大豆抗盐蛋白PM18互作蛋白的筛选及分析
| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 第一部分 前言 | 第12-40页 |
| 1.1 固有无序蛋白简介 | 第12-18页 |
| 1.1.1 固有无序蛋白的序列和结构特点 | 第13-14页 |
| 1.1.2 固有无序蛋白的功能 | 第14-16页 |
| 1.1.3 固有无序蛋白与植物抗逆性 | 第16-18页 |
| 1.2 LEA蛋白概述 | 第18-25页 |
| 1.2.1 LEA蛋白分类 | 第19-25页 |
| 1.3 LEA蛋白在植物中的功能 | 第25-27页 |
| 1.4 LEA蛋白在植物耐盐性中的研究进展 | 第27-29页 |
| 1.5 蛋白质互作的研究进展 | 第29-38页 |
| 1.5.1 蛋白互作的生物信息学预测 | 第29-34页 |
| 1.5.2 蛋白质互作研究的实验方法 | 第34-38页 |
| 1.6 本研究的目的与意义 | 第38-40页 |
| 第二章 材料与方法 | 第40-66页 |
| 2.1 实验材料与试剂 | 第40-42页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第40页 |
| 2.1.2 菌株及载体 | 第40-41页 |
| 2.1.3 引物 | 第41-42页 |
| 2.2 实验主要试剂与设备 | 第42-47页 |
| 2.2.1 主要试剂及试剂盒 | 第42-44页 |
| 2.2.2 主要仪器设备 | 第44-45页 |
| 2.2.3 主要培养基的配制 | 第45-47页 |
| 2.3 实验方法 | 第47-66页 |
| 2.3.1 PM18蛋白的生物信息学分析 | 第47-49页 |
| 2.3.2 大豆cDNA文库的构建 | 第49-55页 |
| 2.3.3 酵母双杂交 | 第55-61页 |
| 2.3.4 阳性克隆的构建及全长基因的回转验证 | 第61-66页 |
| 第三章 结果 | 第66-96页 |
| 3.1 PM18蛋白的分析 | 第66-71页 |
| 3.1.1 PM18亚细胞定位预测 | 第66-67页 |
| 3.1.2 PM18相互作用蛋白的预测 | 第67-69页 |
| 3.1.3 PM18蛋白无序程度预测 | 第69-70页 |
| 3.1.4 PM18蛋白二级结构的预测 | 第70-71页 |
| 3.2 cDNA文库构建 | 第71-76页 |
| 3.2.1 总RNA提取 | 第71-72页 |
| 3.2.2 cDNA链的合成 | 第72-73页 |
| 3.2.3 cDNA修饰 | 第73页 |
| 3.2.4 cDNA分子克隆 | 第73-74页 |
| 3.2.5 cDNA文库评价鉴定 | 第74-76页 |
| 3.3 诱饵蛋白的构建与自激活检测 | 第76-78页 |
| 3.3.1 诱饵蛋白编码基因的克隆 | 第76页 |
| 3.3.2 PM18基因诱饵载体的构建 | 第76-77页 |
| 3.3.3 诱饵蛋白自激活检测结果 | 第77-78页 |
| 3.4 正常条件下酵母双杂交筛选结果 | 第78-79页 |
| 3.5 回转验证 | 第79-80页 |
| 3.6 测序分析 | 第80-82页 |
| 3.7 盐胁迫下酵母双杂交筛选结果 | 第82-85页 |
| 3.7.1 胁迫条件的确定 | 第82-83页 |
| 3.7.2 盐胁迫条件下酵母双杂交筛选 | 第83页 |
| 3.7.3 氯化钠对筛选的影响 | 第83-85页 |
| 3.8 阳性基因的克隆及回转验证 | 第85-96页 |
| 3.8.1 互作蛋白的基本信息及氨基酸序列信息 | 第85-88页 |
| 3.8.2 蛋白质序列特征 | 第88-90页 |
| 3.8.3 亚细胞定位预测 | 第90-91页 |
| 3.8.4 蛋白无序性的预测 | 第91-92页 |
| 3.8.5 蛋白二级结构的预测 | 第92-93页 |
| 3.8.6 六个基因的克隆 | 第93页 |
| 3.8.7 pGADT7载体的构建 | 第93-94页 |
| 3.8.8 全长基因的回转验证 | 第94-96页 |
| 第四章: 讨论 | 第96-104页 |
| 结论 | 第104-105页 |
| 附录 | 第105-128页 |
| 致谢 | 第128-129页 |
| 硕士期间研究成果 | 第129-130页 |
| 参考文献 | 第130-138页 |
