| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-10页 |
| 缩略词 | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-18页 |
| 1 一氧化氮的研究进展 | 第11-15页 |
| ·一氧化氮的合成途径 | 第11-12页 |
| ·一氧化氮与亚硝基化作用 | 第12-14页 |
| ·一氧化氮对植物细胞死亡的影响 | 第14-15页 |
| 2 亚硝基谷胱甘肽还原酶及其对细胞死亡的影响 | 第15-16页 |
| 3 本研究的目的及科学意义 | 第16-18页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第18-39页 |
| 1 实验材料 | 第18-19页 |
| ·植物材料 | 第18页 |
| ·菌种和病毒 | 第18页 |
| ·实验试剂和仪器 | 第18-19页 |
| 2 实验方法 | 第19-39页 |
| ·烟草培养 | 第19-20页 |
| ·大肠杆菌感受态制备 | 第20-21页 |
| ·大肠杆菌介导的转化 | 第21-22页 |
| ·小量质粒提取 | 第22-23页 |
| ·切胶回收 | 第23-24页 |
| ·酶切 | 第24-25页 |
| ·连接 | 第25页 |
| ·表达载体的构建 | 第25页 |
| ·农杆菌感受态制备 | 第25-26页 |
| ·农杆菌介导的转化 | 第26-27页 |
| ·农杆菌介导的烟草转基因沉默株系的创制 | 第27-29页 |
| ·阳性克隆鉴定、测序及结果分析 | 第29-30页 |
| ·PCR鉴定 | 第29页 |
| ·菌液鉴定 | 第29页 |
| ·酶切鉴定 | 第29-30页 |
| ·烟草DNA的提取 | 第30页 |
| ·烟草RNA的提取 | 第30-32页 |
| ·荧光显色法检测烟草叶片中NO的含量 | 第32页 |
| ·烟草cDNA的合成 | 第32-33页 |
| ·烟草GSNOR1 RNAi转基因沉默株系的分离与表型鉴定 | 第33页 |
| ·百草枯诱导烟草死亡 | 第33-34页 |
| ·烟草花叶病毒(TMV)侵染及检测 | 第34-35页 |
| ·VIGS构建与农杆菌注射 | 第35页 |
| ·蛋白质印记法 | 第35-36页 |
| ·凝胶激酶活性分析 | 第36页 |
| ·半定量RT-PCR | 第36-37页 |
| ·双氧水染色法 | 第37-39页 |
| 第三章 结果与分析 | 第39-48页 |
| 1 烟草GSNOR1 RNAi转基因沉默株系的创制及表达分析 | 第39页 |
| 2 烟草GSNOR1 RNAi转基因沉默植株叶片上发生自发性细胞死亡 | 第39-41页 |
| 3 沉默烟草的GSNOR1基因导致不相容反应触发的HR的扩散 | 第41-42页 |
| 4 烟草GSNOR1 RNAi转基因沉默植株较野生型烟草积累较高水平的NO和H_2O_2 | 第42-44页 |
| 5 烟草GSNOR1 RNAi转基因沉默植株叶片上的死亡与防御反应的激活相关 | 第44-45页 |
| 6 烟草GSNOR1 RNAi转基因沉默植株对烟草花叶病毒(TMV)的抗性显著增强 | 第45-47页 |
| 7 烟草GSNOR1 RNAi转基因沉默植株对百草枯诱导的细胞死亡具有较强的抗性 | 第47-48页 |
| 第四章 讨论 | 第48-51页 |
| 参考文献 | 第51-57页 |
| 附录 | 第57-62页 |
| 1 实验常用抗生素及药品母液配制方法 | 第57页 |
| 2 常用培养基的配制 | 第57-61页 |
| 3 常见试剂和缓冲液配制方法 | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62-64页 |
| 浙江师范大学学位论文诚信承诺书 | 第64-65页 |
