摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6页 |
第一章 引言 | 第12-43页 |
1 梅花品种选育研究概况 | 第12-20页 |
1.1 种质资源的收集整理 | 第12-15页 |
1.1.1 亲缘种原始材料 | 第12页 |
1.1.2 种内的变种与变型 | 第12-13页 |
1.1.3 梅花品种的搜集与整理 | 第13-15页 |
1.1.3.1 真梅种系 | 第13-15页 |
1.1.3.2 杏梅种系 | 第15页 |
1.1.3.3 樱李梅种系 | 第15页 |
1.2 品种选育与品质改良 | 第15-18页 |
1.2.1 育种目标 | 第15-16页 |
1.2.1.1 提高观赏品质 | 第16页 |
1.2.1.2 树姿新奇 | 第16页 |
1.2.1.3 增强抗性 | 第16页 |
1.2.1.4 改变花期 | 第16页 |
1.2.1.5 花果兼用 | 第16页 |
1.2.2 品种选育 | 第16-18页 |
1.2.2.1 引种 | 第16-17页 |
1.2.2.2 选择育种 | 第17页 |
1.2.2.3 杂交育种 | 第17-18页 |
1.2.2.4 辐射育种 | 第18页 |
1.3 遗传背景研究 | 第18-19页 |
1.3.1 花器构造及染色体 | 第18页 |
1.3.2 开花授粉生物学 | 第18-19页 |
1.3.3 亲缘关系 | 第19页 |
1.4 新品种的国际登录与保护 | 第19-20页 |
2 园艺植物遗传多样性及品种鉴定技术研究进展 | 第20-40页 |
2.1 形态标记 | 第20-22页 |
2.2 细胞学标记技术 | 第22-24页 |
2.3 生化标记技术 | 第24-27页 |
2.3.1 生化大分子标记技术 | 第24-25页 |
2.3.2 蛋白质指纹标记 | 第25-27页 |
2.3.2.1 贮藏蛋白指纹标记技术 | 第25-26页 |
2.3.2.2 酶指纹标记技术 | 第26-27页 |
2.4 DNA指纹图谱技术 | 第27-37页 |
2.4.1 常用分子标记的基本原理及其应用 | 第30-36页 |
2.4.1.1 限制性片段长度多态性(Restriction Fragment Length Polymorphism, RFLP) | 第30页 |
2.4.1.2 随机扩增片段长度多态性(Randomly Amplified Polymorphic DNA, RAPD) | 第30-33页 |
2.4.1.3 简单重复顺序(Simple Sequence Repeats, SSR) | 第33-34页 |
2.4.1.4 扩增片段长度多态性(Amplified Fragment Length Polymophism, AFLP) | 第34-36页 |
2.4.2 常用分子标记RFLP、RAPD、SSR、AFLP比较 | 第36-37页 |
2.5 展望 | 第37-40页 |
3 梅花DNA指纹图谱建立与研究立题目的及依据 | 第40-43页 |
3.1 本研究的目的和意义 | 第40页 |
3.2 国内外研究梅花品种及分类的现状及发展趋势 | 第40-43页 |
第二章 银染法AFLP技术应用于本研究的可靠性、可行性分析 | 第43-57页 |
1 AFLP的原理 | 第43-47页 |
1.1 放射性自显影显带法 | 第46页 |
1.2 银染显带法 | 第46-47页 |
1.3 荧光显带法 | 第47页 |
2 AFLP指纹可靠性分析 | 第47-54页 |
2.1 样品的代表性 | 第48页 |
2.2 扩增的稳定性和可比性 | 第48-50页 |
2.2.1 不同体系扩增结果重复性比较 | 第49-50页 |
2.2.2 相同体系不同批次的重复性比较 | 第50页 |
2.3 数据记录的可靠性 | 第50-51页 |
2.4 分析模型的适用性和准确性 | 第51-54页 |
3 银染法AFLP可行性(成本)比较 | 第54-55页 |
3.1 试剂成本 | 第54-55页 |
3.2 实验设备 | 第55页 |
4 结论与小结 | 第55-57页 |
第三章 AFLP银染反应体系的建立与优化 | 第57-67页 |
1 材料和方法 | 第57-62页 |
1.1 材料 | 第57-58页 |
1.2 方法 | 第58-62页 |
1.2.1 DNA提取 | 第58-59页 |
1.2.2 DNA浓度与质量测定 | 第59页 |
1.2.3 酶切连接与预扩增模板DNA制备 | 第59页 |
1.2.4 选择性扩增模板DNA制备(预扩) | 第59-60页 |
1.2.5 选择性扩增 | 第60页 |
1.2.6 电泳聚丙烯酰胺凝胶的制备 | 第60-61页 |
1.2.7 扩增产物的凝胶电泳分析 | 第61-62页 |
2 结果与分析 | 第62-66页 |
2.1 DNA提取结果及检测 | 第62-65页 |
2.1.1 DNA浓度的紫外检测 | 第63页 |
2.1.2 凝胶电泳检测 | 第63页 |
2.1.3 DNA提取分析 | 第63-65页 |
2.2 扩增模板的检测 | 第65页 |
2.3 选扩产物在聚丙烯酰胺凝胶(PAGE序列分析胶)上电泳后银染结果 | 第65-66页 |
3 讨论及小结 | 第66-67页 |
第四章 梅花DNA指纹图谱构建 | 第67-117页 |
1 引言 | 第67页 |
2 材料(实验品种样品)与(分析)方法 | 第67-71页 |
2.1 梅花品种及近缘种实验材料 | 第67-70页 |
2.2 实验仪器及试剂 | 第70页 |
2.3 引物的选择及合成 | 第70页 |
2.4 实验方法 | 第70页 |
2.5 实验数据的记录分析方法 | 第70-71页 |
3 结果与分析 | 第71-114页 |
3.1 AFLP引物筛选 | 第71-73页 |
3.1.1 内切酶及引物类型的选择 | 第71-72页 |
3.1.2 AFLP引物筛选 | 第72-73页 |
3.2 梅花品种鉴定分析 | 第73-84页 |
3.2.1 供试梅花AFLP指纹鉴别结果 | 第74页 |
3.2.2 梅花品种指纹图谱 | 第74-79页 |
3.2.3 梅花品种指纹相似性聚类分析 | 第79-83页 |
3.2.4 分析 | 第83-84页 |
3.3 梅花形态特征相近的品种鉴定与界定 | 第84-89页 |
3.3.1 来源于同一家系的相近品种的鉴别 | 第84-85页 |
3.3.2 来源不同但形态特征相似的品种鉴别 | 第85-87页 |
3.3.3 分析 | 第87-89页 |
3.4 梅与近缘种亲缘关系分析 | 第89-99页 |
3.4.1 近缘种的确定及其样品的选取 | 第89页 |
3.4.2 梅与近缘种关系分析方法 | 第89-90页 |
3.4.3 梅与近缘种关系分析聚类结果 | 第90-97页 |
3.4.4 聚类结果分析 | 第97-99页 |
3.5 ‘美人’梅的父系推测分析 | 第99-114页 |
3.5.1 ‘美人’梅的可能亲本的聚类分析 | 第100-114页 |
3.5.2 ‘美人’梅的可能亲本的聚类结论分析 | 第114页 |
4 讨论与小结 | 第114-117页 |
4.1 相近品种的鉴定与界定 | 第114-115页 |
4.2 梅花品种登录所需指纹信息 | 第115-116页 |
4.3 梅花进化关系的比较 | 第116页 |
4.4 与其他标记、品种分类比较 | 第116-117页 |
第五章 梅花核心种质构建研究 | 第117-130页 |
1 核心种质概念、特点与意义 | 第117-118页 |
2 核心种质的建立方法 | 第118-119页 |
2.1 数据的收集整理 | 第118页 |
2.2 种质资源的分组 | 第118页 |
2.3 核心样品的选择 | 第118-119页 |
2.4 核心种质的检验与评价 | 第119页 |
3 梅花核心种质的建立 | 第119-127页 |
3.1 梅花种质数据的收集整理 | 第119页 |
3.2 梅花种质的分组 | 第119页 |
3.3 梅花种质的分组聚类分析 | 第119-127页 |
3.3.1 宫粉组核心样品的聚类取样 | 第120-124页 |
3.3.2 朱砂组核心样品的聚类取样 | 第124-125页 |
3.3.3 杏梅组核心样品的聚类取样 | 第125-126页 |
3.3.4 江梅组核心样品的聚类取样 | 第126-127页 |
4 对梅花核心种质有效性的检验 | 第127-128页 |
4.1 对梅花核心种质的遗传多样性检验 | 第127-128页 |
4.2 对梅花核心种质的实用性分析检验 | 第128页 |
5 讨论与小结 | 第128-130页 |
第六章 结论 | 第130-133页 |
参考文献 | 第133-144页 |
导师简介 | 第144-145页 |
个人简历 | 第145页 |
博士研究生期间已发表论文 | 第145-146页 |
致谢 | 第146页 |