| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 英文缩略词 | 第7-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-17页 |
| 1.1 溶藻弧菌研究进展 | 第11-13页 |
| 1.1.1 溶藻弧菌弧菌的生物学特性 | 第11页 |
| 1.1.2 溶藻弧菌的致病性 | 第11-13页 |
| 1.2 H_2S在生物代谢中的作用研究进展 | 第13-15页 |
| 1.2.1 内源性H_2S的生成 | 第13页 |
| 1.2.2 H_2S在动物生理代谢中的调节作用 | 第13-14页 |
| 1.2.3 H_2S在植物生理代谢中的调节作用 | 第14-15页 |
| 1.2.4 H_2S在微生物生理代谢中的调节作用 | 第15页 |
| 1.3 H_2S与NO | 第15-16页 |
| 1.4 本研究技术路线 | 第16页 |
| 1.5 研究目的及意义 | 第16-17页 |
| 2 溶藻弧菌抗氧化相关基因、胱硫醚-β-合成酶基因cbs的克隆、cbs生物学信息分析及其原核表达 | 第17-33页 |
| 2.1 材料与方法 | 第18-20页 |
| 2.1.1 材料 | 第18页 |
| 2.1.2 方法 | 第18-20页 |
| 2.2 结果与分析 | 第20-30页 |
| 2.2.1 溶藻弧菌抗氧化相关基因、胱硫醚-β-合成酶基因cbs的克隆 | 第20-25页 |
| 2.2.2 CBS蛋白的生物信息学分析 | 第25-29页 |
| 2.2.3 溶藻弧菌cbs基因的原核表达 | 第29-30页 |
| 2.3 讨论 | 第30-33页 |
| 2.3.1 溶藻弧菌抗氧化相关基因、胱硫醚-β-合成酶基因cbs的克隆 | 第30-31页 |
| 2.3.2 溶藻弧菌cbs基因的原核表达 | 第31-33页 |
| 3 溶藻弧菌胱硫醚-β-合成酶活力与其抗氧化系统的关系 | 第33-41页 |
| 3.1 材料与方法 | 第34-35页 |
| 3.1.1 材料 | 第34页 |
| 3.1.2 方法 | 第34-35页 |
| 3.2 结果 | 第35-38页 |
| 3.2.1 外源H_2S供体NaSH对溶藻弧菌抗氧化系统的影响 | 第35-36页 |
| 3.2.2 抗生素胁迫及添加外源H_2S后对溶藻弧菌CBS活力及其抗氧化系统的影响 | 第36页 |
| 3.2.3 pH条件对溶藻弧菌CBS活力及其抗氧化系统的影响 | 第36-37页 |
| 3.2.4 温度条件对溶藻弧菌CBS活力及其抗氧化系统的影响 | 第37页 |
| 3.2.5 盐度条件对溶藻弧菌CBS活力及其抗氧化系统的影响 | 第37页 |
| 3.2.6 CBS活力与SOD、POD活力及GSH含量之间的相关性分析 | 第37-38页 |
| 3.3 讨论 | 第38-40页 |
| 3.3.1 外源H_2S对溶藻弧菌抗氧化系统的影响 | 第38页 |
| 3.3.2 抗生素胁迫及添加外源H_2S后对溶藻弧菌CBS活力及其抗氧化系统的影响 | 第38-39页 |
| 3.3.3 不同pH条件对溶藻弧菌CBS活力及其抗氧化系统的影响 | 第39页 |
| 3.3.4 不同温度条件对溶藻弧菌CBS活力及其抗氧化系统的影响 | 第39页 |
| 3.3.5 不同盐度条件对溶藻弧菌CBS活力及其抗氧化系统的影响 | 第39-40页 |
| 3.3.6 CBS活力与SOD、POD活力及GSH含量之间的相关性分析 | 第40页 |
| 3.4 小结 | 第40-41页 |
| 4 不同外源添加物下溶藻弧菌相关指标的变化 | 第41-50页 |
| 4.1 实验材料 | 第41-42页 |
| 4.1.1 菌株 | 第41页 |
| 4.1.2 主要药品、试剂盒和设备 | 第41-42页 |
| 4.2 实验方法 | 第42-44页 |
| 4.2.1 NaSH、SNP、AOAA、HT、L-NAME和PTIO母液的配制 | 第42页 |
| 4.2.2 抗氧化相关基因的荧光定量引物 | 第42页 |
| 4.2.3 溶藻弧菌的前处理 | 第42-43页 |
| 4.2.4 经NaSH和SNP处理后溶藻弧菌抗氧化相关基因的RT-PCR分析 | 第43-44页 |
| 4.2.5 经AOAA、HT、L-NAME、PTIO处理后溶藻弧菌CBS和NOS活力、H_2S和NO含量的检测 | 第44页 |
| 4.3 实验结果 | 第44-48页 |
| 4.3.1 不同浓度的NaSH下，溶藻弧菌抗氧化相关基因的表达差异 | 第44-45页 |
| 4.3.2 不同浓度的AOAA预处理后，溶藻弧菌的CBS和NOS活力的变化 | 第45-46页 |
| 4.3.3 不同浓度的HT预处理后，溶藻弧菌的H_2S和NO含量的变化 | 第46页 |
| 4.3.4 不同浓度的SNP下，溶藻弧菌抗氧化相关基因表达差异 | 第46-47页 |
| 4.3.5 不同浓度的L-NAME预处理后，溶藻弧菌的NOS和CBS活力的变化 | 第47页 |
| 4.3.6 不同浓度的PTIO预处理后，溶藻弧菌的NO和H_2S含量的变化 | 第47-48页 |
| 4.4 讨论 | 第48-50页 |
| 5 溶藻弧菌在诺氟沙星胁迫下H_2S与NO的相互作用 | 第50-56页 |
| 5.1 实验材料 | 第50页 |
| 5.1.1 菌株 | 第50页 |
| 5.1.2 主要药品和试剂盒 | 第50页 |
| 5.2 实验方法 | 第50-51页 |
| 5.2.1 诺氟沙星母液的的配制 | 第50页 |
| 5.2.2 NaSH、SNP、AOAA、HT、L-NAME和PTIO母液的配制 | 第50页 |
| 5.2.3 溶藻弧菌对诺氟沙星的MIC测定 | 第50页 |
| 5.2.4 空白组、对照组和实验组的设置 | 第50-51页 |
| 5.2.5 CBS和NOS活力、H_2S、NO和H_2O_2含量测定 | 第51页 |
| 5.2.6 各处理组的抗氧化基因差异表达 | 第51页 |
| 5.2.7 数据分析 | 第51页 |
| 5.3 实验结果 | 第51-54页 |
| 5.3.1 溶藻弧菌对诺氟沙星的MIC测定结果 | 第51页 |
| 5.3.2 各外源添加物处理后对溶藻弧菌的CBS活力的影响 | 第51-52页 |
| 5.3.3 不同浓度的HT预处理后，溶藻弧菌的H_2S和NO含量的变化 | 第52页 |
| 5.3.4 各外源添加物处理后对溶藻弧菌的H_2S含量的影响 | 第52页 |
| 5.3.5 各外源添加物处理后对溶藻弧菌的NO含量的影响 | 第52-53页 |
| 5.3.6 各外源添加物处理后对溶藻弧菌的H_2O_2含量的影响 | 第53页 |
| 5.3.7 各外源添加物处理后对溶藻弧菌的抗氧化系统基因表达量的影响 | 第53-54页 |
| 5.4 讨论 | 第54-56页 |
| 6 总结 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 作者简介 | 第69-70页 |
| 导师简介 | 第70页 |
