| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-11页 |
| 引言 | 第12-14页 |
| 上篇 文献综述 | 第14-29页 |
| 第一章 卵菌病害研究进展 | 第15-25页 |
| 1. 卵菌病害 | 第15-17页 |
| 1.1 大豆疫霉 | 第15-16页 |
| 1.2 致病疫霉 | 第16页 |
| 1.3 辣椒疫霉 | 第16-17页 |
| 2. 卵菌的侵染方式 | 第17-18页 |
| 3. 卵菌病害的防治 | 第18页 |
| 4. 植物与病原菌互作及植物的免疫系统 | 第18-20页 |
| 4.1 植物与病原菌互作 | 第18-19页 |
| 4.2 植物的免疫系统 | 第19-20页 |
| 5. 效应因子的研究进展 | 第20-25页 |
| 5.1 RxLR效应因子 | 第20-22页 |
| 5.2 CRN效应因子 | 第22-25页 |
| 第二章 酵母双杂交研究进展 | 第25-29页 |
| 1. 酵母双杂交的基本原理 | 第25页 |
| 2. 酵母双杂交的优点 | 第25-26页 |
| 3. 酵母双杂交的缺点 | 第26-27页 |
| 4. 酵母双杂的筛选方法 | 第27页 |
| 5. 酵母双杂交技术的应用 | 第27-29页 |
| 下篇 研究内容 | 第29-95页 |
| 第一章 酵母双杂交方法筛选五个效应因子在拟南芥中的互作蛋白 | 第31-47页 |
| 1. 实验材料和方法 | 第32-42页 |
| 1.1 实验材料 | 第32-34页 |
| 1.2 酵母表达载体的构建 | 第34-38页 |
| 1.3 DH5α感受态细胞的制备 | 第38页 |
| 1.4 酵母感受态细胞制备及转化方法 | 第38-39页 |
| 1.5 诱饵蛋白自激活活性的检测 | 第39页 |
| 1.6 酵母双杂文库筛选 | 第39-40页 |
| 1.7 酵母质粒的提取 | 第40-41页 |
| 1.8 互作蛋白的鉴定 | 第41-42页 |
| 2. 结果与分析 | 第42-45页 |
| 2.1 诱饵蛋白物自激活活性 | 第42页 |
| 2.2 酵母双杂交筛库结果 | 第42-45页 |
| 3. 讨论 | 第45-47页 |
| 第二章 效应因子与拟南芥抗病相关蛋白互作筛选 | 第47-59页 |
| 1. 实验材料与方法 | 第48-50页 |
| 1.1 实验材料 | 第48-49页 |
| 1.2 酵母表达载体的构建 | 第49页 |
| 1.3 DH5α感受态细胞的制备 | 第49页 |
| 1.4 酵母感受态细胞制备及转化方法 | 第49页 |
| 1.5 大规模的酵母Mating | 第49-50页 |
| 2. 结果与分析 | 第50-56页 |
| 2.1 酵母表达载体的构建 | 第50-52页 |
| 2.2 酵母双杂交初筛结果 | 第52-56页 |
| 2.3 RxLR237具有自激活活性 | 第56页 |
| 3. 讨论 | 第56-59页 |
| 第三章 效应因子与拟南芥抗病相关蛋白互作验证 | 第59-71页 |
| 1. 实验材料和方法 | 第60-61页 |
| 1.1 实验材料 | 第60页 |
| 1.2 酵母感受态细胞制备及转化方法 | 第60-61页 |
| 1.3 效应因子自激活检测与验证 | 第61页 |
| 1.4 酵母双杂验证 | 第61页 |
| 2. 结果与分析 | 第61-68页 |
| 2.1 RxLR103、RxLR172、RxLR48自激活检测 | 第61-62页 |
| 2.2 RxLR237自激活验证 | 第62-63页 |
| 2.3 RxLR103与EDS1、BIK1、BAK1、NPR3互作验证 | 第63-65页 |
| 2.4 RxLR172与EDS1、SGT1b互作验证 | 第65-67页 |
| 2.5 RxLR48与NPR1互作验证 | 第67-68页 |
| 3. 讨论 | 第68-71页 |
| 第四章 转基因拟南芥的获取 | 第71-83页 |
| 1. 实验材料与方法 | 第72-77页 |
| 1.1 实验材料 | 第72-73页 |
| 1.2 载体构建 | 第73页 |
| 1.3 大肠杆菌质粒的提取 | 第73页 |
| 1.4 农杆菌GV3101感受态细胞的制备 | 第73-74页 |
| 1.5 农杆菌GV3101感受态细胞的转化 | 第74页 |
| 1.6 农杆菌菌液PCR检测 | 第74-75页 |
| 1.7 拟南芥稳定转化 | 第75-76页 |
| 1.8 转基因种子的筛选 | 第76-77页 |
| 2. 结果与分析 | 第77-81页 |
| 2.1 辣椒疫霉效应因子的选择及载体构建 | 第77-78页 |
| 2.2 转基因拟南芥卡纳抗性筛选 | 第78-80页 |
| 2.3 转基因拟南芥的生长情况 | 第80-81页 |
| 3. 讨论 | 第81-83页 |
| 第五章 辣椒疫霉效应因子RxLR103的功能研究 | 第83-95页 |
| 1. 材料和方法 | 第85-88页 |
| 1.1 实验材料 | 第85页 |
| 1.2 表达载体的构建 | 第85页 |
| 1.3 农杆菌GV3101感受态细胞的制备 | 第85页 |
| 1.4 农杆菌GV3101感受态细胞的转化 | 第85页 |
| 1.5 RxLR103在烟草中的瞬时表达 | 第85-86页 |
| 1.6 RxLR103的亚细胞定位 | 第86页 |
| 1.7 Q-RT PCR分析RxLR103在辣椒疫霉生活史阶段的表达 | 第86-88页 |
| 1.8 RxLR103的毒性分析 | 第88页 |
| 2. 结果与分析 | 第88-93页 |
| 2.1 引物设计 | 第88-89页 |
| 2.2 RxLR103能引起本氏烟叶片的细胞死亡 | 第89-90页 |
| 2.3 RxLR103的亚细胞定位 | 第90-91页 |
| 2.4 RxLR103在辣椒疫霉侵染阶段表达模式 | 第91-92页 |
| 2.5 RxLR103的毒性分析 | 第92-93页 |
| 3. 讨论 | 第93-95页 |
| 全文总结 | 第95-97页 |
| 参考文献 | 第97-107页 |
| 附表 | 第107-129页 |
| 攻读硕士学位期间发表的研究论文 | 第129-131页 |
| 致谢 | 第131页 |
