| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 第1章 文献综述 | 第12-20页 |
| 1.1 鸭甲型肝炎病毒概述 | 第12页 |
| 1.2 鸭甲型肝炎病毒的诊断 | 第12-15页 |
| 1.2.1 病毒的分离 | 第13页 |
| 1.2.2 血清学诊断 | 第13-14页 |
| 1.2.3 分子生物学诊断技术 | 第14-15页 |
| 1.2.4 其他诊断方法 | 第15页 |
| 1.3 DHAV的预防 | 第15-17页 |
| 1.3.1 被动免疫 | 第15-17页 |
| 1.3.2 主动免疫 | 第17页 |
| 1.4 DHAV的治疗 | 第17-20页 |
| 第2章 引言 | 第20-22页 |
| 第3章 多重RT-PCR检测DHAV血清1、3型病毒 | 第22-30页 |
| 3.1 材料 | 第22页 |
| 3.1.1 菌种与毒种 | 第22页 |
| 3.1.2 病料 | 第22页 |
| 3.1.3 试验动物 | 第22页 |
| 3.1.4 试剂 | 第22页 |
| 3.1.5 主要设备 | 第22页 |
| 3.2 方法 | 第22-25页 |
| 3.2.1 引物的设计与合成 | 第22-23页 |
| 3.2.2 病料的处理及病毒RNA的提取 | 第23页 |
| 3.2.3 引物的特异性试验 | 第23-24页 |
| 3.2.4 多重RT-PCR条件优化 | 第24页 |
| 3.2.5 多重RT-PCR特异性的检测 | 第24页 |
| 3.2.6 多重RT-PCR敏感性的检测 | 第24-25页 |
| 3.2.7 多重RT-PCR重复性的检测 | 第25页 |
| 3.2.8 人工感染及自然病例的检测 | 第25页 |
| 3.3 结果 | 第25-28页 |
| 3.3.1 引物的特异性检测 | 第25-26页 |
| 3.3.2 多重RT-PCR的建立 | 第26-27页 |
| 3.3.3 多重RT-PCR的特异性 | 第27页 |
| 3.3.4 多重RT-PCR的敏感性 | 第27-28页 |
| 3.3.5 多重RT-PCR的重复性 | 第28页 |
| 3.3.6 人工感染及自然病例的检测 | 第28页 |
| 3.4 讨论 | 第28-30页 |
| 第4章 荧光定量RT-PCR检测DHAV | 第30-40页 |
| 4.1 材料 | 第30页 |
| 4.1.1 毒种与菌种 | 第30页 |
| 4.1.2 病料与试验动物 | 第30页 |
| 4.1.3 试剂 | 第30页 |
| 4.1.4 主要设备 | 第30页 |
| 4.2 方法 | 第30-35页 |
| 4.2.1 基因克隆与分析 | 第30-34页 |
| 4.2.2 重组质粒浓度测定 | 第34页 |
| 4.2.3 荧光定量RT-PCR条件优化 | 第34-35页 |
| 4.2.4 荧光定量RT-PCR标准曲线的建立 | 第35页 |
| 4.2.5 荧光定量RT-PCR反应的特异性试验 | 第35页 |
| 4.2.6 荧光定量RT-PCR反应的敏感性试验 | 第35页 |
| 4.2.7 荧光定量RT-PCR反应的重复性试验 | 第35页 |
| 4.2.8 人工感染与自然病例的检测 | 第35页 |
| 4.3 结果 | 第35-39页 |
| 4.3.1 重组质粒鉴定 | 第35-36页 |
| 4.3.2 重组质粒核苷酸序列分析 | 第36页 |
| 4.3.3 标准品质粒浓度 | 第36页 |
| 4.3.4 荧光定量RT-PCR体系与条件 | 第36-37页 |
| 4.3.5 标准曲线 | 第37页 |
| 4.3.6 定量RT-PCR特异性检测 | 第37-38页 |
| 4.3.7 定量RT-PCR敏感性检测 | 第38页 |
| 4.3.8 定量RT-PCR重复性检测 | 第38页 |
| 4.3.9 人工感染及自然病例的检测 | 第38-39页 |
| 4.4 讨论 | 第39-40页 |
| 第5章 DHAV在不同抗体水平雏鸭体内的复制规律 | 第40-50页 |
| 5.1 材料 | 第40-41页 |
| 5.1.1 毒种与菌种 | 第40页 |
| 5.1.2 试验动物 | 第40页 |
| 5.1.3 试剂 | 第40页 |
| 5.1.4 主要设备 | 第40-41页 |
| 5.2 方法 | 第41-42页 |
| 5.2.1 动物及饲养 | 第41页 |
| 5.2.2 动物分组 | 第41页 |
| 5.2.3 不同抗体水平雏鸭模型构建 | 第41页 |
| 5.2.4 人工接种DHAV | 第41页 |
| 5.2.5 检测样品的采集 | 第41页 |
| 5.2.6 肝脏组织中DHAV载量测定 | 第41-42页 |
| 5.2.7 组织病理学观察 | 第42页 |
| 5.2.8 免疫荧光 | 第42页 |
| 5.2.9 血清中谷丙转氨酶（ALT）活性检测 | 第42页 |
| 5.3 结果 | 第42-48页 |
| 5.3.1 抗体对人工感染DHAV-1雏鸭的保护性 | 第42-44页 |
| 5.3.2 不同水平抗体对肝脏中DHAV-1复制的影响 | 第44-45页 |
| 5.3.3 肝脏病理变化 | 第45-47页 |
| 5.3.4 免疫荧光检测DHAV | 第47页 |
| 5.3.5 血清ALT检测 | 第47-48页 |
| 5.4 讨论 | 第48-50页 |
| 第6章 雏鸭感染DHAV不同阶段的抗体疗效评价 | 第50-60页 |
| 6.1 材料 | 第50页 |
| 6.2 方法 | 第50-51页 |
| 6.2.1 动物及饲养 | 第50页 |
| 6.2.2 动物分组 | 第50页 |
| 6.2.3 雏鸭感染DHAV模型的建立 | 第50页 |
| 6.2.4 动物的治疗 | 第50页 |
| 6.2.5 检测样品的采集 | 第50页 |
| 6.2.6 肝脏组织中DHAV载量测定 | 第50页 |
| 6.2.7 组织病理学观察 | 第50-51页 |
| 6.2.8 免疫荧光 | 第51页 |
| 6.2.9 血清中谷丙转氨酶（ALT）活性检测 | 第51页 |
| 6.3 结果 | 第51-56页 |
| 6.3.1 抗体对人工感染DHAV-1雏鸭的保护性 | 第51-52页 |
| 6.3.2 抗体对肝脏中DHAV-1复制的影响 | 第52-54页 |
| 6.3.3 肝脏病理变化 | 第54页 |
| 6.3.4 免疫荧光检测DHAV | 第54-55页 |
| 6.3.5 血清ALT检测 | 第55-56页 |
| 6.4 讨论 | 第56-60页 |
| 第7章 结论 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-67页 |
| 附录Ⅰ：英文缩略词表 | 第67-68页 |
| 附录Ⅱ：主要溶液及试剂的配制 | 第68-70页 |
| 致谢 | 第70-72页 |
| 攻读硕士期间论文发表情况 | 第72页 |
