| 摘要 | 第8-10页 |
| 英文摘要 | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第12-26页 |
| 1.1 核移植简述 | 第12-13页 |
| 1.2 核移植重编程机制 | 第13-19页 |
| 1.3 母源因子与核移植重编程 | 第19-24页 |
| 1.4 本研究的目的与意义 | 第24-26页 |
| 2 材料与方法 | 第26-34页 |
| 2.1 实验材料 | 第26-29页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第26页 |
| 2.1.2 主要仪器设备 | 第26-27页 |
| 2.1.3 主要试剂及配置 | 第27-29页 |
| 2.1.4 主要生物信息学分析软件及数据库 | 第29页 |
| 2.2 实验方法 | 第29-34页 |
| 2.2.1 33O和42O蛋白样品制备 | 第29-30页 |
| 2.2.2 蛋白质分析胶电泳及图像分析 | 第30页 |
| 2.2.3 蛋白质制备胶电泳及质谱鉴定分析 | 第30-31页 |
| 2.2.4 生物信息学分析 | 第31页 |
| 2.2.5 Western blot | 第31页 |
| 2.2.6 体外胚胎操作（SCNT，PA，IVF） | 第31-32页 |
| 2.2.7 实时定量PCR | 第32页 |
| 2.2.8 免疫荧光检测 | 第32-33页 |
| 2.2.9 iPS细胞诱导 | 第33页 |
| 2.2.10 碱性磷酸酶染色 | 第33页 |
| 2.2.11 GSK126和GSK-J4药物处理 | 第33页 |
| 2.2.12数据分析 | 第33-34页 |
| 3 结果与分析 | 第34-52页 |
| 3.1 猪不同成熟时间MII期卵母细胞的差异蛋白谱的构建 | 第34-39页 |
| 3.1.1 猪体外成熟培养33h和42h的MII期卵母细胞的收集 | 第34页 |
| 3.1.2 330和42O的差异蛋白的分离 | 第34-36页 |
| 3.1.3 330和42O的差异蛋白的鉴定 | 第36-38页 |
| 3.1.4 33O和42O的差异蛋白的生物信息学分析 | 第38-39页 |
| 3.2 母源VIM蛋白在猪核移植重编程中的功能研究 | 第39-44页 |
| 3.2.1 VIM在猪IVF和NT胚胎中的表达模式 | 第39-40页 |
| 3.2.2 干扰母源VIM对猪克隆胚胎发育的影响 | 第40-42页 |
| 3.2.3 母源VIM在核移植重编程中防止基因组损伤 | 第42-44页 |
| 3.3 母源EZH2蛋白在猪核移植重编程中的功能研究 | 第44-52页 |
| 3.3.1 干扰母源EZH2蛋白能够提高猪克隆胚胎发育率 | 第44-45页 |
| 3.3.2 猪早期克隆胚胎的H3K27me3水平高于IVF胚胎 | 第45-46页 |
| 3.3.3 降低供体细胞PEF的H3K27me3水平能够提高克隆胚胎的发育率 | 第46-49页 |
| 3.3.4 降低早期胚胎中的H3K27me3水平能够提高克隆胚胎的发育率 | 第49-50页 |
| 3.3.5 在源头细胞或早期重编程过程中降低H3K27me3水平能够提高iPS诱导效率 | 第50-52页 |
| 4 讨论 | 第52-56页 |
| 4.1 33O和42O之间蛋白质组的差异 | 第52页 |
| 4.2 母源VIM在猪核移植重编程中的功能 | 第52-53页 |
| 4.3 H3K27me3水平对猪克隆胚胎发育的影响 | 第53-56页 |
| 5 结论 | 第56-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-68页 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第68页 |
