摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
第1章 文献综述 | 第12-24页 |
1.1 β-葡萄糖苷酶概述 | 第12页 |
1.2 β-葡萄糖苷酶的分布 | 第12-13页 |
1.2.1 植物中的β-葡萄糖苷酶 | 第12-13页 |
1.2.2 动物和人体中的β-葡萄糖苷酶 | 第13页 |
1.2.3 微生物中的β-葡萄糖苷酶 | 第13页 |
1.3 β-葡萄糖苷酶的分子结构、底物特异性及催化机制 | 第13-17页 |
1.3.1 β-葡萄糖苷酶的分子结构 | 第13-15页 |
1.3.2 β-葡萄糖苷酶的底物特异性 | 第15页 |
1.3.3 β-葡萄糖苷酶的催化机制 | 第15-17页 |
1.4 芦荟及来源于芦荟叶皮的β-葡萄糖苷酶 | 第17页 |
1.5 β-葡萄糖苷酶的分离纯化 | 第17-19页 |
1.5.1 酶分离纯化的常规方法介绍 | 第17-18页 |
1.5.2 不同来源的β-葡萄糖苷酶的分离纯化 | 第18-19页 |
1.6 β-葡萄糖苷酶的理化性质和功能基团的研究 | 第19-20页 |
1.6.1 β-葡萄糖苷酶的理化性质 | 第19页 |
1.6.2 β-葡萄糖苷酶的功能基团研究 | 第19-20页 |
1.7 β-葡萄糖苷酶基因工程的研究 | 第20-21页 |
1.8 β-葡萄糖苷酶的应用和发展 | 第21-24页 |
1.8.1 β-葡萄糖苷酶在食品香料上的应用 | 第21页 |
1.8.2 β-葡萄糖苷酶在生物能源上的应用 | 第21-22页 |
1.8.3 β-葡萄糖苷酶在医学上的应用 | 第22-24页 |
第2章 引言 | 第24-26页 |
2.1 本文立题背景与意义 | 第24页 |
2.2 本文主要研究内容 | 第24-25页 |
2.2.1 芦荟叶皮β-葡萄糖苷酶的分离纯化 | 第24-25页 |
2.2.2 芦荟叶皮β-葡萄糖苷酶的酶学性质研究 | 第25页 |
2.2.3 芦荟叶皮β-葡萄糖苷酶功能基团的研究 | 第25页 |
2.3 本文分离纯化的技术路线 | 第25-26页 |
第3章 芦荟叶皮β-葡萄糖苷酶的分离纯化与酶学性质研究 | 第26-44页 |
3.1 材料与试剂 | 第26-28页 |
3.1.1 材料来源 | 第26页 |
3.1.2 主要试剂 | 第26页 |
3.1.3 主要仪器 | 第26-27页 |
3.1.4 主要溶液配制 | 第27-28页 |
3.2 主要实验方法 | 第28-33页 |
3.2.1 芦荟叶皮β-葡萄糖苷酶的酶活力测定 | 第28-29页 |
3.2.2 β-葡萄糖苷酶的总酶活计算公式 | 第29页 |
3.2.3 蛋白质含量的测定方法 | 第29-30页 |
3.2.4 芦荟叶皮β-葡萄糖苷酶粗酶液的提取 | 第30页 |
3.2.5 硫酸铵分级沉淀 | 第30页 |
3.2.6 DEAE-Sepharose fast flow层析 | 第30页 |
3.2.7 Superdex-200 prep grade层析 | 第30-31页 |
3.2.8 芦荟叶皮β-葡萄糖苷酶的纯度鉴定 | 第31页 |
3.2.9 芦荟叶皮β-葡萄糖苷酶的亚基分子质量 | 第31-32页 |
3.2.10 芦荟叶皮β-葡萄糖苷酶的全酶分子质量 | 第32页 |
3.2.11 芦荟叶皮β-葡萄糖苷酶的酶学性质 | 第32-33页 |
3.3 结果与分析 | 第33-44页 |
3.3.1 对硝基苯酚标准曲线 | 第33-34页 |
3.3.2 硫酸铵分级沉淀 | 第34页 |
3.3.3 DEAE-Sepharose fast flow层析 | 第34-35页 |
3.3.4 Superdex-200 prep grade层析 | 第35页 |
3.3.5 芦荟叶皮β-葡萄糖苷酶的纯度鉴定和亚基分子质量 | 第35-36页 |
3.3.6 芦荟叶皮β-葡萄糖苷酶全酶分子质量测定 | 第36-37页 |
3.3.7 芦荟叶皮β-葡萄糖苷酶的酶学性质 | 第37-44页 |
第4章 芦荟叶皮β-葡萄糖苷酶功能基团的研究 | 第44-52页 |
4.1 材料与试剂 | 第44-45页 |
4.1.1 材料来源 | 第44页 |
4.1.2 主要试剂 | 第44页 |
4.1.3 主要仪器 | 第44-45页 |
4.1.4 主要溶液配制 | 第45页 |
4.2 主要实验方法 | 第45-46页 |
4.3 结果与分析 | 第46-52页 |
4.3.1 乙酰丙酮(BD)对精氨酸残基的化学修饰 | 第46页 |
4.3.2 琥珀酸酐(SUAN)对赖氨酸氨基的化学修饰 | 第46-47页 |
4.3.3 溴乙酸(BrAc)和碘乙酸(IAc)对组氨酸咪唑基的化学修饰 | 第47-48页 |
4.3.4 氯胺-T对甲硫氨酸巯醚基的化学修饰 | 第48-49页 |
4.3.5 N-溴代琥珀酰亚胺(NBS)对色氨酸吲哚基的化学修饰 | 第49页 |
4.3.6 N-乙酰咪唑(NAI)对酪氨酸酚羟基的化学修饰 | 第49-50页 |
4.3.7 对氯汞苯甲酸(pCMB)对半胱氨酸巯基的化学修饰 | 第50-51页 |
4.3.8 二巯基苏糖醇(DTT)对二硫键的化学修饰 | 第51-52页 |
第5章 讨论与分析 | 第52-58页 |
5.1 芦荟叶皮β-葡萄糖苷酶的分离纯化 | 第52-53页 |
5.2 芦荟叶皮β-葡萄糖苷酶的酶学性质研究 | 第53-55页 |
5.2.1 pH、温度、动力学参数对芦荟叶皮β-葡萄糖苷酶的影响 | 第53-54页 |
5.2.2 有机溶剂、化合物、金属离子对芦荟叶皮β-葡萄糖苷酶的影响 | 第54-55页 |
5.3 芦荟叶皮β-葡萄糖苷酶的功能基团研究 | 第55-58页 |
第6章 结论与展望 | 第58-60页 |
6.1 结论 | 第58页 |
6.1.1 芦荟叶皮β-葡萄糖苷酶的分离纯化 | 第58页 |
6.1.2 芦荟叶皮β-葡萄糖苷酶的酶学性质研究 | 第58页 |
6.1.3 芦荟叶皮β-葡萄糖苷酶的功能基团研究 | 第58页 |
6.2 展望 | 第58-60页 |
参考文献 | 第60-68页 |
致谢 | 第68-70页 |
在校期间发表的论文 | 第70页 |