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大豆kunitz型胰蛋白酶抑制剂MALDITOF分析方法研究

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-8页
1 前言第8-20页
   ·大豆及蛋白质组学的基本概述第8-9页
     ·大豆的形态分布第8页
     ·大豆蛋白质组学研究进展第8-9页
   ·转基因大豆及生物安全国内外进展第9-11页
     ·转基因大豆的国内外发展现状第9-10页
     ·转基因大豆的安全性评价第10-11页
   ·大豆胰蛋白酶抑制剂第11-15页
     ·大豆胰蛋白酶抑制剂的抗营养作用机制第12页
     ·大豆胰蛋白酶抑制剂的理化性质第12-15页
   ·胰蛋白酶抑制剂的提取、纯化和检测方法第15-17页
     ·胰蛋白酶抑制剂的提取纯化方法第15-16页
     ·胰蛋白酶抑制剂的检测方法第16-17页
   ·蛋白酶抑制剂的生理功能和应用第17-18页
     ·内源性蛋白酶调节因子第17页
     ·抗虫性第17-18页
     ·抗癌、抗炎等作用及相关医药应用第18页
   ·本课题研究意义及研究内容第18-20页
2 材料与方法第20-29页
   ·实验药品第20页
   ·实验仪器第20-21页
   ·实验原料第21页
   ·实验试剂配制第21-24页
   ·大豆中kunitz型胰蛋白酶抑制剂粗提物的制备第24页
   ·大豆kunitz型胰蛋白酶抑制剂的分离纯化第24-25页
     ·大豆kunitz型胰蛋白酶抑制剂的凝胶过滤层析纯化第24页
     ·大豆kunitz型胰蛋白酶抑制剂的亲和层析纯化第24-25页
   ·蛋白质浓度测定第25-26页
   ·大豆中kunitz型胰蛋白酶抑制剂活性测定第26页
   ·十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测第26-28页
   ·蛋白质分析第28页
   ·基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)检测第28-29页
3 结果与讨论第29-62页
   ·蛋白质标准曲线的制作第29-30页
   ·大豆kunitz型胰蛋白酶抑制剂粗提物的制备第30页
   ·大豆kunitz型胰蛋白酶抑制剂的分离纯化第30-36页
     ·非转基因大豆kunitz型胰蛋白酶抑制剂的分离纯化第30-33页
     ·转基因大豆kunitz型胰蛋白酶抑制剂的分离纯化第33-36页
   ·大豆中kunitz型胰蛋白酶抑制剂活性测定第36-37页
   ·SDS-PAGE检测第37-38页
   ·大kunitz型胰蛋白酶抑制剂MALDI-TOF-MS测定分析第38-62页
     ·样品制备方法第38-41页
     ·MALDI-TOF-MS基质的选择及酶解条件的确定第41-42页
     ·基质峰和蛋白酶酶自解峰的测定第42-44页
     ·胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶酶解肽段测定方法的比较第44-48页
     ·非转基因大豆kunitz型胰蛋白酶抑制剂的测定分析第48-57页
     ·转基因大豆kunitz型胰蛋白酶抑制剂的测定分析第57-62页
4 结论第62-63页
5 展望第63-64页
6 参考文献第64-70页
7 论文发表状况第70-71页
8 致谢第71页

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