| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-22页 |
| 1.1 桑椹菌核病 | 第12-16页 |
| 1.1.1 桑椹菌核病的种类及其病原菌 | 第12-13页 |
| 1.1.2 桑椹菌核病的发病规律 | 第13-14页 |
| 1.1.3 桑椹菌核病的防治 | 第14-16页 |
| 1.2 黑色素 | 第16-20页 |
| 1.2.1 真菌中黑色素的作用 | 第17-18页 |
| 1.2.2 黑色素与植物病原真菌的致病性 | 第18-19页 |
| 1.2.3 黑色素的合成途径 | 第19-20页 |
| 1.3 基因敲除技术 | 第20-22页 |
| 1.3.1 基因敲除技术机理 | 第20页 |
| 1.3.2 基因敲除技术在丝状真菌中的研究进展及应用 | 第20-22页 |
| 第二章 引言 | 第22-26页 |
| 2.1 研究背景及意义 | 第22-23页 |
| 2.2 研究主要内容 | 第23-24页 |
| 2.3 技术路线 | 第24-26页 |
| 第三章 ShSCD基因的克隆与分析 | 第26-38页 |
| 3.1 实验材料和试剂 | 第26-29页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第26页 |
| 3.1.2 实验试剂和溶液配制方法 | 第26-27页 |
| 3.1.3 主要溶液配制方法 | 第27-28页 |
| 3.1.4 实验仪器 | 第28-29页 |
| 3.2 实验方法 | 第29-34页 |
| 3.2.1 真菌基因组的提取 | 第29页 |
| 3.2.2 RNA提取 | 第29-30页 |
| 3.2.3 第一条链cDNA的合成与检测 | 第30页 |
| 3.2.4 ShSCD基因的扩增 | 第30-33页 |
| 3.2.5 ShSCD信息分析 | 第33-34页 |
| 3.3 结果和分析 | 第34-37页 |
| 3.3.1 ShSCD的克隆 | 第34页 |
| 3.3.2 ShSCD的信息分析 | 第34-36页 |
| 3.3.3 ShSCD的理化性质、二级结构和三级结构 | 第36-37页 |
| 3.4 小结与讨论 | 第37-38页 |
| 第四章 ShSCD敲除载体的构建和敲除突变体的获得 | 第38-60页 |
| 4.1 实验材料和试剂 | 第38-40页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第38页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第38页 |
| 4.1.3 溶液配制方法 | 第38-40页 |
| 4.1.4 主要仪器 | 第40页 |
| 4.2 实验方法 | 第40-51页 |
| 4.2.1 基因组的提取 | 第40页 |
| 4.2.2 RNA的提取 | 第40页 |
| 4.2.3 同源序列的扩增及验证 | 第40-44页 |
| 4.2.4 敲除载体的构建及检测 | 第44-45页 |
| 4.2.5 ΔShSCD突变体的获得 | 第45-46页 |
| 4.2.6 ΔShSCD突变体的鉴定 | 第46-51页 |
| 4.3 结果和分析 | 第51-57页 |
| 4.3.1 ShSCD 3’端和 5’端同源序列的扩增 | 第51-52页 |
| 4.3.2 敲除载体的构建和酶切验证 | 第52-53页 |
| 4.3.3 ΔShSCD突变体的获得 | 第53页 |
| 4.3.4 ΔShSCD突变体的鉴定 | 第53-57页 |
| 4.4 小结与讨论 | 第57-60页 |
| 第五章 ShSCD基因的功能分析 | 第60-68页 |
| 5.1 实验材料和试剂 | 第60页 |
| 5.1.1 实验材料 | 第60页 |
| 5.1.2 试剂 | 第60页 |
| 5.1.3 主要溶液配制 | 第60页 |
| 5.2 实验方法 | 第60-61页 |
| 5.2.1 突变体的菌落形态观察 | 第60-61页 |
| 5.2.2 突变体的生长速率测定 | 第61页 |
| 5.2.3 突变体黑色素含量的测定 | 第61页 |
| 5.2.4 突变体的渗透调节能力测定 | 第61页 |
| 5.2.5 突变体的抗氧胁迫能力测定 | 第61页 |
| 5.3 结果与分析 | 第61-65页 |
| 5.3.1 突变体菌落形态观察 | 第61-62页 |
| 5.3.2 突变体生长速率测定 | 第62页 |
| 5.3.3 突变体黑色素含量的测定 | 第62-63页 |
| 5.3.4 突变体的渗透调节能力分析 | 第63-65页 |
| 5.3.5 突变体的抗氧化能力分析 | 第65页 |
| 5.4 小结与讨论 | 第65-68页 |
| 第六章 综合与讨论 | 第68-70页 |
| 参考文献 | 第70-76页 |
| 在读期间发表论文及参研课题 | 第76-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
