| 中文摘要 | 第1-3页 |
| Abstract | 第3-4页 |
| 中文文摘 | 第4-7页 |
| 绪论 | 第7-15页 |
| 第一节 微生物脂肪酶分类 | 第7-9页 |
| ·微生物脂肪酶的分类 | 第7-8页 |
| ·重要微生物脂肪酶资源 | 第8-9页 |
| 第二节 新型微生物脂肪酶的开发 | 第9-12页 |
| ·借助宏基因组技术挖掘极端环境中的脂肪酶资源 | 第9-11页 |
| ·借助蛋白质工程技术改造现有脂肪酶获得新型脂肪酶突变体 | 第11页 |
| ·借助生物信息技术从全基因组DNA序列中挖掘新型脂肪酶 | 第11-12页 |
| 第三节 Burkholderia cepacia脂肪酶 | 第12-15页 |
| ·Burkholderia cepacia胞外脂肪酶 | 第12-13页 |
| ·Burkholderia cepacia细胞结合脂肪酶 | 第13-15页 |
| 第一章 细胞结合脂肪酶LipC24基因的克隆、表达、酶学性质及结构预测 | 第15-43页 |
| 第一节 实验材料和方法 | 第15-28页 |
| ·实验材料 | 第15-19页 |
| ·实验方法 | 第19-28页 |
| 第二节 实验结果 | 第28-40页 |
| ·伯克霍尔德菌基因组提取 | 第28-29页 |
| ·lipC24基因扩增结果 | 第29页 |
| ·氨基酸序列比对 | 第29-30页 |
| ·LipC24三级结构模型的预测及其重要氨基酸残基的定位 | 第30页 |
| ·重组表达载体pACYC-lipC24/lipB的构建 | 第30-34页 |
| ·标准曲线的制作 | 第34-35页 |
| ·重组脂肪酶LipC24的分离纯化 | 第35-37页 |
| ·Burkholderia sp.ZYB002胞外脂肪酶LipC24的酶学性质 | 第37-40页 |
| ·定点突变验证重组脂肪酶LipC24三级结构模拟模型 | 第40页 |
| 第三节 小结与讨论 | 第40-43页 |
| 第二章 lipC21基因的克隆、表达、纯化及其酶学性质分析 | 第43-61页 |
| 第一节 材料和方法 | 第43-49页 |
| ·实验材料 | 第43-45页 |
| ·实验方法 | 第45-49页 |
| 第二节 实验结果 | 第49-59页 |
| ·伯克霍尔德菌基因组提取 | 第49页 |
| ·lipC21基因PCR扩增 | 第49-50页 |
| ·氨基酸序列比对 | 第50-52页 |
| ·LipC21三级结构模型的构建 | 第52页 |
| ·重组表达载体pET28a-lipC21的构建 | 第52-54页 |
| ·重组表达载体pACYC-lipC21/lipB的构建 | 第54-56页 |
| ·SDS-PAGE以及Western结果 | 第56-57页 |
| ·重组蛋白LipC21的分离纯化 | 第57-58页 |
| ·LipC21与伴侣蛋白LipB的体外复性 | 第58-59页 |
| 第三节 小结与讨论 | 第59-61页 |
| 第三章 结论与展望 | 第61-63页 |
| 参考文献 | 第63-71页 |
| 攻读学位期间承担的科研任务与主要成果 | 第71-73页 |
| 致谢 | 第73-75页 |
| 个人简历 | 第75-78页 |
