| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9页 |
| 1 文献 | 第10-20页 |
| 1.1 我国土壤镉污染现状及危害 | 第10-12页 |
| 1.1.1 我国土壤镉污染现状 | 第10-11页 |
| 1.1.2 镉对植物的毒害效应 | 第11页 |
| 1.1.3 镉对人体的健康危害 | 第11-12页 |
| 1.2 富集植物对土壤镉污染修复作用及机理 | 第12-14页 |
| 1.3 Cd超富集植物筛选研究进展 | 第14-16页 |
| 1.4 植物谷胱甘肽 | 第16页 |
| 1.5 植物谷胱甘肽的代谢与环境胁迫 | 第16-19页 |
| 1.5.1 谷胱甘肽代谢镉抗性/耐性相关酶基因的克隆 | 第17-18页 |
| 1.5.2 OAS-TL基因和γ-GCS基因的研究现状 | 第18-19页 |
| 1.6 研究意义和内容 | 第19-20页 |
| 1.6.1 研究的意义 | 第19-20页 |
| 1.6.2 研究的内容 | 第20页 |
| 2. 野生蔬菜Cd累积特性与GSH含量的分析 | 第20-28页 |
| 2.1 试验材料 | 第21-22页 |
| 2.2 试验方法 | 第22-23页 |
| 2.2.1 Cd胁迫培养 | 第22页 |
| 2.2.2 植物体地上和地下部分重金属镉含量的测定 | 第22页 |
| 2.2.3 植物还原性谷胱甘肽(GSH)含量的测定 | 第22-23页 |
| 2.3 结果与分析 | 第23-26页 |
| 2.3.1 镉污染土壤上不同野菜地上、地下部分镉含量 | 第23-24页 |
| 2.3.2 镉污染土壤上不同野菜体内还原性谷胱甘肽的含量 | 第24-26页 |
| 2.4 小结和讨论 | 第26-28页 |
| 2.4.1 小结 | 第26页 |
| 2.4.2 讨论 | 第26-28页 |
| 3. O-乙酰基丝氨酸(硫醇)酶、γ-谷氨酰半胱氨酸连接酶基因的克隆 | 第28-53页 |
| 3.1 材料 | 第28-29页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第28页 |
| 3.1.2 供试菌种和质粒 | 第28页 |
| 3.1.3 试剂 | 第28-29页 |
| 3.2 试验方法 | 第29-38页 |
| 3.2.1 供试材料的培养及Cd胁迫培养 | 第29页 |
| 3.2.2 羽衣甘蓝总RNA提取 | 第29-30页 |
| 3.2.2.1 准备工作 | 第29页 |
| 3.2.2.2 总RNA提取方法 | 第29-30页 |
| 3.2.2.3 RNA质量的检测 | 第30页 |
| 3.2.3 第一链cDNA的合成 | 第30-31页 |
| 3.2.4 OAS-TL家族基因和γ-GCS cDNA片段的PCR扩增 | 第31-34页 |
| 3.2.5 OAS-TL4、OAS-TL6和γ-GCS三个基因的RACE扩增 | 第34-38页 |
| 3.3 结果与分析 | 第38-51页 |
| 3.3.1 RNA电泳图及质量分析 | 第38-39页 |
| 3.3.2 目标基因保守序列的获得 | 第39-40页 |
| 3.3.3 目标基因基因3’端序列和5’端序列的获得 | 第40-42页 |
| 3.3.4 目标基因部分拼和序列分析 | 第42-44页 |
| 3.3.5 目标基因序列氨基酸序列分析 | 第44-48页 |
| 3.3.6 目标基因蛋白疏水性分析 | 第48-49页 |
| 3.3.7 目标基因碱基序列分析 | 第49-51页 |
| 3.4 小结与讨论 | 第51-53页 |
| 3.4.1 小结 | 第51页 |
| 3.4.2 讨论 | 第51-53页 |
| 4. 荧光定量PCR监测镉胁迫下OAS-TL6基因转录变化 | 第53-57页 |
| 4.1 试验材料和方法 | 第53-54页 |
| 4.1.1 试验材料 | 第53页 |
| 4.1.2 材料处理 | 第53页 |
| 4.1.3 引物准备 | 第53-54页 |
| 4.2 试验方法 | 第54-55页 |
| 4.2.1 总RNA的提取及反转录 | 第54页 |
| 4.2.2 Real Time PCR扩增 | 第54-55页 |
| 4.3 结果分析 | 第55-56页 |
| 4.4 小结与讨论 | 第56-57页 |
| 5. 总结与展望 | 第57-59页 |
| 5.1 总结 | 第57-58页 |
| 5.2 展望 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
