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西尼罗病毒免疫诊断方法的建立及对入境人员的血清调查

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-7页
缩略语第7-11页
1 前言第11-17页
2 材料与方法第17-33页
   ·材料与试剂第17-21页
     ·材料第17页
     ·试剂第17-19页
     ·溶液配制第19页
     ·主要仪器设备第19-21页
   ·试验方法第21-31页
     ·筛选典型西尼罗病毒株 NY99-crow-V76/1第21页
     ·重组质粒 PCDNA5-WNV-JME 的构建第21-22页
       ·质粒的制备第22-24页
     ·293T 细胞培养和重组质粒瞬时转染 293T 细胞第24-27页
     ·构建的重组质粒瞬时转染 293T 细胞第27-28页
     ·大规模构建的重组质粒瞬时转染 293T 细胞第28页
     ·重组蛋白的表达鉴定第28-29页
     ·重组蛋白的纯化第29-31页
     ·试剂盒的评价第31页
   ·血清学检测第31-33页
     ·自制试剂盒检测入境人员血清第31-32页
     ·FocusWNV-IgG 检测试剂盒检测入境人员血清第32页
     ·Panbio 捕获 ELISA 检测登格 IgG 试剂盒检测 WNV 抗体阳性血清第32-33页
3 结果与分析第33-51页
   ·筛选典型西尼罗病毒株 NY99-crow-V76/1第33-34页
   ·重组质粒 PCDNA5-WNV-JME 的构建第34-36页
     ·融合 PCR 扩增 WNV-JME 基因片段第34-35页
     ·pCDNA5-WNV-JME 重组质粒的鉴定第35-36页
   ·重组蛋白的表达鉴定及纯化第36-38页
     ·间接免疫荧光试验第36-37页
     ·表达产物纯化第37-38页
   ·间接 ELISA 法第38-39页
   ·检测西尼罗病毒抗体的间接 ELISA 方法的建立第39-41页
     ·封闭液的选择第39页
     ·样品稀释液的选择第39-40页
     ·临界值的确定第40-41页
   ·检测西尼罗病毒抗体的间接 ELISA 方法的评估第41-43页
     ·敏感性与特异性实验第41-42页
     ·重复性与稳定性实验第42页
     ·血清样本初步检测第42-43页
   ·入境人员血清调查第43-51页
     ·血清样本信息第43-45页
     ·重组蛋白包被 ELISA-Lab 与 FOCUS WNV IgG 检测试剂盒检测结果第45页
     ·利用 Dengue IgG Capture ELISA 试剂盒进一步筛选检测样品盘第45-47页
     ·抗体阳性率分布情况第47-51页
4 讨论第51-57页
5 结论第57-58页
参考文献第58-64页
附图表第64-66页
致谢第66-67页
攻读学位期间发表的学术论文目录第67-68页

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