| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-9页 |
| 符号说明 | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-22页 |
| ·BVDV 简介 | 第10页 |
| ·BVDV 病原学 | 第10-13页 |
| ·BVDV 的生物学特性 | 第10-11页 |
| ·BVDV 的分型 | 第11-12页 |
| ·BVDV-E2 蛋白的研究进展 | 第12-13页 |
| ·BVDV 流行病学 | 第13-14页 |
| ·国外流行情况 | 第13页 |
| ·国内流行情况 | 第13-14页 |
| ·BVDV 诊断技术的研究进展 | 第14-18页 |
| ·病毒分离 | 第15页 |
| ·电镜检查 | 第15页 |
| ·琼脂扩散试验 | 第15-16页 |
| ·病毒中和试验 | 第16页 |
| ·酶联免疫吸附试验 | 第16-17页 |
| ·免疫荧光技术 | 第17页 |
| ·反转录-多聚链式反应技术（RT-PCR） | 第17-18页 |
| ·核酸探针杂交技术 | 第18页 |
| ·BVD 的防制 | 第18-19页 |
| ·研究目的和意义 | 第19-22页 |
| 第二章 BVDV-E2 蛋白的真核表达和纯化 | 第22-34页 |
| ·实验材料 | 第22-23页 |
| ·细胞和杆粒 | 第22页 |
| ·抗体 | 第22页 |
| ·主要试剂 | 第22页 |
| ·主要仪器 | 第22-23页 |
| ·实验方法 | 第23-29页 |
| ·昆虫细胞的培养 | 第23-24页 |
| ·阳性杆粒 Bacmid 转染 Sf9 细胞 | 第24页 |
| ·重组杆状病毒的扩增 | 第24-25页 |
| ·间接免疫荧光 | 第25-26页 |
| ·重组蛋白的 SDS-PAGE | 第26-27页 |
| ·Western blot 检测 | 第27-28页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第28页 |
| ·重组蛋白浓度的测定 | 第28-29页 |
| ·实验结果 | 第29-32页 |
| ·重组杆状病毒的增殖结果 | 第29页 |
| ·间接免疫荧光结果 | 第29-30页 |
| ·重组蛋白的 SDS-PAGE 结果 | 第30-31页 |
| ·目的蛋白的纯化结果 | 第31页 |
| ·重组蛋白的 Western blot 结果 | 第31-32页 |
| ·蛋白浓度的测定 | 第32页 |
| ·讨论 | 第32-34页 |
| ·Sf9 细胞培养 | 第32-33页 |
| ·重组蛋白的表达和纯化 | 第33-34页 |
| 第三章 BVDV 重组 E2 蛋白间接 ELISA 检测方法的建立 | 第34-48页 |
| ·材料 | 第34页 |
| ·重组 BVDV-E2 蛋白抗原 | 第34页 |
| ·血清 | 第34页 |
| ·主要试剂、仪器 | 第34页 |
| ·方法 | 第34-38页 |
| ·ELISA 操作步骤 | 第34-35页 |
| ·ELISA 试验条件的优化 | 第35-37页 |
| ·特异性试验 | 第37页 |
| ·敏感性试验 | 第37页 |
| ·重复性试验 | 第37页 |
| ·与商品化试剂盒的比较试验 | 第37-38页 |
| ·结果 | 第38-44页 |
| ·最佳反应条件的选择 | 第38-42页 |
| ·特异性试验 | 第42-43页 |
| ·敏感性试验 | 第43页 |
| ·重复性试验 | 第43-44页 |
| ·与商品化试剂盒的对比试验 | 第44页 |
| ·讨论 | 第44-48页 |
| 第四章 黑龙江部分地区奶牛 BVDV 血清流行病学调查 | 第48-56页 |
| ·材料 | 第48页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第48页 |
| ·血清样品来源 | 第48页 |
| ·方法 | 第48-49页 |
| ·牛病毒性腹泻粘膜病 ELISA 检测步骤 | 第48-49页 |
| ·样品临界值判定 | 第49页 |
| ·样品结果统计学分析 | 第49页 |
| ·结果 | 第49-54页 |
| ·2012~2014 年间黑龙江地区奶牛 BVDV 流行情况 | 第49页 |
| ·2012 年黑龙江地区奶牛血清 BVDV 抗体阳性率分析 | 第49-50页 |
| ·2013 年黑龙江地区奶牛血清 BVDV 抗体阳性率分析 | 第50-51页 |
| ·2014 年黑龙江地区奶牛血清 BVDV 抗体阳性率分析 | 第51-52页 |
| ·2012~2014 年间黑龙江部分地区 BVDV 抗体阳性率分布汇总 | 第52-53页 |
| ·不同来源奶牛血清 BVDV 抗体阳性对比分析 | 第53-54页 |
| ·不用季节奶牛血清 BVDV 抗体阳性对比分析 | 第54页 |
| ·讨论 | 第54-56页 |
| 第五章 结论 | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-66页 |
| 致谢 | 第66-68页 |
| 附录 | 第68-72页 |
| 个人简历 | 第72页 |
