摘要 | 第3-5页 |
abstract | 第5-7页 |
缩略词表 | 第8-16页 |
第一章 前言 | 第16-31页 |
1.1 研究背景 | 第16-29页 |
1.1.1 植物成花及成花逆转研究进展 | 第16-18页 |
1.1.1.1 植物成花途径研究 | 第16-17页 |
1.1.1.2 植物成花逆转研究 | 第17-18页 |
1.1.2 荔枝成花研究现状 | 第18-22页 |
1.1.2.1 环境对荔枝成花的影响 | 第19-20页 |
1.1.2.2 荔枝成花生理生化基础 | 第20-22页 |
1.1.2.3 荔枝成花相关基因研究 | 第22页 |
1.1.3 叶片衰老研究进展 | 第22-24页 |
1.1.3.1 影响叶片衰老因素 | 第22-23页 |
1.1.3.2 叶片衰老相关基因 | 第23-24页 |
1.1.4 荔枝雏形叶与花发育关系 | 第24-25页 |
1.1.5 高通量测序技术研究进展 | 第25-26页 |
1.1.5.1 转录组测序技术 | 第25页 |
1.1.5.2 表达谱测序技术 | 第25-26页 |
1.1.6 NAC转录因子研究进展 | 第26页 |
1.1.6.1 NAC转录因子的结构 | 第26页 |
1.1.6.2 NAC转录因子的功能 | 第26页 |
1.1.7 VIGS应用研究进展 | 第26-29页 |
1.1.7.1 VIGS载体病毒的范围 | 第27-28页 |
1.1.7.2 VIGS技术应用的范围 | 第28页 |
1.1.7.3 影响VIGS效率的因素 | 第28-29页 |
1.2 研究目的及意义 | 第29-30页 |
1.3 研究技术路线 | 第30-31页 |
第二章 不同品种花序雏形叶对花序生长发育的影响 | 第31-52页 |
2.1 引言 | 第31页 |
2.2 材料与方法 | 第31-34页 |
2.2.1 试验材料 | 第31页 |
2.2.2 实验方法 | 第31-34页 |
2.2.2.1 荔枝成花情况调查 | 第31-32页 |
2.2.2.2 代谢谱GC-MS分析 | 第32-34页 |
2.2.2.3 荔枝果实品质分析 | 第34页 |
2.2.2.4 实验结果统计分析 | 第34页 |
2.3 结果与分析 | 第34-49页 |
2.3.1 ‘糯米糍’和‘桂味’花序雏形叶对花序发育的影响 | 第34-36页 |
2.3.2 不同的温度处理对‘糯米糍’和‘桂味’荔枝花序发育的影响 | 第36-41页 |
2.3.3 不同类型花序枝韧皮部浸出液成分分析 | 第41-45页 |
2.3.3.1 代谢谱物质种类筛选分析 | 第42-44页 |
2.3.3.2 ‘糯米糍’代谢物质分析 | 第44页 |
2.3.3.3 ‘桂味’代谢物质分析 | 第44页 |
2.3.3.4 代谢物质相对含量的热图分析 | 第44-45页 |
2.3.3.5 主要代谢物质PCA分析 | 第45页 |
2.3.4 不同类型花序枝坐果后果实品质分析 | 第45-49页 |
2.4 讨论 | 第49-52页 |
2.4.1 荔枝花序上的雏形叶对花序发育的影响 | 第49-50页 |
2.4.2 韧皮部浸出液代谢组学分析 | 第50-52页 |
第三章 荔枝不同发育方向的花序及雏形叶的表达谱分析 | 第52-72页 |
3.1 引言 | 第52页 |
3.2 材料与方法 | 第52-55页 |
3.2.1 实验材料 | 第52页 |
3.2.2 实验方法 | 第52-55页 |
3.2.2.1 总RNA的提取 | 第52-53页 |
3.2.2.2 表达谱测序流程 | 第53页 |
2.2.2.3 原始数据分析流程 | 第53-54页 |
3.2.2.4 差异基因分析流程 | 第54-55页 |
3.3 结果与分析 | 第55-69页 |
3.3.1 原始测序数据过滤比对与分析 | 第55页 |
3.3.2 测序样品生物学重复关联分析 | 第55页 |
3.3.3 测序样品差异表达基因的分析 | 第55-57页 |
3.3.4 样品差异表达基因分类与筛选 | 第57-69页 |
3.3.4.1 差异表达基因GO分类 | 第57-62页 |
3.3.4.2 差异表达基因趋势分析 | 第62页 |
3.3.4.3 NAC转录因子差异表达基因分析 | 第62-65页 |
3.3.4.4 激素相关差异表达基因分析 | 第65-69页 |
3.4 讨论 | 第69-72页 |
第四章 过表达NACs促进活性氧诱导的拟南芥和烟草的衰老 | 第72-85页 |
4.1 引言 | 第72页 |
4.2 材料与方法 | 第72-77页 |
4.2.1 实验材料 | 第72-73页 |
4.2.1.1 植物材料 | 第72页 |
4.2.1.2 菌株与质粒 | 第72-73页 |
4.2.1.3 实验试剂 | 第73页 |
4.2.1.4 实验器材 | 第73页 |
4.2.2 实验方法 | 第73-77页 |
4.2.2.1 总RNA提取 | 第73-74页 |
4.2.2.2 cDNA第一链合成 | 第74页 |
4.2.2.3 目的基因克隆 | 第74-75页 |
4.2.2.4 荧光定量PCR | 第75-76页 |
4.2.2.5 表达载体构建 | 第76页 |
4.2.2.6 拟南芥遗传转化 | 第76页 |
4.2.2.7 烟草遗传转化 | 第76-77页 |
4.2.2.8 阳性苗的鉴定 | 第77页 |
4.2.2.9 叶片衰老表型分析 | 第77页 |
4.3 结果与分析 | 第77-82页 |
4.3.1 目的基因分析 | 第77页 |
4.3.2 活性氧对LcNAC5,LcNAC4及LcNAP1表达的影响 | 第77-78页 |
4.3.3 进化树构建分析 | 第78页 |
4.3.4 拟南芥上过表达LcNAC5,LCNAC4和LcNAP1促进ROS诱导的叶片衰老 | 第78-81页 |
4.3.5 烟草上过表达LcNAC5,LcNAC4和LcNAP1促进ROS诱导的叶片衰老 | 第81-82页 |
4.4 讨论 | 第82-85页 |
第五章 利用VIGS研究LcNAC5在雏形叶衰老过程中的作用 | 第85-104页 |
5.1 引言 | 第85页 |
5.2 材料与方法 | 第85-88页 |
5.2.1 实验材料 | 第85-86页 |
5.2.1.1 植物材料 | 第85页 |
5.2.1.2 菌株与质粒 | 第85页 |
5.2.1.3 实验试剂 | 第85-86页 |
5.2.1.4 实验器材 | 第86页 |
5.2.2 实验方法 | 第86-88页 |
5.2.2.1 载体构建 | 第86页 |
5.2.2.2 侵染菌液制备 | 第86页 |
5.2.2.3 侵染荔枝嫩梢 | 第86页 |
5.2.2.4 荧光定量PCR | 第86页 |
5.2.2.5 衰老情况调查 | 第86-87页 |
5.2.2.6 转录组测序流程 | 第87-88页 |
5.3 结果与分析 | 第88-100页 |
5.3.1 沉默载体构建 | 第88页 |
5.3.2 荧光定量检测 | 第88-89页 |
5.3.3 VIGS处理后延迟MV诱导的叶片衰老 | 第89页 |
5.3.4 测序数据分析 | 第89-96页 |
5.3.4.1 测序质量的评估 | 第89-91页 |
5.3.4.2 测序饱和度分析 | 第91-92页 |
5.3.4.3 测序随机性分析 | 第92-93页 |
5.3.4.4 基因覆盖度统计 | 第93页 |
5.3.4.5 表达量丰度统计 | 第93-94页 |
5.3.4.6 样品重复性分析 | 第94-95页 |
5.3.4.7 样品主成分分析 | 第95页 |
5.3.4.8 分组间差异统计 | 第95-96页 |
5.3.5 差异表达基因分析 | 第96-100页 |
5.3.5.1 差异表达基因Go分类统计 | 第96-97页 |
5.3.5.2 差异表达基因KEGG分析 | 第97-99页 |
5.3.5.3 差异表达基因转录因子分析 | 第99-100页 |
5.4 讨论 | 第100-104页 |
5.4.1 VIGS技术对基因功能的研究 | 第100-102页 |
5.4.2 利用R-SEQ测序分析沉默样本 | 第102-104页 |
第六章 LcMCⅡ-1在荔枝叶片衰老过程中的功能研究 | 第104-120页 |
6.1 引言 | 第104页 |
6.2 材料与方法 | 第104-107页 |
6.2.1 实验材料 | 第104-105页 |
6.2.1.1 植物材料 | 第104-105页 |
6.2.1.2 菌株与质粒 | 第105页 |
6.2.1.3 实验试剂 | 第105页 |
6.2.2 实验方法 | 第105-107页 |
6.2.2.1 总RNA提取 | 第105页 |
6.2.2.2 cDNA第一链合成 | 第105页 |
6.2.2.3 目的基因克隆 | 第105页 |
6.2.2.4 荧光定量PCR | 第105页 |
6.2.2.5 亚细胞的定位 | 第105-106页 |
6.2.2.6 VIGS实验 | 第106页 |
6.2.2.7 拟南芥的转化 | 第106页 |
6.2.2.8 烟草瞬时转化 | 第106-107页 |
6.3 结果与分析 | 第107-115页 |
6.3.1 目的基因分析 | 第107页 |
6.3.2 亚细胞定位分析 | 第107页 |
6.3.3 表达模式分析 | 第107-113页 |
6.3.3.1 MV诱导雏形叶脱落 | 第107-112页 |
6.3.3.2 低温诱导雏形叶脱落 | 第112页 |
6.3.3.3 自然状态下衰老叶片 | 第112-113页 |
6.3.4 VIGS基因沉默分析 | 第113-114页 |
6.3.5 过表达拟南芥分析 | 第114-115页 |
6.3.6 烟草瞬时转化分析 | 第115页 |
6.4 讨论 | 第115-120页 |
6.4.1 LcMCⅡ-1表达分析 | 第115-118页 |
6.4.2 LcMCⅡ-1功能分析 | 第118-120页 |
第七章 全文总结 | 第120-124页 |
7.1 主要研究内容 | 第120-122页 |
7.2 本论文创新点 | 第122-123页 |
7.3 后续研究展望 | 第123-124页 |
致谢 | 第124-125页 |
参考文献 | 第125-142页 |
附录A | 第142-144页 |
附录B | 第144页 |