| 致谢 | 第1-6页 |
| 摘要 | 第6-7页 |
| ABSTRACT | 第7-11页 |
| 1 引言 | 第11-20页 |
| ·生物大分子核磁共振 | 第11-14页 |
| ·蛋白质核磁共振波谱学适用范围 | 第12-13页 |
| ·蛋白质同位素标记方法 | 第13页 |
| ·蛋白质核磁共振波谱学研究内容 | 第13-14页 |
| ·~(19)F NMR在生物大分子研究中的应用 | 第14页 |
| ·蛋白质二硫键异构酶(protein disulfide isomerase,PDI) | 第14-17页 |
| ·蛋白质二硫键异构酶的结构和功能 | 第15-16页 |
| ·蛋白质二硫键异构酶的功能 | 第16-17页 |
| ·蛋白质二硫键异构酶与帕金森症 | 第17-18页 |
| ·蛋白质二硫键异构酶与霍乱毒素 | 第18-20页 |
| 2 蛋白质二硫键异构酶及其突变体的表达与纯化 | 第20-28页 |
| ·前言 | 第20页 |
| ·材料与方法 | 第20-25页 |
| ·实验材料 | 第20-21页 |
| ·PDI突变体的制备 | 第21-22页 |
| ·PDI的表达 | 第22-25页 |
| ·结果与讨论 | 第25-27页 |
| ·小结 | 第27-28页 |
| 3 ~(19)F NMR监测蛋白质二硫键异构酶的构象变化 | 第28-36页 |
| ·前言 | 第28-29页 |
| ·材料与方法 | 第29-30页 |
| ·NMR实验样品 | 第29页 |
| ·PDI及其突变体~(19)F NMR一维实验 | 第29页 |
| ·PDI及其突变体~(19)F NMR变温实验 | 第29页 |
| ·PDI底物滴定~(19)F NMR实验 | 第29-30页 |
| ·结果与讨论 | 第30-34页 |
| ·Wt PDI的~(19)F NMR信号归属 | 第30-32页 |
| ·变温实验 | 第32-33页 |
| ·底物滴定实验 | 第33-34页 |
| ·小结 | 第34-36页 |
| 4 PDI在霍乱毒素致病过程中的作用的分子机制研究 | 第36-45页 |
| ·前言 | 第36-37页 |
| ·实验和方法 | 第37-38页 |
| ·核磁样品的制备 | 第37页 |
| ·NMR实验 | 第37-38页 |
| ·结果与讨论 | 第38-44页 |
| ·PDI与单独CTA亚基相互作用的研究 | 第38-41页 |
| ·PDI C-S突变体与CTA相互作用的研究 | 第41-44页 |
| ·小结 | 第44-45页 |
| 5 PDI抑制α-synuclein纤维化聚集作用机制研究 | 第45-50页 |
| ·前言 | 第45-46页 |
| ·实验和方法 | 第46页 |
| ·样品的制备 | 第46页 |
| ·~1H-~(15)N HSQC实验 | 第46页 |
| ·ThT荧光光谱实验 | 第46页 |
| ·结果与讨论 | 第46-49页 |
| ·α-synuclein与PDI及其突变体结合位点的研究 | 第46-48页 |
| ·ThT荧光实验 | 第48-49页 |
| ·小结 | 第49-50页 |
| 6 总结 | 第50-52页 |
| 参考文献 | 第52-57页 |
| 附录 | 第57-59页 |
| 常规培养基配方 | 第57页 |
| 15% SDS-PAGE电泳配方 | 第57-59页 |
| 作者简介及在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第59页 |
