摘要 | 第7-10页 |
ABSTRACT | 第10-13页 |
第一部分 文献综述 | 第14-30页 |
1 小麦白粉病 | 第14-16页 |
1.1 小麦白粉病的危害 | 第14页 |
1.2 小麦白粉菌的发育 | 第14-15页 |
1.3 小麦白粉病抗性基因的研究进展 | 第15-16页 |
1.3.1 小麦白粉病抗性基因的发掘 | 第15-16页 |
1.3.2 小麦白粉病抗病相关基因的克隆和功能验证 | 第16页 |
2 植物的抗病机制和病原菌的致病机制 | 第16-19页 |
2.1 植物的抗病机制 | 第16-18页 |
2.2 病原菌的致病机制 | 第18-19页 |
3 植物中的感病基因 | 第19-24页 |
3.1 感病基因的定义 | 第19页 |
3.2 感病相关基因的发掘 | 第19-21页 |
3.3 感白粉病相关基因的发掘 | 第21-24页 |
3.3.1 大麦感白粉病相关基因的发掘 | 第21-22页 |
3.3.2 拟南芥感白粉病相关基因的发掘 | 第22-24页 |
4 感病基因的利用 | 第24-25页 |
4.1 感病基因利用的优势 | 第24-25页 |
4.2 感病基因利用的方法 | 第25页 |
5 植物中ATP结合盒转运蛋白的研究 | 第25-26页 |
6 植物中F-box蛋白的研究 | 第26-28页 |
7 植物中血红素结合蛋白的研究 | 第28页 |
8 本研究的目的和意义 | 第28-29页 |
本研究的技术路线 | 第29-30页 |
第二部分 研究报告 | 第30-68页 |
一 小麦感白粉病候选基因的筛选 | 第30-35页 |
1 材料与方法 | 第30-32页 |
1.1 试验材料 | 第30页 |
1.2 测序技术 | 第30页 |
1.3 试验方法 | 第30-32页 |
1.3.1 白粉菌的接种和叶片取样方法 | 第30-31页 |
1.3.2 植物总RNA的提取 | 第31页 |
1.3.3 标签的制备及测序 | 第31-32页 |
2 结果与分析 | 第32-35页 |
二 感白粉病基因的克隆和功能验证 | 第35-68页 |
1 材料与方法 | 第35-45页 |
1.1 试验材料 | 第35页 |
1.2 试验方法 | 第35-45页 |
1.2.1 目标基因的克隆 | 第35-36页 |
1.2.2 目标序列的生物信息学分析 | 第36页 |
1.2.3 白粉菌的接种和叶片取样方法 | 第36页 |
1.2.4 植物总RNA的提取 | 第36页 |
1.2.5 通过实时荧光定量PCR分析基因表达情况 | 第36-37页 |
1.2.6 感病候选基因RNAi载体的构建 | 第37-40页 |
1.2.7 瞬间诱导的基因沉默(TIGS) | 第40-41页 |
1.2.8 小麦遗传转化 | 第41-43页 |
1.2.9 转基因植株的鉴定 | 第43-45页 |
2 结果与分析 | 第45-65页 |
2.1 三个感白粉病基因的数字表达谱数据 | 第45页 |
2.2 感白粉病基因TaHBP的克隆和功能验证 | 第45-52页 |
2.2.1 TaHBP基因cDNA全长的克隆及蛋白序列分析 | 第45-48页 |
2.2.2 TaHBP在不同抗病材料中受白粉菌诱导后的表达特征分析 | 第48-49页 |
2.2.3 利用TIGS技术鉴定TaHBP基因在小麦抗白粉病中的功能 | 第49-51页 |
2.2.3.1 TIGS载体的构建 | 第49-50页 |
2.2.3.2 利用TIGS方法研究TaHBP的功能 | 第50-51页 |
2.2.4 利用RNAi技术创造转基因植株研究TaHBP基因的功能 | 第51-52页 |
2.3 感白粉病基因TaFBX的克隆和功能验证 | 第52-59页 |
2.3.1 TaFBX基因探针序列的初步分析 | 第52-53页 |
2.3.2 TaFBX在不同抗病材料中受白粉菌诱导后的表达特征分析 | 第53-54页 |
2.3.3 利用TIGS技术鉴定TaFBX基因在小麦抗白粉病中的功能 | 第54-56页 |
2.3.3.1 TIGS载体的构建 | 第54-55页 |
2.3.3.2 利用TIGS方法研究TaFBX的功能 | 第55-56页 |
2.3.4 利用RNAi技术创造转基因植株验证TaFBX基因的功能 | 第56-59页 |
2.4 感白粉病基因TaABC的克隆和功能验证 | 第59-65页 |
2.4.1 TaABC基因探针序列的初步分析 | 第59-60页 |
2.4.2 TaABC在不同抗病材料中受白粉菌诱导后的表达特征分析 | 第60-61页 |
2.4.3 利用TIGS技术鉴定TaABC基因在小麦抗白粉病中的功能 | 第61-62页 |
2.4.3.1 TIGS载体的构建 | 第61页 |
2.4.3.2 利用TIGS方法研究TaABC的功能 | 第61-62页 |
2.4.4 利用RNAi技术创造转基因植株研究TaABC的功能 | 第62-65页 |
3 讨论 | 第65-68页 |
3.1 感病候选基因在不同抗感白粉病材料中的表达特征分析 | 第65页 |
3.2 感病候选基因的克隆与生物信息学分析 | 第65-66页 |
3.3 瞬间沉默感病候选基因降低了扬麦158叶片表皮细胞中的吸器指数 | 第66-67页 |
3.4 基于RNAi原理创造的转基因植株能够提高扬麦158对白粉菌的抗性 | 第67-68页 |
全文结论 | 第68-70页 |
参考文献 | 第70-78页 |
附录 | 第78-80页 |
致谢 | 第80页 |