| 致谢 | 第1-6页 |
| 摘要 | 第6-9页 |
| ABSTRACT | 第9-15页 |
| 1 引言 | 第15-27页 |
| ·G蛋白偶联受体及研究的科学意义 | 第15页 |
| ·G蛋白偶联受体二聚化的研究概况 | 第15-19页 |
| ·G蛋白偶联受体二聚化的研究现状 | 第15-16页 |
| ·研究GPCRs二聚化的常用方法介绍 | 第16-19页 |
| ·GPCRs单体同源建模的简介 | 第19-20页 |
| ·蛋白质定点荧光标记技术的介绍 | 第20-23页 |
| ·小分子荧光探针的标记 | 第20-21页 |
| ·荧光蛋白质的标记 | 第21-23页 |
| ·荧光光谱技术介绍 | 第23-27页 |
| ·荧光的基本原理 | 第23-24页 |
| ·荧光的基本特征 | 第24-25页 |
| ·FLIM-FRET技术的介绍 | 第25-27页 |
| 2 细胞水平GPR17的多位点荧光蛋白标记 | 第27-49页 |
| ·引言 | 第27-28页 |
| ·材料和方法 | 第28-39页 |
| ·蛋白质氨基酸序列 | 第28-32页 |
| ·药物和试剂 | 第32页 |
| ·实验仪器 | 第32-33页 |
| ·溶液配制 | 第33-34页 |
| ·实验方法 | 第34-39页 |
| ·结果与讨论 | 第39-47页 |
| ·荧光蛋白的荧光光谱扫描 | 第39页 |
| ·细胞水平上GPR17的荧光标记 | 第39-45页 |
| ·GFP标记对GPR17功能的影响 | 第45-47页 |
| ·结论 | 第47-49页 |
| 3 基于FLIM-FRET技术检测GPR17的同源二聚化 | 第49-71页 |
| ·引言 | 第49-50页 |
| ·材料和方法 | 第50-61页 |
| ·蛋白质氨基酸序列 | 第50-54页 |
| ·药物和试剂 | 第54-55页 |
| ·实验仪器 | 第55页 |
| ·溶液配制 | 第55-56页 |
| ·实验方法 | 第56-61页 |
| ·结果与讨论 | 第61-70页 |
| ·GPR17/G128：GFP10-11+GFP1-9体系中供体的寿命统计 | 第61-62页 |
| ·GPR17/R214：GFP10-11+GFP1-9体系中供体的寿命统计 | 第62-63页 |
| ·GPR17/R291：GFP10-11+GFP1-9体系中供体的寿命统计 | 第63-64页 |
| ·GPR17/N：GFP体系中供体的寿命统计 | 第64-65页 |
| ·GPR17/E255：GFP体系中供体的寿命统计 | 第65-66页 |
| ·GPR17分子间FRET效率与距离的计算 | 第66-67页 |
| ·GPR17单体结构的同源建模与分子模拟 | 第67-68页 |
| ·GPR17同源二聚体模型的搭建 | 第68-69页 |
| ·GPR17同源二聚体结构在PDB数据库中的比对 | 第69-70页 |
| ·结论 | 第70-71页 |
| 4 基于镧系金属络合物的荧光探针的研究 | 第71-81页 |
| ·引言 | 第71-73页 |
| ·材料和方法 | 第73-75页 |
| ·样品制备 | 第73-74页 |
| ·荧光光谱扫描实验 | 第74页 |
| ·荧光滴定实验 | 第74-75页 |
| ·结果与讨论 | 第75-79页 |
| ·tpy-Tb~(3+)和tpy-Eu~(3+)的荧光光谱扫描 | 第75-76页 |
| ·tpy-Tb~(3+)与Ub的结合 | 第76-77页 |
| ·tpy-Eu~(3+)与Ub的结合 | 第77-79页 |
| ·结论 | 第79-81页 |
| 5 基于疏水性相互作用的Rh101探针研究 | 第81-91页 |
| ·引言 | 第81-82页 |
| ·材料和方法 | 第82-85页 |
| ·样品制备 | 第82-84页 |
| ·Rh101的荧光光谱扫描实验 | 第84页 |
| ·荧光滴定实验 | 第84-85页 |
| ·结果与讨论 | 第85-88页 |
| ·Rh101的荧光光谱扫描 | 第85-86页 |
| ·WT Ub和Rh101的结合 | 第86-87页 |
| ·Ub/L8：tag与Rh10结合 | 第87-88页 |
| ·Ub/L8：tag和WT Ub与Rh101结合情况的比较 | 第88页 |
| ·结论 | 第88-91页 |
| 6 总结与展望 | 第91-95页 |
| ·GPR17在细胞水平上的多位点荧光标记 | 第91页 |
| ·GPR17在细胞水平上存在同源二聚化现象 | 第91-92页 |
| ·GPR17同源二聚体结构的预测 | 第92页 |
| ·用于蛋白质定点标记的荧光探针研究 | 第92-93页 |
| ·展望 | 第93-95页 |
| 参考文献 | 第95-101页 |
| 附录A 荧光光谱检测 | 第101-103页 |
| 附录B 激光共聚焦荧光显微镜的拍摄 | 第103-105页 |
| 附录C 荧光寿命成像(FLIM)拍摄 | 第105-109页 |
| 附录D 用于磁共振研究的赖氨酸甲基化修饰方法 | 第109-112页 |
| 作者简介及在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第112页 |
