| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-32页 |
| 1 土壤中硼营养概述 | 第13-14页 |
| 2 植物的硼营养概述 | 第14-22页 |
| 2.1 硼在植物中的分布与含量 | 第14页 |
| 2.2 硼对植物生长的影响 | 第14-16页 |
| 2.3 缺硼胁迫下植物的生理响应 | 第16-20页 |
| 2.4 柑橘缺硼研究进展 | 第20-21页 |
| 2.5 植物耐缺硼的分子机理 | 第21-22页 |
| 3 植物中的miRNA研究进展 | 第22-28页 |
| 3.1 植物miRNA的形成和作用机制 | 第23-24页 |
| 3.2 植物miRNA功能 | 第24-27页 |
| 3.3 植物miRNA的研究方法 | 第27-28页 |
| 4 cDNA-AFLP技术应用研究进展 | 第28-30页 |
| 5 立题意义 | 第30页 |
| 6 研究内容及技术路线 | 第30-32页 |
| 6.1 研究内容 | 第30-31页 |
| 6.2 技术路线 | 第31-32页 |
| 第二章 缺硼对雪柑实生苗主要生理生化代谢的影响 | 第32-48页 |
| 1 材料与方法 | 第33-35页 |
| 1.1 试验材料培养与硼处理 | 第33页 |
| 1.2 生物量的测定 | 第33页 |
| 1.3 根系、叶片硼含量的测定 | 第33-34页 |
| 1.4 叶片光合作用和根系、叶片呼吸速率的测定 | 第34页 |
| 1.5 根系和叶片有机酸含量测定方法 | 第34页 |
| 1.6 有机酸相关代谢酶活性测定 | 第34页 |
| 1.7 总酚、可溶性总蛋白和总游离氨基酸的测定 | 第34页 |
| 1.8 根系和叶片中氨基酸代谢关键酶的测定 | 第34-35页 |
| 1.9 试验设计和统计分析 | 第35页 |
| 2 结果与分析 | 第35-45页 |
| 2.1 生物量和根叶硼含量 | 第35-36页 |
| 2.2 叶片和根系气体交换 | 第36页 |
| 2.3 根叶中主要代谢产物的含量和关键酶的活性 | 第36-45页 |
| 3 讨论 | 第45-47页 |
| 3.1 非结构性碳水化合物在缺硼叶片中增加,在缺硼根系中减少 | 第45页 |
| 3.2 缺硼导致雪柑叶片呼吸、有机酸代谢和回补途径上调,而在根系中下调 | 第45-46页 |
| 3.3 缺硼下,根系氨基酸合成下调,叶片氨基酸合成则上调 | 第46页 |
| 3.4 缺硼增加根系和叶片酚类物质累积 | 第46-47页 |
| 4 小结 | 第47-48页 |
| 第三章 缺硼胁迫下雪柑根叶cDNA-AFLP分析 | 第48-76页 |
| 1 材料与方法 | 第48-52页 |
| 1.1 试验材料培养与硼处理 | 第48-49页 |
| 1.2 植株生物量、根系和叶片硼含量的测定 | 第49页 |
| 1.3 RNA的提取与检测 | 第49页 |
| 1.4 cDNA的合成 | 第49页 |
| 1.5 cDNA的酶切及连接 | 第49页 |
| 1.6 预扩增及选择性扩增 | 第49-50页 |
| 1.7 聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第50页 |
| 1.8 差异片段的回收、测序及比对 | 第50-51页 |
| 1.9 差异片段的荧光定量PCR验证 | 第51页 |
| 1.10 试验设计和统计分析 | 第51-52页 |
| 2 结果与分析 | 第52-63页 |
| 2.1 缺硼对雪柑营养生长、根叶中B含量影响 | 第52-53页 |
| 2.2 缺硼雪柑根叶基因表达差异 | 第53-54页 |
| 2.3 根系和叶片中差异表达基因功能分析 | 第54-62页 |
| 2.4 cDNA-AFLP荧光定量验证 | 第62-63页 |
| 3 讨论 | 第63-72页 |
| 3.1 缺硼相关基因在柑橘根系、叶片中的差异 | 第63页 |
| 3.2 参与碳水化合物和能量代谢的基因 | 第63-64页 |
| 3.3 参与核酸代谢的基因 | 第64-66页 |
| 3.4 参与蛋白和氨基酸代谢的基因 | 第66-68页 |
| 3.5 参与细胞运输的基因 | 第68-69页 |
| 3.6 参与信号转导的基因 | 第69-70页 |
| 3.7 参与胁迫响应和防御的基因 | 第70-71页 |
| 3.8 参与脂质代谢的基因 | 第71页 |
| 3.9 参与细胞壁修饰的基因 | 第71-72页 |
| 3.10 参与其它代谢的基因 | 第72页 |
| 4 小结 | 第72-76页 |
| 第四章 雪柑根系缺硼响应microRNAs分离及鉴定 | 第76-95页 |
| 1 材料与方法 | 第76-83页 |
| 1.1 试验材料培养与硼处理 | 第76页 |
| 1.2 生物量及根系和叶片硼含量的测定 | 第76页 |
| 1.3 根系类黄酮、花青素、脯氨酸、脯氨酸脱氢酶和谷氨酸脱氢酶测定 | 第76-77页 |
| 1.4 sRNAs的富集、文库的构建和高通量测序 | 第77页 |
| 1.5 sRNA注释和miRNA鉴定 | 第77-78页 |
| 1.6 缺硼胁迫下miRNAs表达量差异分析 | 第78页 |
| 1.7 MiRNAs靶基因预测 | 第78-79页 |
| 1.8 差异表达miRNAs靶基因功能分析 | 第79页 |
| 1.9 荧光定量PCR | 第79-81页 |
| 1.10 试验设计及数据分析 | 第81-83页 |
| 2 结果与分析 | 第83-90页 |
| 2.1 植株生长及根叶中硼元素的测定 | 第83页 |
| 2.2 根系高通量测序及miRNAs文库分析 | 第83-84页 |
| 2.3 根系中保守miRNAs的鉴定 | 第84页 |
| 2.4 根系中新的miRNAs的预测 | 第84页 |
| 2.5 缺硼根系中差异表达miRNAs | 第84-85页 |
| 2.6 实时荧光定量PCR检测miRNA表达量 | 第85页 |
| 2.7 差异表达miRNAs靶基因的预测 | 第85-88页 |
| 2.8 实时荧光定量PCR检测靶基因的表达 | 第88页 |
| 2.9 根系代谢物及酶活性 | 第88-90页 |
| 3 讨论 | 第90-93页 |
| 4 小结 | 第93-95页 |
| 第五章 雪柑叶片缺硼响应microRNAs的分离及鉴定 | 第95-115页 |
| 1 材料与方法 | 第96-101页 |
| 1.1 试验材料培养与硼处理 | 第96页 |
| 1.2 sRNAs的富集、文库的构建和高通量测序 | 第96页 |
| 1.3 sRNA注释和miRNA鉴定 | 第96页 |
| 1.4 缺硼胁迫下miRNAs表达量差异分析 | 第96页 |
| 1.5 MiRNAs靶基因预测 | 第96页 |
| 1.6 差异表达miRNAs靶基因功能分析 | 第96页 |
| 1.7 荧光定量PCR | 第96-101页 |
| 1.8 试验设计及数据分析 | 第101页 |
| 2 结果与分析 | 第101-109页 |
| 2.1 叶片中硼及铜元素测定 | 第101页 |
| 2.2 叶片高通量测序及miRNAs文库分析 | 第101-102页 |
| 2.3 雪柑叶片中保守的和未知miRNAs鉴定 | 第102-103页 |
| 2.4 雪柑叶片中缺硼相关miRNAs鉴定 | 第103页 |
| 2.5 差异表达miRNAs靶基因的鉴定及其GO分析 | 第103-105页 |
| 2.6 实时荧光定量PCR验证miRNA表达量 | 第105页 |
| 2.7 实时荧光定量PCR验证靶基因表达量 | 第105-109页 |
| 3 讨论 | 第109-114页 |
| 4 小结 | 第114-115页 |
| 第六章 总结与展望 | 第115-118页 |
| 参考文献 | 第118-146页 |
| 附录 | 第146-271页 |
| 致谢 | 第271-272页 |
| 硕博期间发表论文情况 | 第272页 |
