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柞蚕肠道好氧细菌的鉴定及α-淀粉酶基因的克隆与表达分析

摘要第1-11页
Abstract第11-12页
第一章 绪论第12-20页
   ·柞蚕的组织结构及生理功能第12页
   ·昆虫肠道微生物的研究现状第12-15页
   ·昆虫肠道微生物的功能第15-17页
     ·肠道微生物为昆虫提供营养物质第15-16页
     ·肠道微生物参与昆虫体内氮循环第16页
     ·肠道微生物参与降解大分子难溶物质第16页
     ·肠道微生物影响宿主昆虫的抵抗力及免疫力第16页
     ·其它作用第16-17页
   ·昆虫肠道微生物的研究方法第17-18页
     ·传统分类鉴定方法第17页
     ·分子生物学方法第17-18页
   ·α-淀粉酶研究进展第18-19页
   ·本文研究内容及意义第19-20页
第二章 柞蚕卵内好氧细菌的分离鉴定第20-25页
   ·试验材料第20-21页
     ·供试材料第20页
     ·药品试剂第20-21页
     ·仪器设备第21页
   ·试验方法第21-22页
     ·柞蚕卵内细菌培养第21页
     ·柞蚕卵内细菌生理生化试验第21页
     ·柞蚕卵内细菌16S rDNA序列扩增及序列分析第21-22页
   ·结果与分析第22-24页
     ·菌株的形态及生理生化鉴定第22-23页
     ·细菌的16S rDNA基因扩增及系统进化分析第23-24页
   ·讨论第24-25页
第三章 柞蚕幼虫肠道好氧细菌的分离及鉴定第25-35页
   ·材料第25-26页
     ·试验昆虫第25页
     ·试剂及设备第25页
     ·试剂配制第25-26页
     ·培养基配制第26页
   ·试验方法第26-27页
     ·柞蚕幼虫肠道细菌分离及鉴定方法第26-27页
     ·不同龄期柞蚕幼虫肠道细菌分离鉴定第27页
   ·结果与分析第27-33页
     ·不同培养基分离菌株及生理生化鉴定第27-29页
     ·细菌菌株的ARDRA鉴定第29页
     ·细菌菌株16S rDNA序列的系统进化分析第29-30页
     ·不同龄期柞蚕幼虫肠道细菌的分离鉴定第30-33页
   ·讨论第33-35页
第四章 柞蚕幼虫肠道纤维素降解菌筛选与产酶特性的相关研究第35-41页
   ·材料第35-36页
     ·试验材料第35页
     ·试验相关试剂及培养基的配制第35-36页
     ·仪器设备第36页
   ·试验方法第36-37页
     ·纤维素分解细菌的筛选第36页
     ·纤维素酶液的制备第36页
     ·纤维素酶活性的测定第36-37页
     ·培养条件对酶活力的影响第37页
   ·结果与分析第37-39页
     ·纤维素分解菌的初筛第37-38页
     ·影响纤维素酶活性因素第38-39页
   ·讨论第39-41页
第五章 柞蚕α-淀粉酶基因的克隆与表达分析第41-52页
   ·材料第41-42页
     ·试验材料第41页
     ·试验试剂第41-42页
     ·主要仪器设备第42页
   ·试验方法第42-45页
     ·柞蚕总RNA提取及检测第42页
     ·cDNA的合成第42-43页
     ·柞蚕α-淀粉酶基因的扩增第43页
     ·PCR产物的连接与转化第43-44页
     ·序列分析第44页
     ·系统进化分析第44页
     ·人工添食柞蚕微孢子虫第44-45页
     ·微孢子虫诱导后柞蚕中肠组织的cDNA制备第45页
     ·半定量RT-PCR检测柞蚕α-淀粉酶基因表达第45页
     ·实时荧光定量PCR检测微孢子虫诱导后柞蚕α-淀粉酶基因表达量的变化第45页
   ·结果与分析第45-50页
     ·柞蚕RNA的提取及检测第45-46页
     ·Apα-amy基因的扩增第46页
     ·α-淀粉酶基因的序列分析第46-47页
     ·α-淀粉酶的序列同源比列及系统进化分析第47-49页
     ·柞蚕α-淀粉酶基因组织表达谱分析第49页
     ·微孢子虫诱导后α-淀粉酶基因的表达量变化分析第49-50页
   ·讨论第50-52页
结论第52-53页
参考文献第53-59页
致谢第59-60页
攻读硕士学位期间发表文章第60页

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