40页
        8. 人类胚胎干细胞系H1的复苏及其步骤第40页
        9. 人类胚胎干细胞系的传代步骤第40-41页
        10. 病毒感染人类胚胎干细胞的方法第41页
        11. MES培养和体外胚球体(EB)的培养方法第41-43页
        12. Total RNA的抽提步骤第43-44页
        13. RNA反转录成为cDNA第44页
        14. 实时荧光定量PCR(Q-RT-PCR)第44-45页
        15. 免疫印迹杂交(Western Blotting)第45-48页
        16. 流式细胞技术(Fluorescence Activating Cell Sorter)第48-49页
        17. 碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AP)染色方法第49-50页
        18. 稳转干扰细胞系的建立与筛选第50-51页
        19. MES核型分析方法及其步骤第51-52页
        20. 支原体的检测第52-53页
        21. BRG1诱导敲除型胚胎干细胞系建立的步骤第53-54页
        22. 免疫共沉淀(coimmunoprecipitation,Co-iP)技术第54-57页
第三章 实验结果与分析第57-77页
    第一节 SWI/SNF染色质重塑复合物的不同亚基在HES中的不同功能及其作用机制的研究第57-71页
    第二节 BRG1诱导型敲除胚胎干细胞系的建立第71-77页
第四章 小结与讨论第77-80页
附录第80-82页
参考文献第82-88页
致谢第88页

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