| 中文摘要 | 第10-12页 |
| ABSTRACT | 第12-14页 |
| 1 引言 | 第15-28页 |
| 1.1 禽白血病的发展史 | 第15-16页 |
| 1.2 病原学 | 第16-19页 |
| 1.2.1 分类 | 第16页 |
| 1.2.2 形态学 | 第16-17页 |
| 1.2.3 病毒复制 | 第17页 |
| 1.2.4 理化特性 | 第17页 |
| 1.2.5 病毒的全基因组结构 | 第17-19页 |
| 1.2.6 ALV的致瘤机制 | 第19页 |
| 1.3 流行病学 | 第19-21页 |
| 1.3.1 宿主范围 | 第19-20页 |
| 1.3.2 传播途径 | 第20-21页 |
| 1.3.3 潜伏期 | 第21页 |
| 1.4 临床症状及病理变化 | 第21-22页 |
| 1.5 ALV的诊断与检测 | 第22-26页 |
| 1.5.1 病毒分离与鉴定 | 第23页 |
| 1.5.2 血清学检测 | 第23-25页 |
| 1.5.2.1 酶标免疫荧光检测技术 | 第23-24页 |
| 1.5.2.2 免疫荧光检测方法 | 第24页 |
| 1.5.2.3 病毒中和试验 | 第24页 |
| 1.5.2.4 琼脂扩散试验 | 第24-25页 |
| 1.5.3 分子生物学检测方法 | 第25-26页 |
| 1.5.3.1 聚合酶链式反应技术 | 第25页 |
| 1.5.3.2 RT-PCR法 | 第25-26页 |
| 1.6 ALV的防制 | 第26-27页 |
| 1.7 本研究的目的及意义 | 第27-28页 |
| 2 材料及方法 | 第28-39页 |
| 2.1 实验材料 | 第28-29页 |
| 2.1.1 实验仪器 | 第28页 |
| 2.1.2 实验材料与试剂 | 第28-29页 |
| 2.1.2.1 主要材料 | 第28页 |
| 2.1.2.2 主要试剂 | 第28页 |
| 2.1.2.3 相关试剂配制方法 | 第28-29页 |
| 2.1.3 实验地点 | 第29页 |
| 2.2 实验方法 | 第29-39页 |
| 2.2.1 样品采集 | 第29-30页 |
| 2.2.2 卵白中ALV-P27抗原的ELISA检测 | 第30-31页 |
| 2.2.3 阳性卵白分别接种CEF、DF-1 细胞的培养与检测 | 第31-32页 |
| 2.2.3.1 阳性卵白在CEF细胞上的培养 | 第31-32页 |
| 2.2.3.2 阳性卵白在DF-1 细胞上的培养 | 第32页 |
| 2.2.3.3 CEF细胞上清中ALV-P27抗原的ELISA检测 | 第32页 |
| 2.2.3.4 DF-1 细胞上清中ALV-P27抗原的ELISA检测 | 第32页 |
| 2.2.4 卵白接种细胞后ALV-J的IFA检测 | 第32-33页 |
| 2.2.4.1 卵白接种CEF细胞后ALV-J的IFA检测 | 第32-33页 |
| 2.2.4.2 卵白接种DF-1 细胞后ALV-J的IFA检测 | 第33页 |
| 2.2.5 卵白接种细胞后不同亚型ALV的PCR鉴定 | 第33页 |
| 2.2.5.1 卵白接种CEF细胞后不同亚型ALV的PCR鉴定 | 第33页 |
| 2.2.5.2 卵白接种DF-1 细胞后不同亚型ALV的PCR鉴定 | 第33页 |
| 2.2.6 ALV分离株的克隆测序及流行亚型鉴定 | 第33-36页 |
| 2.2.6.1 引物序列 | 第33-34页 |
| 2.2.6.2 PCR反应 | 第34-35页 |
| 2.2.6.3 PCR产物DNA凝胶电泳验证、回收及定量 | 第35-36页 |
| 2.2.6.4 胶回收产物的连接 | 第36页 |
| 2.2.6.5 连接产物的转化 | 第36页 |
| 2.2.6.6 菌液PCR验证及鉴定 | 第36页 |
| 2.2.7 序列分析 | 第36-38页 |
| 2.2.7.1 参考毒株 | 第36-37页 |
| 2.2.7.2 序列分析 | 第37页 |
| 2.2.7.3 遗传基因进化树分析 | 第37页 |
| 2.2.7.4 ALV分离株与参考株的同源性分析 | 第37-38页 |
| 2.2.8 卵白中RNA的提取及不同亚型ALV的检测 | 第38-39页 |
| 2.2.8.1 卵白中RNA的提取 | 第38-39页 |
| 2.2.8.2 不同亚型ALV的检测 | 第39页 |
| 3 结果与分析 | 第39-46页 |
| 3.1 卵白ALV-P27抗原的ELISA检测结果 | 第39-40页 |
| 3.2 细胞培养上清中ALV-P27抗原检测结果 | 第40-41页 |
| 3.2.1 CEF细胞培养上清中ALV-P27抗原检测结果 | 第40-41页 |
| 3.2.2 DF-1 细胞培养上清中ALV-P27抗原检测结果 | 第41页 |
| 3.3 卵白接种细胞后ALV-J的IFA检测结果 | 第41-42页 |
| 3.3.1 卵白接种CEF细胞后ALV-J的IFA检测结果 | 第41-42页 |
| 3.3.2 卵白接种DF-1 细胞后ALV-J的IFA检测结果 | 第42页 |
| 3.4 卵白接种细胞后不同亚型ALV的PCR鉴定结果 | 第42-44页 |
| 3.4.1 卵白接种CEF细胞后不同亚型ALV的PCR鉴定结果 | 第42-43页 |
| 3.4.2 卵白接种DF-1 细胞后不同亚型ALV的PCR鉴定结果 | 第43-44页 |
| 3.5 ALV分离株的克隆测序及流行亚型鉴定 | 第44-46页 |
| 3.5.1 ALV-J-gp85基因的克隆测序 | 第44页 |
| 3.5.2 ALV-J-gp85基因的同源性比较 | 第44页 |
| 3.5.3 ALV-J-gp85基因的进化树分析 | 第44-45页 |
| 3.5.4 亚型鉴定 | 第45页 |
| 3.5.5 ALV-J-545 基因的克隆测序 | 第45页 |
| 3.5.6 ALV-J-545 基因的同源性比较 | 第45页 |
| 3.5.7 ALV-J-545 基因的进化树分析 | 第45-46页 |
| 3.6 卵白中RNA的提取及不同亚型ALV的PCR检测结果 | 第46页 |
| 4 讨论 | 第46-49页 |
| 5 结论 | 第49-50页 |
| 6 创新点 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 攻读硕士期间发表论文及参加实践活动 | 第58页 |
