| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-19页 |
| ·纤维素酶和半纤维素酶 | 第9-15页 |
| ·纤维素酶 | 第9-10页 |
| ·半纤维素酶 | 第10页 |
| ·纤维素酶和半纤维素酶的应用 | 第10-11页 |
| ·外切葡聚糖酶及其国内外研究进展 | 第11-13页 |
| ·木聚糖酶及其国内外研究进展 | 第13-15页 |
| ·巴斯德毕赤酵母表达系统 | 第15-17页 |
| ·本研究的意义、内容和技术路线 | 第17-19页 |
| ·本研究的意义 | 第17页 |
| ·本研究的内容 | 第17-18页 |
| ·本研究的技术路线 | 第18-19页 |
| 第二章 烟曲霉Z5的纤维素酶相关基因的转录分析 | 第19-33页 |
| ·引言 | 第19页 |
| ·材料与方法 | 第19-23页 |
| ·菌株及培养基 | 第19页 |
| ·试剂与仪器 | 第19页 |
| ·烟曲霉总RNA的提取 | 第19-20页 |
| ·烟曲霉RNA的反转录及cDNA的合成 | 第20-21页 |
| ·引物的设计 | 第21-23页 |
| ·内参基因和纤维素酶相关基因的Real-time PCR | 第23页 |
| ·结果与分析 | 第23-31页 |
| ·RNA样品质量检测 | 第23-24页 |
| ·Real-time PCR分析 | 第24-26页 |
| ·纤维素酶相关基因的相对表达量分析 | 第26-31页 |
| ·小结 | 第31-33页 |
| 第三章 烟曲霉Z5的外切葡聚糖酶和木聚糖酶基因的异源表达 | 第33-55页 |
| ·引言 | 第33页 |
| ·材料 | 第33-34页 |
| ·菌株、质粒及培养基 | 第33-34页 |
| ·主要仪器 | 第34页 |
| ·实验方法 | 第34-40页 |
| ·引物的设计与合成 | 第34页 |
| ·PCR扩增 | 第34-35页 |
| ·大肠杆菌感受态的制备及转化 | 第35-36页 |
| ·毕赤酵母表达载体的构建 | 第36页 |
| ·毕赤酵母感受态的制备 | 第36页 |
| ·毕赤酵母的电击转化 | 第36-37页 |
| ·重组毕赤酵母转化子的筛选、诱导表达及酶活的测定 | 第37-38页 |
| ·重组毕赤酵母表达蛋白的纯化及SDS-PAGE | 第38-39页 |
| ·重组蛋白的酶学性质分析 | 第39-40页 |
| ·结果与分析 | 第40-52页 |
| ·外切葡聚糖酶基因的序列分析 | 第40-42页 |
| ·木聚糖酶基因的序列分析 | 第42-44页 |
| ·基因克隆 | 第44-45页 |
| ·表达载体的构建 | 第45-47页 |
| ·毕赤酵母的的转化,筛选和鉴定 | 第47页 |
| ·cbh-1和xyn-1基因在毕赤酵母中的表达 | 第47-48页 |
| ·SDS-PAGE | 第48-49页 |
| ·重组外切葡聚糖酶的酶学特性分析 | 第49-52页 |
| ·讨论 | 第52-53页 |
| ·小结 | 第53-55页 |
| 第四章 全文总结 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-61页 |
| 致谢 | 第61页 |