| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 引言 | 第10-18页 |
| 1.1 磷酸肌醇3激酶信号通路 | 第10-11页 |
| 1.1.1 PI3K简介 | 第10页 |
| 1.1.2 p55PIK的功能 | 第10-11页 |
| 1.2 AFP基因 | 第11-14页 |
| 1.2.1 AFP的功能 | 第11-12页 |
| 1.2.2 AFP的基因调控 | 第12页 |
| 1.2.3 AFP基因启动子的结构及功能 | 第12-13页 |
| 1.2.4 AFP基因增强子的结构及功能 | 第13页 |
| 1.2.5 AFP基因沉默子的结构及功能 | 第13-14页 |
| 1.3 AFP上游调控因子 | 第14-16页 |
| 1.3.1 NF-kB结构 | 第14-15页 |
| 1.3.2 NF-kB功能 | 第15-16页 |
| 1.4 本研究的目的及意义 | 第16-18页 |
| 第二章 材料与方法 | 第18-39页 |
| 2.1 实验材料 | 第18-23页 |
| 2.1.1 实验试剂 | 第18-20页 |
| 2.1.2 实验仪器 | 第20-21页 |
| 2.1.3 主要溶液的配制 | 第21-23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-39页 |
| 2.2.1 生物信息学方法分析和筛选 | 第23-26页 |
| 2.2.2 AFP基因启动子核心序列顺式作用元件特征分析 | 第26页 |
| 2.2.3 DNA琼脂糖凝胶回收 | 第26-27页 |
| 2.2.4 质粒DNA的转化 | 第27页 |
| 2.2.5 重组质粒的筛选和鉴定 | 第27页 |
| 2.2.6 不同长度的AFP基因启动子报告基因载体构建 | 第27-29页 |
| 2.2.7 点突变技术 | 第29-31页 |
| 2.2.8 细胞相对荧光素酶活性检测 | 第31-32页 |
| 2.2.9 lipo2000法转染质粒DNA(以12孔板为例) | 第32页 |
| 2.2.10 细胞培养人肝癌细胞系 | 第32-33页 |
| 2.2.11 细胞转染、分组及加药 | 第33-34页 |
| 2.2.12 细胞基因组提取 | 第34页 |
| 2.2.13 Real time PCR | 第34-36页 |
| 2.2.14 细胞总蛋白提取 | 第36页 |
| 2.2.15 蛋白质浓度检测（Bradford法） | 第36-37页 |
| 2.2.16 Western blot | 第37-38页 |
| 2.2.17 统计学方法 | 第38-39页 |
| 第三章 实验结果 | 第39-53页 |
| 3.1 P55PIK调节AFP表达 | 第39-42页 |
| 3.1.1 载体构建 | 第39-40页 |
| 3.1.2 p55PIK对AFP的调节作用 | 第40-42页 |
| 3.2 P55PIK通过其独特N端24氨基酸残基（N24）调节AFP表达 | 第42-43页 |
| 3.3 PDTC阻断AFP表达 | 第43-44页 |
| 3.4 P15抑制NF-KB活性 | 第44-45页 |
| 3.5 P55PIK通过NF-ΚB调节AFP表达 | 第45-46页 |
| 3.6 AFP基因启动子中NF-ΚB主要调节区域鉴定 | 第46-48页 |
| 3.6.1 不同长度AFP基因启动子片段报告基因载体构建 | 第46-47页 |
| 3.6.2 AFP基因启动子中NF-κB主要调节区域鉴定 | 第47-48页 |
| 3.7 AFP基因启动子中NF-ΚB的结合位点预测 | 第48-49页 |
| 3.8 AFP启动子突变分析 | 第49-50页 |
| 3.9 本章小结 | 第50-53页 |
| 第四章 讨论 | 第53-55页 |
| 参考文献 | 第55-60页 |
| 致谢 | 第60页 |
