| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-25页 |
| ·解旋酶综述 | 第12-17页 |
| ·解旋酶概念及分类 | 第12-14页 |
| ·解旋酶功能性质及工作机制 | 第14-17页 |
| ·RECQ概述 | 第17-20页 |
| ·RECQ基本性质 | 第17-18页 |
| ·RECQ结构特征 | 第18-20页 |
| ·RECQL研究进展 | 第20页 |
| ·解旋酶研究方法 | 第20-23页 |
| ·凝胶滞缓实验（EMSA） | 第21页 |
| ·停留光谱技术（Stopped-flow） | 第21-22页 |
| ·荧光各向异性技术（Fluorescence Anisotropy） | 第22-23页 |
| ·单分子技术 | 第23页 |
| ·本课题研究的目的和意义 | 第23-25页 |
| 第二章 BtRECQL解旋酶表达载体构建及表达纯化 | 第25-42页 |
| ·材料 | 第25-29页 |
| ·载体、菌株及分子试剂 | 第25页 |
| ·基因合成所用引物及序列 | 第25-26页 |
| ·配制主要试剂 | 第26-29页 |
| ·使用的主要仪器设备 | 第29页 |
| ·实验方法 | 第29-37页 |
| ·PCR扩增Bt Recql~T与Bt Recql~(TM)编码序列 | 第29-32页 |
| ·表达载体构建 | 第32-36页 |
| ·重组蛋白的表达与纯化 | 第36-37页 |
| ·结果 | 第37-40页 |
| ·PCR扩增Bt Recql~T与Bt Recql~(TM)编码序列 | 第37-38页 |
| ·表达载体构建 | 第38-40页 |
| ·重组蛋白的表达与纯化 | 第40页 |
| ·讨论 | 第40-42页 |
| 第三章 BtRECQL~(TM)理化性质分析 | 第42-48页 |
| ·材料 | 第42-43页 |
| ·DNA底物及蛋白样品 | 第42页 |
| ·配制主要试剂 | 第42-43页 |
| ·使用的主要仪器设备 | 第43页 |
| ·实验方法 | 第43-44页 |
| ·动态光散射分析BtRECQLTM | 第43-44页 |
| ·BtRECQLTM DNA结合活性测定 | 第44页 |
| ·结论 | 第44-46页 |
| ·动态光散射观测BtRECQLTM的聚集状态 | 第44-45页 |
| ·BtRECQL~(TM) DNA结合活性分析 | 第45-46页 |
| ·讨论 | 第46-48页 |
| 第四章 BtRECQL解旋条件优化及解旋活性比较 | 第48-60页 |
| ·材料 | 第48-49页 |
| ·DNA底物及蛋白样品 | 第48页 |
| ·配制主要试剂 | 第48-49页 |
| ·使用的主要仪器设备 | 第49页 |
| ·实验方法 | 第49-51页 |
| ·BtRECQL蛋白浓度对解旋活性的影响 | 第49-50页 |
| ·反应Buffer成分对BtRECQL解旋活性的影响 | 第50页 |
| ·ATP浓度对解旋活性的影响 | 第50-51页 |
| ·孵育温度对解旋活性的影响 | 第51页 |
| ·BtRECQL解旋活性比较 | 第51页 |
| ·结论 | 第51-58页 |
| ·BtRECQL蛋白浓度对解旋活性的影响 | 第51-52页 |
| ·反应Buffer成分对BtRECQL解旋活性的影响 | 第52-55页 |
| ·ATP浓度对BtRECQL解旋活性的影响 | 第55-56页 |
| ·孵育温度对BtRECQL解旋活性的影响 | 第56页 |
| ·BtRECQL全长及突变体蛋白解旋活性比较 | 第56-58页 |
| ·讨论 | 第58-60页 |
| 第五章 结论 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-69页 |
| 附录 | 第69-70页 |
| 缩略词 | 第70-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 作者简介 | 第72页 |
