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猪伪狂犬病病毒HeN1株全基因组测序与病毒遗传变异分析

摘要第1-6页
Abstract第6-11页
英文缩略表第11-13页
第一章 引言第13-19页
   ·猪伪狂犬病的发生、发展历史第13-14页
   ·猪伪狂犬病病毒的生物学特征第14-17页
     ·猪伪狂犬病病毒的分子生物学特性第14-15页
     ·猪伪狂犬病病毒的培养特性第15-16页
     ·猪伪狂犬病病毒的感染特性第16页
     ·猪伪狂犬病病毒的临床症状和病理变化第16-17页
   ·猪伪狂犬病病毒的血清和基因分型第17页
   ·诊断和疫苗研究第17-18页
   ·研究目的及意义第18-19页
第二章 PRV HeN1株全基因组测序和注释及其插入缺失特征的验证第19-28页
   ·材料和方法第19-22页
     ·病毒和细胞第19页
     ·菌株、试剂与载体第19页
     ·主要设备仪器第19-20页
     ·病毒基因组DNA的提取及纯化第20页
     ·引物设计第20-21页
     ·病毒基因组分段PCR扩增第21页
     ·感受态细胞的制备第21-22页
     ·PCR产物的回收、克隆和测序第22页
     ·测序结果拼接和基因组注释第22页
     ·在中国其他毒株上验证He N1特异插入缺失区域第22页
   ·结果第22-26页
     ·病毒基因组DNA琼脂糖凝胶电泳第22-23页
     ·基因组序列分段PCR扩增结果第23-25页
     ·PRV HeN1全基因组序列的获得第25页
     ·PRV HeN1基因注释第25页
     ·在中国其他毒株上验证He N1特异插入缺失区域第25-26页
   ·讨论第26-28页
第三章 以HeN1为代表的中国PRV毒株与国外毒株的比较基因组分析第28-42页
   ·材料和方法第28-30页
     ·毒株序列第28页
     ·中国毒株与国外毒株全基因组水平差异比较第28页
     ·HeN1株和欧美毒株的蛋白编码序列比较分析第28-29页
     ·HeN1与Kaplan、Becker、Bartha、JS、TJ和BJ/YT差异氨基酸的比较分析第29页
     ·中国毒株与国外参考毒株之间微卫星序列(SSR)的比较分析第29页
     ·PRV和HSV-1 编码蛋白的变异性比较第29页
     ·限制性片段长度多态性分析(RFLP)第29-30页
     ·PRV遗传进化分析第30页
     ·PRV Bartha和HeN1株间的交叉中和实验第30页
   ·结果第30-39页
     ·中国毒株与国外毒株全基因组水平差异比较第30-32页
     ·国内外PRV毒株相应的各蛋白编码序列间有显著的氨基酸变异第32-34页
     ·SSR在中国毒株与国外参考毒株之间的比较分析第34-35页
     ·PRV和HSV-1 所编码的蛋白在毒株间的变异性比较第35页
     ·PRV的基因分型第35-38页
     ·伪狂犬病病毒的进化速率第38页
     ·Bartha和HeN1免疫猪产生的抗血清对这两株病毒的交叉保护力研究第38-39页
   ·讨论第39-42页
第四章 猪伪狂犬病病毒HeN1株感染和毒力相关基因的变异特征分析第42-52页
   ·材料和方法第42页
     ·序列信息第42页
     ·PRV感染和毒力相关基因的比对分析第42页
     ·PRV序列的进化树分析第42页
   ·结果第42-50页
     ·HeN1与国内外参考株的各相关基因核苷酸同源性比较第42-43页
     ·PRV感染和毒力相关蛋白的变异特征第43-44页
     ·PRV各基因进化树分析第44-50页
   ·讨论第50-52页
第五章 全文结论第52-53页
参考文献第53-59页
附录第59-101页
 附录表S1分段扩增HeN1全基因组的引物第59-64页
 附录表S2 HeN1株与国内外毒株Kaplan、Bartha、Becker、BJ/YT、TJ和JS蛋白编码差异比较表第64-77页
 附录表S3国外毒株Kaplan、Bartha和Becker与HeN1相比各蛋白变异氨基酸数量表第77-79页
 附录表S4 PRV和HSV-1 基于贝叶斯算法估算得到替换率和各自毒株间最近分化时间第79-81页
 附录图S1所有PRV毒株基于66个基因构建的的进化树第81-101页
致谢第101-102页
作者简历第102页

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