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产气荚膜梭菌的分离鉴定及PCR检测方法的建立

摘要第3-4页
Abstract第4页
缩略语表第8-9页
1 引言第9-18页
    1.1 产气荚膜梭菌概述第9页
    1.2 产气荚膜梭菌的主要毒素及其分型第9-12页
        1.2.1 α毒素第10-11页
        1.2.2 β毒素第11页
        1.2.3 ε毒素第11-12页
        1.2.4 τ毒素第12页
    1.3 流行病学及其致病机理第12-14页
        1.3.1 流行病学第12-14页
        1.3.2 致病机理第14页
    1.4 产气荚膜梭菌实验室检测技术研究进展第14-16页
        1.4.1 聚合酶链式反应技术第15页
        1.4.2 酶联免疫吸附试验第15-16页
        1.4.3 实时荧光定量PCR技术第16页
    1.5 产气荚膜梭菌防制措施及其疫苗的研究进展第16-17页
    1.6 本文研究的目的与意义第17-18页
2 材料与方法第18-25页
    2.1 材料第18-19页
        2.1.1 主要试剂第18页
        2.1.2 主要仪器第18-19页
        2.1.3 病料第19页
        2.1.4 引物设计与合成第19页
    2.2 方法第19-25页
        2.2.1 产气荚膜梭菌的分离与鉴定第19-20页
        2.2.2 产气荚膜梭菌16S rRNA基因PCR检测方法的建立第20-22页
        2.2.3 产气荚膜梭菌16S rRNA基因重组质粒的建立及测序第22-23页
        2.2.4 产气荚膜梭菌多重PCR分型方法的建立第23-25页
3 结果第25-35页
    3.1 产气荚膜梭菌分离鉴定结果第25-28页
        3.1.1 产气荚膜梭菌分离培养结果第25-26页
        3.1.2 革兰氏染色镜检结果第26-27页
        3.1.3 生化实验结果第27-28页
    3.2 16SrRNA检测产气荚膜梭菌方法建立的结果第28-30页
        3.2.1 PCR扩增产气荚膜梭菌参考菌16S rRNA基因结果第28-29页
        3.2.2 16SrRNA基因PCR特异性试验结果第29页
        3.2.3 16SrRNA基因PCR敏感性试验结果第29-30页
        3.2.4 16SrRNA基因PCR检测分离菌结果第30页
    3.3 重组质粒测序结果第30-31页
    3.4 产气荚膜梭菌多重PCR分型方法建立结果第31-35页
        3.4.1 产气荚膜梭菌多重PCR检测参考菌株DNA结果第31-32页
        3.4.2 产气荚膜梭菌多重PCR特异性结果第32页
        3.4.3 产气荚膜梭菌多重PCR敏感性结果第32-33页
        3.4.4 多重PCR分型检测分离菌结果第33-35页
4 讨论第35-38页
5 结论第38-39页
致谢第39-40页
参考文献第40-46页
作者简介第46页

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