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膀胱癌相关microRNA异常表达和DNA拷贝数变化及其生物医学意义的研究

英文缩略词第1-11页
摘要第11-13页
ABSTRACT第13-15页
第一章 导论(含文献综述)第15-27页
 1、膀胱癌概述第15-16页
 2、膀胱癌相关分子通路研究第16-20页
   ·PI3K通路的激活第16-17页
   ·MAPK通路的激活第17-18页
   ·Hedgehog与WNT通路的激活第18-19页
   ·膀胱癌的细胞周期调控蛋白第19页
   ·膀胱癌血管生成通路的激活第19-20页
 3、microRNA与膀胱癌第20-22页
   ·microRNA与膀胱癌的发生发展第20-22页
   ·microRNA作为膀胱癌分子标志物第22页
 4、基因组DNA区段改变与膀胱癌第22-26页
   ·基因组DNA区段改变与膀胱癌的发生发展第22-24页
   ·基因组DNA区段改变作为膀胱癌分子标志物第24-25页
   ·人种差异对筛选基因组DNA区段改变作为肿瘤分子标志物的影响第25-26页
 5、本课题的研究目的和研究策略第26-27页
第二章 膀胱癌肌层浸润相关microRNA异常表达及生物医学意义(结果与讨论)第27-58页
 第1节 非肌层浸润性与肌层浸润性膀胱癌膀胱癌差异表达miRNA筛选与验证第27-40页
   ·非肌层浸润性与肌层浸润性膀胱癌差异表达miRNA的初步筛选及Real-timePCR验证第27-33页
   ·以Real-time PCR对“起始样本”筛选出的7个miRNA进行“独立样本”验证第33-36页
   ·讨论第36-40页
     ·非肌层浸润性和肌层浸润性膀胱癌组织中的差异表达miRNA第36-37页
     ·非肌层浸润性和肌层浸润性膀胱癌之间差异表达miRNA的功能预测及意义第37-40页
 第2节 非肌层浸润性与肌层浸润性膀胱癌差异表达miRNA hsa-miR-199a-3p的功能分析第40-48页
   ·非浸润性与浸润性膀胱癌差异表达miRNA hsa-miR-199a-3p的靶基因预测及实验验证第40-42页
   ·hsa-miR-199a-3p及其靶基因SGK2对膀胱癌细胞体外增殖的影响第42-45页
   ·讨论第45-48页
     ·hsa-miR-199-3p及其靶基因可能参与的分子通路和意义第45-47页
     ·SGK2基因基本信息第47-48页
 第3节 非肌层浸润性与肌层浸润性膀胱癌组织差异表达miRNA在尿液中的水平及其意义第48-57页
   ·候选miRNA能否“释放”进入体液的实验验证第48-49页
   ·在膀胱癌患者尿上清样品中检测候选miRNA第49-51页
   ·术前尿游离miRNA与影像学检查联合鉴别诊断肌层浸润性和非浸润性膀胱癌第51-54页
   ·讨论第54-57页
     ·游离miRNA与恶性肿瘤第54-55页
     ·膀胱癌相关游离miRNA筛选与检测第55-56页
     ·作为分子标志物的miRNA与影像学联合诊断分析及意义第56-57页
 本章小结第57-58页
第三章 5个膀胱癌相关基因片段DNA拷贝数变化及其意义(结果与讨论)第58-64页
 1、实验结果第58-62页
   ·待测基因片段DNA拷贝数的人种间差异第58-59页
   ·待测基因片段DNA拷贝数异常是否为膀胱癌特征性的改变第59-60页
   ·待测基因片段拷贝数异常是否为汉族膀胱癌患者特征性的遗传改变第60-62页
 2、讨论第62-63页
 本章小结第63-64页
第四章 材料与方法第64-92页
 1. 主要实验材料及对象第64-78页
   ·临床病例信息与标本第64-67页
   ·细胞系第67-68页
   ·菌株及质粒载体第68-69页
   ·主要引物第69-70页
   ·主要试剂第70-74页
   ·常用试剂的配制第74-77页
   ·主要检测仪器第77-78页
   ·主要统计分析软件第78页
 2. 实验方法第78-92页
   ·总RNA提取第79页
   ·DNA提取与质量鉴定第79-80页
   ·RNA逆转录第80-81页
   ·PCR反应第81-83页
   ·重组质粒(psiCHECK2-SGK2-3’UTR)构建相关方法第83-87页
   ·细胞生物学方法第87-89页
   ·Luciferase双荧光报告基因检测系统第89页
   ·CCK8实验第89页
   ·Western blot分析第89-91页
   ·统计学分析方法第91-92页
附图、表第92-94页
参考文献第94-109页
基金资助第109-110页
致谢第110-113页
个人简历第113页

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