| 摘要 | 第3-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 缩略语 | 第13-15页 |
| 1 前言 | 第15-29页 |
| 1.1 离子液体生物毒性研究概况 | 第15-19页 |
| 1.1.1 离子液体对植物的毒性 | 第15-16页 |
| 1.1.2 离子液体对动物的毒性 | 第16-17页 |
| 1.1.3 离子液体对微生物的毒性 | 第17-18页 |
| 1.1.4 离子液体对体外培养细胞的毒性 | 第18-19页 |
| 1.2 涡虫毒理学研究进展 | 第19-21页 |
| 1.2.1 射线对涡虫的毒性作用 | 第19-20页 |
| 1.2.2 重金属离子对涡虫的毒性作用 | 第20页 |
| 1.2.3 杀虫剂和除草剂对涡虫的毒性作用 | 第20-21页 |
| 1.3 涡虫的性化机制及生殖相关基因 | 第21-28页 |
| 1.3.1 涡虫的性化机制研究 | 第22-23页 |
| 1.3.2 涡虫生殖相关基因 | 第23-28页 |
| 1.4 本研究的内容、目的和意义 | 第28-29页 |
| 2 材料 | 第29-35页 |
| 2.1 实验动物 | 第29页 |
| 2.1.1 淡水涡虫的野外采集 | 第29页 |
| 2.1.2 实验用涡虫的来源 | 第29页 |
| 2.2 试剂与仪器 | 第29-34页 |
| 2.2.1 试剂及相关配制 | 第29-32页 |
| 2.2.2 仪器设备 | 第32-34页 |
| 2.3 实验用引物 | 第34-35页 |
| 3 方法 | 第35-59页 |
| 3.1 [C_8mim]Br对日本三角涡虫(D.japonica)的急性毒性实验 | 第35页 |
| 3.2 [C_8mim]Br对日本三角涡虫(D.japonica)的组织毒性实验 | 第35-37页 |
| 3.2.1 离子液体毒性暴露与取样 | 第35页 |
| 3.2.2 石蜡切片方法 | 第35-37页 |
| 3.3 [C_8mim]Br对日本三角涡虫(D.japonica)的生化毒性实验 | 第37-42页 |
| 3.3.1 离子液体毒性暴露与取样 | 第37页 |
| 3.3.2 BCA蛋白定量 | 第37-38页 |
| 3.3.3 抗氧化酶SOD、CAT、GPX活力及GSH、MDA含量测定 | 第38-42页 |
| 3.3.4 统计分析 | 第42页 |
| 3.4 [C_8mim]Br对日本三角涡虫(D.japonica)去性化的影响 | 第42-43页 |
| 3.4.1 饥饿诱导日本三角涡虫(D.japonica)去性化过程的形态学观察及取样 | 第42页 |
| 3.4.2 离子液体暴露与取样 | 第42页 |
| 3.4.3 石蜡切片方法 | 第42-43页 |
| 3.4.4 透射电镜超薄切片技术 | 第43页 |
| 3.5 日本三角涡虫(D.japonica)生殖相关基因DjPRPS、DjSoxB的克隆及生物信息学 | 第43-52页 |
| 3.5.1 日本三角涡虫(D.japonica)总RNA的提取与检测 | 第43-45页 |
| 3.5.2 日本三角涡虫(D.japonica)cDNA的制备 | 第45页 |
| 3.5.3 日本三角涡虫(D.japonica)DjPRPS、DjSoxB基因的克隆及测序 | 第45-51页 |
| 3.5.4 日本三角涡虫(D.japonica)DjPRPS、DjSoxB基因序列拼接及生物信息学分析 | 第51-52页 |
| 3.6 日本三角涡虫(D.japonica)生殖相关基因DjPRPS、DjSoxB的表达模式 | 第52-59页 |
| 3.6.1 日本三角涡虫(D.japonica)DjPRPS、DjSoxB基因的整体原位杂交 | 第52-57页 |
| 3.6.2 离子液体[C_8mim]Br胁迫下DjPRPS、DjSoxB基因的实时荧光定量PCR | 第57-59页 |
| 4 结果 | 第59-95页 |
| 4.1 [C_8mim]Br对日本三角涡虫(D.japonica)的急性毒性 | 第59-62页 |
| 4.1.1 半致死浓度(LCso) | 第59页 |
| 4.1.2 日本三角涡虫(D.japonica)的死亡率 | 第59-60页 |
| 4.1.3 日本三角涡虫(D.japonica)的运动改变和形态改变 | 第60-62页 |
| 4.2 [C_8mim]Br对日本三角涡虫(D.japonica)的组织损伤 | 第62-63页 |
| 4.3 [C_8mim]Br对日本三角涡虫(D.japonica)抗氧化系统的影响 | 第63-68页 |
| 4.3.1 标准曲线及样品蛋白浓度 | 第63-65页 |
| 4.3.2 [C_8mim]Br处理对日本三角涡虫(D.japonica)SOD活力的影响 | 第65页 |
| 4.3.3 [C_8mim]Br处理对日本三角涡虫(D.japonica)CAT活力的影响 | 第65-66页 |
| 4.3.4 [C_8mim]Br处理对日本三角涡虫(D.japonica)GPX活力的影响 | 第66-67页 |
| 4.3.5 [C_8mim]Br处理对日本三角涡虫(D.japonica)GSH含量的影响 | 第67页 |
| 4.3.6 [C_8mim]Br处理对日本三角涡虫(D.japonica)MDA含量的影响 | 第67-68页 |
| 4.4 [C_8mim]Br对日本三角涡虫(D.japonica)去性化过程的影响 | 第68-80页 |
| 4.4.1 饥饿诱导下日本三角涡虫(D.japonica)去性化过程的形态学变化 | 第68-71页 |
| 4.4.2 饥饿诱导日本三角涡虫(D.japonica)去性化过程中生殖系统的组织学变化 | 第71-77页 |
| 4.4.3 [C_8mim]Br暴露下日本三角涡虫(D.japonica)去性化过程中生殖腺的组织学变化 | 第77-80页 |
| 4.5 日本三角涡虫(D.japonica)总RNA提取结果 | 第80-81页 |
| 4.6 日本三角涡虫(D.japonica)cDNA制备结果 | 第81页 |
| 4.7 日本三角涡虫(D.japonica)生殖相关基因DjPRPS、DjSoxB全长cDNA克隆及序列分析结果 | 第81-91页 |
| 4.7.1 DjPRPS基因全长cDNA克隆及序列分析结果 | 第81-85页 |
| 4.7.2 DjSoxB基因全长cDNA克隆及序列分析结果 | 第85-91页 |
| 4.8 DjPRPS、DjSoxB基因的整体原位杂交结果 | 第91-92页 |
| 4.8.1 DjPRPS基因的原位杂交结果 | 第91页 |
| 4.8.2 DjSoxB基因的原位杂交结果 | 第91-92页 |
| 4.9 离子液体[C_8mim]Br胁迫下DjPRPS、DjSoxB基因的实时荧光定量RT-PCR结果 | 第92-95页 |
| 4.9.1 DjPRPS基因的实时荧光定量RT-PCR结果 | 第92-93页 |
| 4.9.2 DjSoxB基因的实时荧光定量RT-PCR结果 | 第93-95页 |
| 5 讨论 | 第95-107页 |
| 5.1 关于[C_8mim]Br对日本三角涡虫(D.japonica)的急性毒性 | 第95-96页 |
| 5.2 [C_8mim]Br对日本三角涡虫(D.japonica)组织损伤的机制探讨 | 第96-97页 |
| 5.3 [C_8mim]Br对日本三角涡虫(D.japonica)抗氧化系统的影响 | 第97-100页 |
| 5.4 饥饿诱导日本三角涡虫(D.japonica)的去性化及[C_8mim]Br对其影响 | 第100-101页 |
| 5.5 日本三角涡虫(D.japonica)DjPRPS、DjSoxB基因特征及功能的初步探讨 | 第101-107页 |
| 5.5.1 DjPRPS基因特征及功能的初步探讨 | 第101-103页 |
| 5.5.2 DjSoxB基因特征及功能的初步探讨 | 第103-107页 |
| 结论 | 第107-109页 |
| 参考文献 | 第109-121页 |
| 致谢 | 第121-123页 |
| 攻读学位期间学术成果 | 第123-125页 |
