| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 第一章 前言 | 第9-18页 |
| ·HPV的分子生物学特征 | 第9-10页 |
| ·现有的HPV预防性疫苗 | 第10页 |
| ·目前HPV治疗性疫苗的类型及研究现状 | 第10-15页 |
| ·抗原肽/蛋白疫苗 | 第11-12页 |
| ·活载体疫苗 | 第12-13页 |
| ·DNA疫苗 | 第13页 |
| ·细胞疫苗 | 第13-14页 |
| ·疫苗临床试验进展 | 第14-15页 |
| ·乙型肝炎病毒核心抗原(HBcAg)病毒样颗粒疫苗载体 | 第15-16页 |
| ·本课题主要研究内容、目的及意义 | 第16-18页 |
| ·研究内容 | 第16页 |
| ·研究目的及意义 | 第16-18页 |
| 第二章 材料与方法 | 第18-36页 |
| ·实验材料 | 第18-21页 |
| ·菌株、质粒及细胞株 | 第18页 |
| ·实验动物 | 第18页 |
| ·实验试剂用品 | 第18-19页 |
| ·主要仪器设备 | 第19-20页 |
| ·序列合成及测定 | 第20-21页 |
| ·实验方法 | 第21-36页 |
| ·HPV16 E6、E7的CTL抗原表位寡核苷酸序列的合成 | 第21页 |
| ·重组表达质粒NP-A、NP-B1、NP-B4、NP-B8的构建 | 第21-26页 |
| ·重组质粒的诱导表达及可溶性鉴定 | 第26-27页 |
| ·病毒样颗粒的纯化 | 第27-28页 |
| ·病毒样颗粒的鉴定 | 第28页 |
| ·病毒样颗粒的浓度测定 | 第28-29页 |
| ·肿瘤细胞培养 | 第29-30页 |
| ·小鼠HPV16移植肿瘤模型的建立 | 第30页 |
| ·病毒样颗粒的免疫效果评价实验 | 第30-32页 |
| ·小鼠全血血清制备 | 第32页 |
| ·体外脾细胞的抗原肽刺激 | 第32页 |
| ·ELISA检测细胞因子的表达 | 第32-33页 |
| ·ELISPOT检测分泌IFN-γ的T细胞的水平 | 第33-34页 |
| ·流式细胞术检测CTL细胞水平 | 第34-36页 |
| 第三章 结果 | 第36-61页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第36页 |
| ·重组质粒的诱导表达及蛋白可溶性鉴定 | 第36-37页 |
| ·目的蛋白的纯化 | 第37-39页 |
| ·硫酸铵盐析法初步纯化重组蛋白 | 第37-38页 |
| ·蔗糖密度梯度离心进一步纯化目的蛋白 | 第38-39页 |
| ·病毒样颗粒的鉴定 | 第39-40页 |
| ·病毒样颗粒的HPLC分析 | 第39页 |
| ·病毒样颗粒的电镜观察 | 第39-40页 |
| ·混合VLP免疫对小鼠肿瘤模型干预实验研究 | 第40-42页 |
| ·病毒样颗粒体内的免疫效果评价 | 第40-41页 |
| ·经VLPs免疫后小鼠抗原特异细胞免疫应答分析 | 第41页 |
| ·经VLPs免疫后小鼠血清IFN-γ水平分析 | 第41-42页 |
| ·预防性策略评价VLPs疫苗对小鼠肿瘤模型干预实验研究 | 第42-44页 |
| ·病毒样颗粒治疗性疫苗对小鼠肿瘤生长的影响 | 第42-43页 |
| ·预防性策略小鼠抗原特异细胞免疫应答分析 | 第43-44页 |
| ·治疗性策略评价B4疫苗不同免疫途径与疫苗结构形式对小鼠肿瘤的干预 | 第44-51页 |
| ·NP-B4疫苗不同形式及不同免疫途径对小鼠肿瘤生长的影响 | 第45-46页 |
| ·NP-B4疫苗不同形式及不同免疫途径的抗原特异细胞免疫应答分析 | 第46-51页 |
| ·评价B4治疗性疫苗不同剂量对肿瘤负荷5-9mm的小鼠肿瘤模型的影响 | 第51-53页 |
| ·评价B4治疗性疫苗引起的免疫应答的持续性 | 第53-57页 |
| ·评价预存抗载体抗体对B4-VLPs疫苗免疫效果的影响 | 第57-61页 |
| 第四章 讨论 | 第61-65页 |
| ·VLPs疫苗的设计 | 第61页 |
| ·VLPs疫苗的质量控制 | 第61-62页 |
| ·VLPs疫苗对小鼠肿瘤干预潜能 | 第62-63页 |
| ·免疫效应机制评价 | 第63-64页 |
| ·VLPs载体免疫特点 | 第64-65页 |
| 第五章 结论与展望 | 第65-66页 |
| ·结论 | 第65页 |
| ·展望 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-70页 |
| 附录 | 第70-75页 |
| 附录Ⅰ 英文缩写词 | 第70-71页 |
| 附录Ⅱ 主要溶液的配制 | 第71-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |
| 作者简历 | 第76-77页 |
