缩略语 | 第4-5页 |
摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-9页 |
1 引言 | 第13-21页 |
1.1 日本三角涡虫概述 | 第13-14页 |
1.2 涡虫再生研究进展 | 第14-15页 |
1.3 热休克蛋白70的研究进展 | 第15-19页 |
1.3.1 热休克蛋白70的分类 | 第15-17页 |
1.3.2 HSP70的结构和生物学特征 | 第17-18页 |
1.3.3 HSP70的生物学功能 | 第18-19页 |
1.4 立题依据与意义 | 第19-21页 |
2 材料与方法 | 第21-29页 |
2.1 实验材料 | 第21-23页 |
2.1.1 实验材料的采集与培养 | 第21页 |
2.1.2 实验仪器 | 第21-22页 |
2.1.3 实验试剂 | 第22页 |
2.1.4 实验所用引物 | 第22-23页 |
2.2 实验方法与步骤 | 第23-29页 |
2.2.1 日本三角涡虫总RNA的提取与检测 | 第23-24页 |
2.2.2 一般反转录模板的制备 | 第24页 |
2.2.3 Real-time-PCR模板的制备 | 第24页 |
2.2.4 Real-time PCR扩增 | 第24页 |
2.2.5 HSP70家族各目的基因的生物信息学分析及系统进化树构建 | 第24页 |
2.2.6 应激反应过程中四目的基因的表达变化 | 第24-25页 |
2.2.7 HSP70家族各目的基因的原位杂交 | 第25页 |
2.2.8 HSP70家族各目的基因的RNA干扰 | 第25-29页 |
3 实验结果 | 第29-77页 |
3.1 cDNA模板的制备 | 第29-30页 |
3.1.1 总RNA的提取 | 第29页 |
3.1.2 反转录模板cDNA的检测 | 第29-30页 |
3.2 热休克蛋白70家族四基因的生物信息学分析 | 第30-59页 |
3.2.1 Djhsp70a基因生物信息学分析 | 第30-35页 |
3.2.2 Djhsp70b基因生物信息学分析 | 第35-41页 |
3.2.3 Djhsp70c基因生物信息学分析 | 第41-47页 |
3.2.4 Djhsp70d基因的生物信息学分析 | 第47-54页 |
3.2.5 HSP70家族四基因对应蛋白质的同源性和进化分析 | 第54-59页 |
3.3 不同应激条件下四基因的表达量变化 | 第59-61页 |
3.3.1 不同温度条件处理 | 第59页 |
3.3.2 切割损伤处理 | 第59-60页 |
3.3.3 不同浓度离子液体处理 | 第60-61页 |
3.4 HSP70家族四基因的整体原位杂交结果 | 第61-65页 |
3.4.1 Djhsp70a基因整体原位杂交结果 | 第61-62页 |
3.4.2 Djhsp70b基因整体原位杂交结果 | 第62-63页 |
3.4.3 Djhsp70c基因整体原位杂交结果 | 第63-64页 |
3.4.4 Djhsp70d基因整体原位杂交结果 | 第64-65页 |
3.5 四基因RNA干扰结果 | 第65-77页 |
3.5.1 Djhsp70a基因RNA干扰结果 | 第65-69页 |
3.5.2 Djhsp70b基因RNA干扰结果 | 第69-72页 |
3.5.3 Djhsp70c基因RNA干扰结果 | 第72-74页 |
3.5.4 Djhsp70d基因RNA干扰结果 | 第74-77页 |
4 讨论 | 第77-83页 |
4.1 四基因在应激反应中的保护作用 | 第77-78页 |
4.2 四基因的结构分析 | 第78-80页 |
4.3 四基因的表达及功能分析 | 第80-83页 |
5 结论 | 第83-85页 |
参考文献 | 第85-95页 |
致谢 | 第95-97页 |
攻读硕士学位期间发表的论文和参与的课题 | 第97-98页 |