| 摘要 | 第6-7页 |
| 英文摘要 | 第7-8页 |
| 英文缩略表 | 第17-18页 |
| 第一章 引言 | 第18-30页 |
| 1.1 农杆菌侵染植物的过程 | 第18-19页 |
| 1.2 参与农杆菌转化过程中的植物蛋白 | 第19-25页 |
| 1.2.1 参与农杆菌附着植物细胞表面的植物蛋白 | 第19-20页 |
| 1.2.2 影响T-DNA复合体和Vir蛋白在植物细胞质中转运的植物蛋白 | 第20-21页 |
| 1.2.3 与T-DNA复合体核定位相关的植物蛋白 | 第21-22页 |
| 1.2.4 与T-DNA复合体解离相关的植物蛋白 | 第22-23页 |
| 1.2.5 参与T-DNA靶向整合的植物蛋白 | 第23-25页 |
| 1.3 植物组织培养植株再生的影响因素 | 第25-28页 |
| 1.3.1 植物激素 | 第25-26页 |
| 1.3.2 外植体类型 | 第26页 |
| 1.3.3 培养条件 | 第26页 |
| 1.3.4 影响植物组织培养植株再生的相关基因 | 第26-28页 |
| 1.4 本研究的目的和意义 | 第28页 |
| 1.5 技术路线 | 第28-30页 |
| 第二章 小麦TaVIP2基因的克隆和分子特性分析 | 第30-50页 |
| 2.1 试验材料 | 第30-31页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第30页 |
| 2.1.2 载体、酶及主要试剂 | 第30-31页 |
| 2.1.3 引物 | 第31页 |
| 2.2 试验方法 | 第31-39页 |
| 2.2.1 小麦总RNA的提取及反转录 | 第31-32页 |
| 2.2.2 目标基因的PCR扩增 | 第32-33页 |
| 2.2.3 目标基因片段的回收 | 第33页 |
| 2.2.4 目标基因片段的连接、转化和阳性克隆的筛选 | 第33-35页 |
| 2.2.5 目标基因的Southern blotting杂交分析 | 第35-36页 |
| 2.2.6 目标的亚细胞定位分析 | 第36-37页 |
| 2.2.7 目标蛋白的酵母双杂交分析 | 第37-39页 |
| 2.3 结果与分析 | 第39-47页 |
| 2.3.1 小麦TaVIP2基因克隆 | 第39-40页 |
| 2.3.2 小麦TaVIP2基因拷贝数分析 | 第40-41页 |
| 2.3.3 小麦TaVIP2基因的染色体定位 | 第41-42页 |
| 2.3.4 小麦TaVIP2基因的结构分析 | 第42-44页 |
| 2.3.5 小麦TaVIP2基因系统进化树构建 | 第44页 |
| 2.3.6 小麦TaVIP2蛋白的亚细胞定位 | 第44-46页 |
| 2.3.7 小麦TaVIP2蛋白与农杆菌毒性蛋白的互作 | 第46-47页 |
| 2.4 讨论 | 第47-50页 |
| 第三章 小麦TaVIP2基因向烟草和小麦中的转化和功能分析 | 第50-67页 |
| 3.1 试验材料 | 第50-51页 |
| 3.1.1 试验材料和病原菌 | 第50页 |
| 3.1.2 载体、酶及主要试剂 | 第50页 |
| 3.1.3 本章所用引物序列 | 第50-51页 |
| 3.2 试验方法 | 第51-56页 |
| 3.2.1 表达载体构建 | 第51-52页 |
| 3.2.2 表达载体转入农杆菌 | 第52页 |
| 3.2.3 转基因烟草植株获得 | 第52-53页 |
| 3.2.4 转基因烟草植株的检测 | 第53-54页 |
| 3.2.5 过表达TaVIP2基因烟草植株重复转化 | 第54页 |
| 3.2.6 过表达TaVIP2转基因烟草白粉病抗性鉴定 | 第54-55页 |
| 3.2.7 转基因小麦植株获得及检测 | 第55-56页 |
| 3.3 结果与分析 | 第56-64页 |
| 3.3.1 TaVIP2基因过表达载体的构建 | 第56页 |
| 3.3.2 TaVIP2基因过表达烟草植株的获得和检测 | 第56-59页 |
| 3.3.3 过表达TaVIP2基因对烟草重复转化率的影响 | 第59-60页 |
| 3.3.4 过表达TaVIP2基因烟草白粉病抗性鉴定 | 第60-62页 |
| 3.3.5 过表达TaVIP2基因烟草植株中抗病相关基因的表达分析 | 第62页 |
| 3.3.6 过表达TaVIP2基因小麦植株的获得及检测 | 第62-64页 |
| 3.4 讨论 | 第64-67页 |
| 3.4.1 农杆菌介导法转入基因的拷贝数与表达量 | 第64-65页 |
| 3.4.2 调控VIP2基因表达提高农杆菌转化小麦等植物转化效率的潜力 | 第65页 |
| 3.4.3 植物主要免疫途径 | 第65-67页 |
| 第四章 小麦TaVIP1基因的克隆、分子特性及功能分析 | 第67-76页 |
| 4.1 材料与方法 | 第67-68页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第67页 |
| 4.1.2 载体、酶及主要试剂 | 第67-68页 |
| 4.1.3 本章所用引物序列 | 第68页 |
| 4.2 试验方法 | 第68-69页 |
| 4.2.1 目标基因同源序列获得 | 第68页 |
| 4.2.2 目标基因拷贝数分析 | 第68页 |
| 4.2.3 目标基因的亚细胞定位 | 第68页 |
| 4.2.4 过表达载体的构建 | 第68-69页 |
| 4.2.5 目标基因向烟草转化及转基因烟草植株检测 | 第69页 |
| 4.3 结果与分析 | 第69-74页 |
| 4.3.1 小麦TaVIP1基因的克隆 | 第69-70页 |
| 4.3.2 小麦TaVIP1基因拷贝数分析 | 第70-71页 |
| 4.3.3 小麦TaVIP1基因的染色体定位 | 第71页 |
| 4.3.4 小麦TaVIP1基因的系统进化树构建 | 第71-72页 |
| 4.3.5 小麦TaVIP1蛋白的亚细胞定位 | 第72-73页 |
| 4.3.6 小麦TaVIP1基因过表达载体的构建和验证 | 第73页 |
| 4.3.7 转TaVIP1基因烟草植株的获得和功能分析 | 第73-74页 |
| 4.4 讨论 | 第74-76页 |
| 4.4.1 TaVIP1基因的克隆及定位 | 第74-75页 |
| 4.4.2 VIP1在植物农杆菌遗传转化过程中的作用 | 第75-76页 |
| 第五章 小麦TaWOX5基因的克隆和功能分析 | 第76-90页 |
| 5.1 试验材料 | 第76-77页 |
| 5.1.1 植物材料 | 第76页 |
| 5.1.2 酶及主要试剂 | 第76页 |
| 5.1.3 引物 | 第76-77页 |
| 5.2 试验方法 | 第77-79页 |
| 5.2.1 目标基因的PCR扩增 | 第77页 |
| 5.2.2 目标基因的Southern blotting杂交 | 第77页 |
| 5.2.3 目标基因多态性分析 | 第77页 |
| 5.2.4 real-time PCR分析 | 第77页 |
| 5.2.5 表达载体构建 | 第77-78页 |
| 5.2.6 目标基因转化烟草和转基因植株检测 | 第78-79页 |
| 5.2.7 目标基因转化小麦和转基因植株检测 | 第79页 |
| 5.3 结果与分析 | 第79-88页 |
| 5.3.1 小麦TaWOX5基因的扩增 | 第79-81页 |
| 5.3.2 小麦TaWOX5基因的拷贝数分析 | 第81页 |
| 5.3.3 不同品种小麦TaWOX5基因的克隆 | 第81-83页 |
| 5.3.4 小麦TaWOX5基因组织表达特异性分析 | 第83页 |
| 5.3.5 小麦TaWOX5基因过表达载体的构建 | 第83页 |
| 5.3.6 转TaWOX5基因烟草植株的获得和检测 | 第83-85页 |
| 5.3.7 转TaWOX5基因小麦植株的获得和检测 | 第85-86页 |
| 5.3.8 过表达TaWOX5基因小麦植株的表型鉴定 | 第86-88页 |
| 5.4 讨论 | 第88-90页 |
| 5.4.1 TaWOX5基因家族的多态性和表达模式 | 第88-89页 |
| 5.4.2 过表达TaWOX5基因对植株形态的影响 | 第89-90页 |
| 第六章 小麦组蛋白基因的克隆、分子特性及功能分析 | 第90-96页 |
| 6.1 试验材料 | 第90-91页 |
| 6.1.1 植物材料 | 第90页 |
| 6.1.2 载体、酶及主要试剂 | 第90页 |
| 6.1.3 引物 | 第90-91页 |
| 6.2 试验方法 | 第91-92页 |
| 6.2.1 RNA-seq分析 | 第91页 |
| 6.2.2 目标基因的PCR扩增 | 第91页 |
| 6.2.3 表达载体构建 | 第91-92页 |
| 6.2.4 目标基因向烟草植株的转化 | 第92页 |
| 6.2.5 目标基因向小麦的转化 | 第92页 |
| 6.3 结果与分析 | 第92-95页 |
| 6.3.1 小麦TaHistone H1和TaHistone H2B基因的克隆 | 第92-93页 |
| 6.3.2 小麦TaHistone H1和TaHistone H2B基因过表达载体的构建 | 第93页 |
| 6.3.3 小麦TaHistone H1和TaHistone H2B基因过表达烟草的获得和检测 | 第93-94页 |
| 6.3.4 过表达TaHistone H1和TaHistone H2B基因小麦的获得和检测 | 第94-95页 |
| 6.4 讨论 | 第95-96页 |
| 第七章 全文结论 | 第96-98页 |
| 7.1 克隆了小麦TaVIP2基因并进行分子特性分析 | 第96页 |
| 7.2 在烟草中过表达TaVIP2基因增加了农杆菌介导的烟草转化率和烟草对白粉病的抗性 | 第96页 |
| 7.3 克隆了小麦TaVIP1基因并进行分子特性和功能分析 | 第96-97页 |
| 7.4 克隆了小麦TaWOX5基因并进行分子特性和功能分析 | 第97页 |
| 7.5 克隆了小麦组蛋白TaHistoneH1和TaHistoneH2B基因 | 第97-98页 |
| 参考文献 | 第98-110页 |
| 附录 | 第110-120页 |
| 致谢 | 第120-121页 |
| 作者简历 | 第121页 |
