| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 1 引言 | 第9-20页 |
| ·植物蛋氨酸亚砜还原酶(Msr)的研究 | 第9-11页 |
| ·Msr的生物学功能 | 第9页 |
| ·蛋氨酸的氧化与还原 | 第9-10页 |
| ·Msr的类型 | 第10-11页 |
| ·Msr的催化机制 | 第11页 |
| ·病毒侵染诱导叶绿体中活性氧的产生 | 第11-14页 |
| ·植物体内活性氧的产生 | 第11-12页 |
| ·活性氧对植物的影响 | 第12-13页 |
| ·植物体内活性氧的清除 | 第13页 |
| ·PRSV感染导致了番木瓜植株体内ROS的积累 | 第13-14页 |
| ·NIa-Pro与番木瓜蛋氨酸亚砜还原酶B1(PaMs-1)互作的研究 | 第14-17页 |
| ·番木瓜环斑病毒 | 第14-15页 |
| ·NIa-Pro生物学功能 | 第15-16页 |
| ·与Potyviruses病毒编码蛋白互作的植物叶绿体相关蛋白 | 第16-17页 |
| ·植物MsrB1的研究 | 第17-19页 |
| ·PaMsrB1的结构与功能 | 第17-18页 |
| ·MsrB1参与的叶绿体抗氧化防护 | 第18-19页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第19页 |
| ·技术路线 | 第19-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-38页 |
| ·材料 | 第20-25页 |
| ·植物来源 | 第20页 |
| ·菌株 | 第20页 |
| ·载体及其图谱 | 第20-22页 |
| ·主要试剂 | 第22页 |
| ·主要仪器 | 第22-23页 |
| ·引物 | 第23页 |
| ·主要培养基与溶液 | 第23-25页 |
| ·方法 | 第25-38页 |
| ·PaMsrB1基因的克隆 | 第25-28页 |
| ·毕赤酵母真核表达载体的构建 | 第28-33页 |
| ·大肠杆菌原核表达载体的构建 | 第33-36页 |
| ·重组蛋白PaMsrB1活性的检测 | 第36-38页 |
| 3 结果与分析 | 第38-56页 |
| ·PaMsrB1基因的克隆 | 第38-39页 |
| ·菌液PCR鉴定及测序 | 第38-39页 |
| ·重组蛋白PaMsrB1的真核表达及纯化 | 第39-43页 |
| ·重组质粒pGAPZa-B1双酶切鉴定 | 第39-40页 |
| ·重组质粒pGAPZa-B1线性化 | 第40-41页 |
| ·重组质粒pGAPZa-B1电转GS115后菌液PCR | 第41页 |
| ·毕赤酵母重组蛋白PaMsrB1的表达、纯化及定量 | 第41-43页 |
| ·毕赤酵母重组蛋白PaMsrB1 Western blot检测 | 第43页 |
| ·重组蛋白PaMsrB1的原核表达、纯化和复性 | 第43-50页 |
| ·重组质粒pET28-B1双酶切鉴定 | 第43-44页 |
| ·重组质粒pET28-B1转表达菌BL21(DE3)后菌液PCR | 第44-45页 |
| ·大肠杆菌重组蛋白PaMsrB1诱导表达条件的优化 | 第45-48页 |
| ·大肠杆菌重组蛋白PaMsrB1的表达、纯化和复性 | 第48-49页 |
| ·大肠杆菌重组蛋白PaMsrB1的Western blot检测 | 第49-50页 |
| ·重组蛋白PaMsrB 1的活性检测 | 第50-56页 |
| ·H_2O_2氧化胁迫实验 | 第50-52页 |
| ·薄层层析实验 | 第52-54页 |
| ·反相高效液相色谱 | 第54-56页 |
| 4 讨论 | 第56-60页 |
| ·重组蛋白PaMsrB1的表达与活性分析 | 第56-57页 |
| ·PRSV-NIa-Pro蛋白质中易被ROS氧化的Met | 第57-59页 |
| ·PaMsrB1中NIa-Pro蛋白酶酶切位点的排除 | 第59-60页 |
| 5 结论 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
