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基于DNA的核酸、酶及生物小分子的免标记荧光检测研究

中文摘要第5-7页
Abstract第7-8页
第一章 绪论第12-45页
    1.1 引言第12-13页
    1.2 核酸的本质第13-14页
    1.3 DNA的结构第14-21页
        1.3.1 DNA的一级结构第14-15页
        1.3.2 DNA的二级结构第15-20页
        1.3.3 DNA的三级结构第20-21页
    1.4 核酸探针的两种作用类型第21-35页
        1.4.1 基于Watson-Crick氢键作用的核酸探针第23-24页
        1.4.2 基于非Watson-Crick氢键作用的核酸探针第24-35页
    1.5 基于核酸探针的信号放大技术第35-39页
        1.5.1 滚环扩增信号放大技术第35-36页
        1.5.2 链取代信号放大技术第36-37页
        1.5.3 基于酶切反应的信号放大技术第37-39页
    1.6 核酸探针与纳米材料的联用第39-43页
        1.6.1 核酸与纳米金的联用第39-40页
        1.6.2 核酸与氧化石墨烯的联用第40-41页
        1.6.3 核酸与磁性纳米材料的联用第41-42页
        1.6.4 核酸与银纳米簇的联用第42-43页
    1.7 本章小结第43-45页
第二章 课题设计第45-50页
    2.1 基于氧化石墨烯的免标记检测体系的设计第45-47页
    2.2 用于检测甲基转移酶的发卡结构DNA银纳米簇探针的设计第47-49页
    2.3 基于滚环扩增信号放大技术检测ATP的策略设计第49-50页
第三章 基于氧化石墨烯的免标记核酸探针在检测靶标序列及酶中的应用第50-68页
    3.1 引言第50-51页
    3.2 仪器与试剂第51-53页
        3.2.1 仪器第51-52页
        3.2.2 试剂第52-53页
    3.3 实验操作第53-54页
        3.3.1 DNA储存液的配制与定量第53页
        3.3.2 DNA双链的制备第53页
        3.3.3 荧光的检测第53页
        3.3.4 荧光动力学实验第53-54页
    3.4 基于氧化石墨烯的免标记核酸探针在检测靶标序列中的应用第54-63页
        3.4.1 氧化石墨烯溶液对Hoechst 33258荧光猝灭能力的研究第54-56页
        3.4.2 利用氧化石墨烯-Hoechst体系检测靶标序列的可行性第56-57页
        3.4.3 氧化石墨烯-Hoechst体系对靶标系列的响应速度第57-59页
        3.4.4 利用氧化石墨烯-Hoechst体系对靶标序列进行定量检测第59-60页
        3.4.5 利用氧化石墨烯-Hoechst体系检测靶标序列的突变情况第60-63页
    3.5 利用氧化石墨烯-Hoechst体系检测目标酶第63-66页
        3.5.1 检测核酸外切酶Ⅲ第63-64页
        3.5.2 检测甲基转移酶第64-66页
    3.6 逻辑门的设计第66-67页
    3.7 本章小结第67-68页
第四章 基于发卡结构DNA银纳米簇荧光探针对甲基转移酶的检测第68-82页
    4.1 引言第68-69页
    4.2 仪器与试剂第69-70页
        4.2.1 仪器第69页
        4.2.2 试剂第69-70页
        4.2.3 常用试剂的配制第70页
    4.3 实验操作第70-72页
        4.3.1 DNA银纳米簇探针的制备第70页
        4.3.2 甲基转移酶的检测第70-71页
        4.3.3 甲基转移酶的凝胶电泳分析第71页
        4.3.4 甲基转移酶抑制剂的影响第71页
        4.3.5 选择性实验第71-72页
    4.4 结果与讨论第72-81页
        4.4.1 发卡形DNA银纳米簇探针检测甲基转移酶的可行性第72-74页
        4.4.2 反应条件的优化第74-76页
        4.4.3 甲基转移酶的凝胶电泳分析第76-77页
        4.4.4 荧光检测甲基转移酶第77-79页
        4.4.5 甲基转移酶抑制剂的影响第79-80页
        4.4.6 选择性的研究第80-81页
    4.5 本章小结第81-82页
第五章 基于滚环扩增信号放大技术对ATP的超灵敏检测第82-99页
    5.1 引言第82-83页
    5.2 仪器与试剂第83-85页
        5.2.1 仪器第83-84页
        5.2.2 试剂第84-85页
    5.3 实验操作第85-88页
        5.3.1 T4连接酶连接过程第85页
        5.3.2 外切酶处理过程第85页
        5.3.3 phi29聚合酶扩增过程第85页
        5.3.4 荧光光谱的测定第85-86页
        5.3.5 细胞的培养第86页
        5.3.6 细胞的计数第86-87页
        5.3.7 ATP的原位检测操作第87-88页
    5.4 基于滚环扩增信号放大技术对ATP的体外检测第88-98页
        5.4.1 可行性研究第88-90页
        5.4.2 T4连接酶用量的优化第90-91页
        5.4.3 T4连接酶连接时间的优化第91页
        5.4.4 phi29聚合酶作用时间的优化第91-92页
        5.4.5 对体系内ATP的定量分析第92-94页
        5.4.6 选择性的研究第94页
        5.4.7 细胞裂解物中ATP的检测第94-96页
        5.4.8 ATP的原位检测第96-98页
    5.5 本章小结第98-99页
全文总结第99-101页
参考文献第101-122页
攻读博士期间发表的论文第122-124页
致谢第124页

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