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梅花DNA指纹图谱的建立与研究

摘要第4-6页
ABSTRACT第6页
第一章 引言第12-43页
    1 梅花品种选育研究概况第12-20页
        1.1 种质资源的收集整理第12-15页
            1.1.1 亲缘种原始材料第12页
            1.1.2 种内的变种与变型第12-13页
            1.1.3 梅花品种的搜集与整理第13-15页
                1.1.3.1 真梅种系第13-15页
                1.1.3.2 杏梅种系第15页
                1.1.3.3 樱李梅种系第15页
        1.2 品种选育与品质改良第15-18页
            1.2.1 育种目标第15-16页
                1.2.1.1 提高观赏品质第16页
                1.2.1.2 树姿新奇第16页
                1.2.1.3 增强抗性第16页
                1.2.1.4 改变花期第16页
                1.2.1.5 花果兼用第16页
            1.2.2 品种选育第16-18页
                1.2.2.1 引种第16-17页
                1.2.2.2 选择育种第17页
                1.2.2.3 杂交育种第17-18页
                1.2.2.4 辐射育种第18页
        1.3 遗传背景研究第18-19页
            1.3.1 花器构造及染色体第18页
            1.3.2 开花授粉生物学第18-19页
            1.3.3 亲缘关系第19页
        1.4 新品种的国际登录与保护第19-20页
    2 园艺植物遗传多样性及品种鉴定技术研究进展第20-40页
        2.1 形态标记第20-22页
        2.2 细胞学标记技术第22-24页
        2.3 生化标记技术第24-27页
            2.3.1 生化大分子标记技术第24-25页
            2.3.2 蛋白质指纹标记第25-27页
                2.3.2.1 贮藏蛋白指纹标记技术第25-26页
                2.3.2.2 酶指纹标记技术第26-27页
        2.4 DNA指纹图谱技术第27-37页
            2.4.1 常用分子标记的基本原理及其应用第30-36页
                2.4.1.1 限制性片段长度多态性(Restriction Fragment Length Polymorphism, RFLP)第30页
                2.4.1.2 随机扩增片段长度多态性(Randomly Amplified Polymorphic DNA, RAPD)第30-33页
                2.4.1.3 简单重复顺序(Simple Sequence Repeats, SSR)第33-34页
                2.4.1.4 扩增片段长度多态性(Amplified Fragment Length Polymophism, AFLP)第34-36页
            2.4.2 常用分子标记RFLP、RAPD、SSR、AFLP比较第36-37页
        2.5 展望第37-40页
    3 梅花DNA指纹图谱建立与研究立题目的及依据第40-43页
        3.1 本研究的目的和意义第40页
        3.2 国内外研究梅花品种及分类的现状及发展趋势第40-43页
第二章 银染法AFLP技术应用于本研究的可靠性、可行性分析第43-57页
    1 AFLP的原理第43-47页
        1.1 放射性自显影显带法第46页
        1.2 银染显带法第46-47页
        1.3 荧光显带法第47页
    2 AFLP指纹可靠性分析第47-54页
        2.1 样品的代表性第48页
        2.2 扩增的稳定性和可比性第48-50页
            2.2.1 不同体系扩增结果重复性比较第49-50页
            2.2.2 相同体系不同批次的重复性比较第50页
        2.3 数据记录的可靠性第50-51页
        2.4 分析模型的适用性和准确性第51-54页
    3 银染法AFLP可行性(成本)比较第54-55页
        3.1 试剂成本第54-55页
        3.2 实验设备第55页
    4 结论与小结第55-57页
第三章 AFLP银染反应体系的建立与优化第57-67页
    1 材料和方法第57-62页
        1.1 材料第57-58页
        1.2 方法第58-62页
            1.2.1 DNA提取第58-59页
            1.2.2 DNA浓度与质量测定第59页
            1.2.3 酶切连接与预扩增模板DNA制备第59页
            1.2.4 选择性扩增模板DNA制备(预扩)第59-60页
            1.2.5 选择性扩增第60页
            1.2.6 电泳聚丙烯酰胺凝胶的制备第60-61页
            1.2.7 扩增产物的凝胶电泳分析第61-62页
    2 结果与分析第62-66页
        2.1 DNA提取结果及检测第62-65页
            2.1.1 DNA浓度的紫外检测第63页
            2.1.2 凝胶电泳检测第63页
            2.1.3 DNA提取分析第63-65页
        2.2 扩增模板的检测第65页
        2.3 选扩产物在聚丙烯酰胺凝胶(PAGE序列分析胶)上电泳后银染结果第65-66页
    3 讨论及小结第66-67页
第四章 梅花DNA指纹图谱构建第67-117页
    1 引言第67页
    2 材料(实验品种样品)与(分析)方法第67-71页
        2.1 梅花品种及近缘种实验材料第67-70页
        2.2 实验仪器及试剂第70页
        2.3 引物的选择及合成第70页
        2.4 实验方法第70页
        2.5 实验数据的记录分析方法第70-71页
    3 结果与分析第71-114页
        3.1 AFLP引物筛选第71-73页
            3.1.1 内切酶及引物类型的选择第71-72页
            3.1.2 AFLP引物筛选第72-73页
        3.2 梅花品种鉴定分析第73-84页
            3.2.1 供试梅花AFLP指纹鉴别结果第74页
            3.2.2 梅花品种指纹图谱第74-79页
            3.2.3 梅花品种指纹相似性聚类分析第79-83页
            3.2.4 分析第83-84页
        3.3 梅花形态特征相近的品种鉴定与界定第84-89页
            3.3.1 来源于同一家系的相近品种的鉴别第84-85页
            3.3.2 来源不同但形态特征相似的品种鉴别第85-87页
            3.3.3 分析第87-89页
        3.4 梅与近缘种亲缘关系分析第89-99页
            3.4.1 近缘种的确定及其样品的选取第89页
            3.4.2 梅与近缘种关系分析方法第89-90页
            3.4.3 梅与近缘种关系分析聚类结果第90-97页
            3.4.4 聚类结果分析第97-99页
        3.5 ‘美人’梅的父系推测分析第99-114页
            3.5.1 ‘美人’梅的可能亲本的聚类分析第100-114页
            3.5.2 ‘美人’梅的可能亲本的聚类结论分析第114页
    4 讨论与小结第114-117页
        4.1 相近品种的鉴定与界定第114-115页
        4.2 梅花品种登录所需指纹信息第115-116页
        4.3 梅花进化关系的比较第116页
        4.4 与其他标记、品种分类比较第116-117页
第五章 梅花核心种质构建研究第117-130页
    1 核心种质概念、特点与意义第117-118页
    2 核心种质的建立方法第118-119页
        2.1 数据的收集整理第118页
        2.2 种质资源的分组第118页
        2.3 核心样品的选择第118-119页
        2.4 核心种质的检验与评价第119页
    3 梅花核心种质的建立第119-127页
        3.1 梅花种质数据的收集整理第119页
        3.2 梅花种质的分组第119页
        3.3 梅花种质的分组聚类分析第119-127页
            3.3.1 宫粉组核心样品的聚类取样第120-124页
            3.3.2 朱砂组核心样品的聚类取样第124-125页
            3.3.3 杏梅组核心样品的聚类取样第125-126页
            3.3.4 江梅组核心样品的聚类取样第126-127页
    4 对梅花核心种质有效性的检验第127-128页
        4.1 对梅花核心种质的遗传多样性检验第127-128页
        4.2 对梅花核心种质的实用性分析检验第128页
    5 讨论与小结第128-130页
第六章 结论第130-133页
参考文献第133-144页
导师简介第144-145页
个人简历第145页
博士研究生期间已发表论文第145-146页
致谢第146页

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