中文摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
第一章 绪论 | 第12-45页 |
1.1 引言 | 第12-13页 |
1.2 核酸的本质 | 第13-14页 |
1.3 DNA的结构 | 第14-21页 |
1.3.1 DNA的一级结构 | 第14-15页 |
1.3.2 DNA的二级结构 | 第15-20页 |
1.3.3 DNA的三级结构 | 第20-21页 |
1.4 核酸探针的两种作用类型 | 第21-35页 |
1.4.1 基于Watson-Crick氢键作用的核酸探针 | 第23-24页 |
1.4.2 基于非Watson-Crick氢键作用的核酸探针 | 第24-35页 |
1.5 基于核酸探针的信号放大技术 | 第35-39页 |
1.5.1 滚环扩增信号放大技术 | 第35-36页 |
1.5.2 链取代信号放大技术 | 第36-37页 |
1.5.3 基于酶切反应的信号放大技术 | 第37-39页 |
1.6 核酸探针与纳米材料的联用 | 第39-43页 |
1.6.1 核酸与纳米金的联用 | 第39-40页 |
1.6.2 核酸与氧化石墨烯的联用 | 第40-41页 |
1.6.3 核酸与磁性纳米材料的联用 | 第41-42页 |
1.6.4 核酸与银纳米簇的联用 | 第42-43页 |
1.7 本章小结 | 第43-45页 |
第二章 课题设计 | 第45-50页 |
2.1 基于氧化石墨烯的免标记检测体系的设计 | 第45-47页 |
2.2 用于检测甲基转移酶的发卡结构DNA银纳米簇探针的设计 | 第47-49页 |
2.3 基于滚环扩增信号放大技术检测ATP的策略设计 | 第49-50页 |
第三章 基于氧化石墨烯的免标记核酸探针在检测靶标序列及酶中的应用 | 第50-68页 |
3.1 引言 | 第50-51页 |
3.2 仪器与试剂 | 第51-53页 |
3.2.1 仪器 | 第51-52页 |
3.2.2 试剂 | 第52-53页 |
3.3 实验操作 | 第53-54页 |
3.3.1 DNA储存液的配制与定量 | 第53页 |
3.3.2 DNA双链的制备 | 第53页 |
3.3.3 荧光的检测 | 第53页 |
3.3.4 荧光动力学实验 | 第53-54页 |
3.4 基于氧化石墨烯的免标记核酸探针在检测靶标序列中的应用 | 第54-63页 |
3.4.1 氧化石墨烯溶液对Hoechst 33258荧光猝灭能力的研究 | 第54-56页 |
3.4.2 利用氧化石墨烯-Hoechst体系检测靶标序列的可行性 | 第56-57页 |
3.4.3 氧化石墨烯-Hoechst体系对靶标系列的响应速度 | 第57-59页 |
3.4.4 利用氧化石墨烯-Hoechst体系对靶标序列进行定量检测 | 第59-60页 |
3.4.5 利用氧化石墨烯-Hoechst体系检测靶标序列的突变情况 | 第60-63页 |
3.5 利用氧化石墨烯-Hoechst体系检测目标酶 | 第63-66页 |
3.5.1 检测核酸外切酶Ⅲ | 第63-64页 |
3.5.2 检测甲基转移酶 | 第64-66页 |
3.6 逻辑门的设计 | 第66-67页 |
3.7 本章小结 | 第67-68页 |
第四章 基于发卡结构DNA银纳米簇荧光探针对甲基转移酶的检测 | 第68-82页 |
4.1 引言 | 第68-69页 |
4.2 仪器与试剂 | 第69-70页 |
4.2.1 仪器 | 第69页 |
4.2.2 试剂 | 第69-70页 |
4.2.3 常用试剂的配制 | 第70页 |
4.3 实验操作 | 第70-72页 |
4.3.1 DNA银纳米簇探针的制备 | 第70页 |
4.3.2 甲基转移酶的检测 | 第70-71页 |
4.3.3 甲基转移酶的凝胶电泳分析 | 第71页 |
4.3.4 甲基转移酶抑制剂的影响 | 第71页 |
4.3.5 选择性实验 | 第71-72页 |
4.4 结果与讨论 | 第72-81页 |
4.4.1 发卡形DNA银纳米簇探针检测甲基转移酶的可行性 | 第72-74页 |
4.4.2 反应条件的优化 | 第74-76页 |
4.4.3 甲基转移酶的凝胶电泳分析 | 第76-77页 |
4.4.4 荧光检测甲基转移酶 | 第77-79页 |
4.4.5 甲基转移酶抑制剂的影响 | 第79-80页 |
4.4.6 选择性的研究 | 第80-81页 |
4.5 本章小结 | 第81-82页 |
第五章 基于滚环扩增信号放大技术对ATP的超灵敏检测 | 第82-99页 |
5.1 引言 | 第82-83页 |
5.2 仪器与试剂 | 第83-85页 |
5.2.1 仪器 | 第83-84页 |
5.2.2 试剂 | 第84-85页 |
5.3 实验操作 | 第85-88页 |
5.3.1 T4连接酶连接过程 | 第85页 |
5.3.2 外切酶处理过程 | 第85页 |
5.3.3 phi29聚合酶扩增过程 | 第85页 |
5.3.4 荧光光谱的测定 | 第85-86页 |
5.3.5 细胞的培养 | 第86页 |
5.3.6 细胞的计数 | 第86-87页 |
5.3.7 ATP的原位检测操作 | 第87-88页 |
5.4 基于滚环扩增信号放大技术对ATP的体外检测 | 第88-98页 |
5.4.1 可行性研究 | 第88-90页 |
5.4.2 T4连接酶用量的优化 | 第90-91页 |
5.4.3 T4连接酶连接时间的优化 | 第91页 |
5.4.4 phi29聚合酶作用时间的优化 | 第91-92页 |
5.4.5 对体系内ATP的定量分析 | 第92-94页 |
5.4.6 选择性的研究 | 第94页 |
5.4.7 细胞裂解物中ATP的检测 | 第94-96页 |
5.4.8 ATP的原位检测 | 第96-98页 |
5.5 本章小结 | 第98-99页 |
全文总结 | 第99-101页 |
参考文献 | 第101-122页 |
攻读博士期间发表的论文 | 第122-124页 |
致谢 | 第124页 |