| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 1. 前言 | 第9-20页 |
| ·我国天然橡胶的生产现状 | 第10页 |
| ·天然橡胶组培育种研究背景 | 第10-12页 |
| ·天然橡胶组织培养的问题 | 第10-11页 |
| ·橡胶树的转基因遗传育种研究进展 | 第11-12页 |
| ·高等植物中亚硝酸还原酶(NIR)研究进展 | 第12-18页 |
| ·还原酶的分类 | 第12-13页 |
| ·硝酸还原酶(NR)研究进展 | 第13-15页 |
| ·亚硝酸还原酶(NIR)研究进展 | 第15-18页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第18-19页 |
| ·技术路线 | 第19-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-37页 |
| ·材料与试剂 | 第20-21页 |
| ·植物材料 | 第20页 |
| ·质粒及菌种 | 第20页 |
| ·工具酶和试剂 | 第20页 |
| ·主要仪器与设备 | 第20-21页 |
| ·方法与步骤 | 第21-37页 |
| ·橡胶树亚硝酸还原酶基因克隆 | 第21-30页 |
| ·橡胶树不同组织HbNIR基因表达的差异 | 第30-32页 |
| ·HbNIR的原核表达及条件优化 | 第32-37页 |
| 3 结果与分析 | 第37-51页 |
| ·橡胶树不同组织RNA的提取及检测 | 第37页 |
| ·HbNIR基因全长cDNA的克隆及序列分析 | 第37-45页 |
| ·HbNIR基因保守区的扩增 | 第37-38页 |
| ·HbNIR基因5’端序列的扩增 | 第38页 |
| ·HbNIR基因3’端序列的扩增 | 第38-40页 |
| ·HbNIR基因全长序列的克隆 | 第40-42页 |
| ·石汤NIR基因的生物信息学分析 | 第42-45页 |
| ·不同组织中HbNIR基因表达的差异比较 | 第45-46页 |
| ·HbNIR基因的原核表达及条件优化 | 第46-50页 |
| ·原核表达载体pGEX-6p-1-HbNIR的构建 | 第46-47页 |
| ·HbNIR原核表达菌株的鉴定 | 第47-48页 |
| ·原核表达条件的筛选 | 第48-50页 |
| ·HbNIR融合表达蛋白的提取粗酶液活性检测 | 第50-51页 |
| 4 讨论与结论 | 第51-54页 |
| ·讨论 | 第51-53页 |
| ·HbNIR不同组织半定量的差异表达研究 | 第51页 |
| ·表达载体的构建及其转化 | 第51-52页 |
| ·酶粗提物功能初步鉴定 | 第52页 |
| ·HbNIR基因与组培再生能力的相关性 | 第52-53页 |
| ·结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-60页 |
| 附录 | 第60-63页 |
| 附录一:有关试剂的配制 | 第60-62页 |
| 附录二:缩略词 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63页 |