| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 符号与缩略语说明 | 第12-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-27页 |
| 引言 | 第13页 |
| 1 木质纤维素的微生物降解 | 第13-19页 |
| ·木质纤维素的结构与性质 | 第13-15页 |
| ·木质纤维素的生物降解 | 第15-19页 |
| 2 粗糙脉胞菌纤维二糖脱氢酶 | 第19-20页 |
| ·纤维二糖脱氢酶基本性质 | 第19页 |
| ·纤维二糖脱氢酶蛋白家族分类 | 第19-20页 |
| ·纤维二糖脱氢酶功能假说 | 第20页 |
| 3 纤维素酶基因改造的研究现状 | 第20-23页 |
| ·毕赤酵母表达研究进展 | 第21-22页 |
| ·丝状真菌表达研究进展 | 第22-23页 |
| 4 纤维素酶的工业生产及应用前景 | 第23-24页 |
| ·纤维素酶的工业生产 | 第23页 |
| ·纤维素酶的应用前景 | 第23-24页 |
| 5 研究目的意义和技术路线 | 第24-27页 |
| ·研究目的意义 | 第24-25页 |
| ·技术路线 | 第25-27页 |
| 第二章 cdh基因表达载体的构建及同源表达 | 第27-41页 |
| 1 材料与方法 | 第27-34页 |
| ·菌株与质粒 | 第27页 |
| ·培养基 | 第27-28页 |
| ·主要试剂 | 第28页 |
| ·常用仪器 | 第28页 |
| ·常用溶液 | 第28页 |
| ·目的基因扩增与表达载体的构建 | 第28-32页 |
| ·转化 | 第32-33页 |
| ·同源表达 | 第33-34页 |
| 2 结果与分析 | 第34-40页 |
| ·nc-cdh基因序列分析 | 第34-36页 |
| ·表达载体的构建流程 | 第36-37页 |
| ·基因重组双交换 | 第37页 |
| ·不同碳源条件下,N.crassa野生型菌株CDH酶活的检测 | 第37-38页 |
| ·菌株WT、2489-cdh1和2489-cdh2在不同碳源培养条件下,CDH酶活性比较 | 第38-39页 |
| ·菌株WT,突变株Δcdh1和突变株Δcdh2在以Avicel为碳源培养时,CDH酶活性比较 | 第39-40页 |
| ·Native-PAGE酶活验证 | 第40页 |
| 3 讨论 | 第40-41页 |
| 第三章 纤维二糖脱氢酶的纯化及酶学性质研究 | 第41-55页 |
| 1 材料与方法 | 第41-45页 |
| ·菌株 | 第41页 |
| ·培养基与常用溶液 | 第41-42页 |
| ·实验所需试剂及仪器 | 第42页 |
| ·纤维二糖脱氢酶的纯化 | 第42-44页 |
| ·酶学性质、酶反应动力学研究 | 第44-45页 |
| ·与微晶纤维素和滤纸结合力的测定 | 第45页 |
| 2 结果与分析 | 第45-52页 |
| ·纤维二糖脱氢酶的纯化和鉴定 | 第45-48页 |
| ·酶学性质、酶反应动力学研究 | 第48-52页 |
| ·与微晶纤维素和滤纸结合力的测定 | 第52页 |
| 3 讨论 | 第52-55页 |
| 第四章 CDH促进纤维素酶系降解功能的机理研究 | 第55-65页 |
| 1 材料与方法 | 第55-59页 |
| ·菌株 | 第55页 |
| ·常用溶液 | 第55-56页 |
| ·实验所需仪器 | 第56页 |
| ·固体发酵 | 第56页 |
| ·Avicel体外酶解 | 第56-57页 |
| ·化学组分分析测定 | 第57-59页 |
| ·扫描电子显微镜观察 | 第59页 |
| 2 结果与分析 | 第59-62页 |
| ·固体发酵CDH酶活检测 | 第59-60页 |
| ·CDH回补验证 | 第60页 |
| ·纤维素、半纤维素和木质素各组分含量测定 | 第60-61页 |
| ·扫描电镜(SEM)观察 | 第61-62页 |
| 3 讨论 | 第62-65页 |
| 第五章 全文结论 | 第65-67页 |
| 创新点 | 第67-69页 |
| 附录 | 第69-73页 |
| 参考文献 | 第73-79页 |
| 致谢 | 第79-81页 |
| 在读期间发表论文 | 第81页 |
