| 缩略词表 | 第1-10页 |
| 摘要 | 第10-11页 |
| ABSTRACT | 第11-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-22页 |
| 1 IBD临床症状与致病机理 | 第12-13页 |
| ·IBD临床症状 | 第12页 |
| ·IBDV致病机理 | 第12-13页 |
| 2 IBDV基因组结构 | 第13页 |
| 3 IBDV衣壳蛋白 | 第13-15页 |
| ·VP2蛋白 | 第13-14页 |
| ·VP3蛋白 | 第14页 |
| ·VP4蛋白 | 第14-15页 |
| ·VP5蛋白 | 第15页 |
| ·VP1蛋白 | 第15页 |
| 4 IBDV VP2抗原结构的变异 | 第15-16页 |
| 5 IBDV疫苗研究进展 | 第16-17页 |
| ·传统IBDV疫苗 | 第16页 |
| ·基因工程苗 | 第16-17页 |
| 6 IBDV VP2蛋白在不同表达系统的表达 | 第17-18页 |
| ·IBDV VP2在大肠杆菌表达系统的表达 | 第17页 |
| ·IBDV VP2在杆状病毒表达系统的表达 | 第17-18页 |
| ·IBDV VP2在毕赤酵母表达系统的表达 | 第18页 |
| 7 存在问题及防治前景 | 第18-19页 |
| 8 研究目的与意义 | 第19-22页 |
| 第二章 IBDV NB株VP2成熟蛋白基因在毕赤酵母中的表达 | 第22-60页 |
| 1 材料 | 第22-29页 |
| ·菌种和质粒 | 第22页 |
| ·试剂盒 | 第22-23页 |
| ·抗体 | 第23页 |
| ·酶类及其它相关试剂 | 第23-24页 |
| ·主要仪器设备 | 第24-25页 |
| ·主要试剂的配制 | 第25-27页 |
| ·蛋白凝胶电泳及Western blotting缓冲液 | 第27-29页 |
| 2 方法 | 第29-43页 |
| ·IBDV VP2基因的扩增 | 第29-32页 |
| ·IBDV NB株VP2基因重组克隆质粒的构建 | 第32-36页 |
| ·IBDV NB株VP2基因毕赤酵母表达载体构建 | 第36-39页 |
| ·重组阳性质粒pPICZαC-VP2转化X-33酵母菌 | 第39-43页 |
| 3 结果与分析 | 第43-53页 |
| ·IBDV VP2基因片段的PCR扩增 | 第43页 |
| ·回收纯化VP2基因 | 第43-44页 |
| ·IBDV NB株VP2基因克隆载体的构建及鉴定 | 第44-45页 |
| ·重组表达质粒的构建 | 第45-48页 |
| ·重组质粒pPICZαC-VP2的线性化鉴定 | 第48-49页 |
| ·重组酵母菌菌液PCR鉴定 | 第49-50页 |
| ·表达产物的分析及鉴定 | 第50-53页 |
| 4 讨论 | 第53-60页 |
| ·引物设计 | 第53页 |
| ·抗原集中区对抗原活性的影响 | 第53页 |
| ·VP2重组蛋白的检测 | 第53-54页 |
| ·酵母表达系统 | 第54页 |
| ·影响外源基因在毕赤酵母中表达的几个因素 | 第54-60页 |
| 全文结论 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-70页 |
| 附录A 表达载体pPICZαC的物理图谱 | 第70-72页 |
| 附录B 表达载体pPICZαC的多克隆位点 | 第72-74页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第74-76页 |
| 致谢 | 第76页 |
