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拟南芥GSNOR1功能缺失影响生长素的信号传导和极性运输

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-12页
缩略词第12-13页
第一章 文献综述第13-26页
 1 一氧化氮的研究进展第13-18页
   ·一氧化氮的合成途径第13-14页
   ·一氧化氮的生理作用第14-16页
   ·亚硝基化作用第16-18页
 2 生长素在国内外的研究进展第18-23页
   ·生长素在植物体内的合成第18-19页
   ·生长素在植物体内的极性运输第19-21页
   ·生长素在植物体内的信号传导第21-23页
 3 一氧化氮和生长素相互作用调控植物的生长发育第23-24页
 4 本研究的目的及科学意义第24-26页
第二章 实验材料与方法第26-47页
 1 实验材料第26-27页
   ·植物材料第26页
   ·菌种第26页
   ·实验试剂和仪器第26-27页
 2 实验方法第27-47页
   ·拟南芥培养第27页
   ·突变体与野生型表型图片的采集第27-28页
   ·拟南芥侧根数目的统计第28页
   ·拟南芥根长和下胚轴长度统计第28-29页
   ·拟南芥株高和分蘖数目统计第29页
   ·生长素诱导侧根的形成第29页
   ·拟南芥转基因株系的创制第29-30页
   ·提取拟南芥RNA第30-31页
   ·合成拟南芥cDNA第31-32页
   ·PCR扩增目的基因第32-33页
   ·割胶回收第33-34页
   ·PCR产物纯化第34页
   ·载体的构建第34-35页
   ·酶切第35页
   ·连接第35-36页
   ·制备大肠杆菌(JM109)感受态第36页
   ·转化大肠杆菌(JM109)第36-37页
   ·阳性克隆鉴定、测序及结果分析第37-38页
     ·PCR鉴定第37页
     ·菌液鉴定第37页
     ·酶切鉴定第37-38页
     ·阳性克隆测序及结果分析第38页
   ·质粒提取第38-39页
   ·生长素和GSNO处理拟南芥第39-41页
     ·生长素诱导侧根形成第39页
     ·生长素处理Col-0/DR5-GUS和gsnor1-3/DR5-GUS第39-40页
     ·生长素和GSNO只处理Col-0/DR5-GUS第40页
     ·生长素处理Col-0/HS-AXR3-GUS和gsnor1-3/HS-AXR3.GUS第40-41页
     ·生长素和GSNO共同处理Col-0/HS-AXR3-GUS第41页
   ·拟南芥根尖GUS染色第41-42页
     ·1×GUS染液配制第41-42页
     ·GUS染色第42页
   ·拟南芥杂交第42-43页
   ·拟南芥根尖GFP荧光强度观察第43页
   ·拟南芥根尖免疫定位分析第43-44页
     ·组织固定第43页
   ·4.2 组织渗透第43-44页
     ·加一抗第44页
     ·加二抗第44页
   ·拟南芥根重力刺激分析第44-45页
   ·不同PIN基因的荧光定量分析第45-47页
     ·引物设计第45页
   ·6.2 荧光定理PCR扩增第45-47页
第三章 结果与分析第47-65页
 1 拟南芥GSNOR1功能缺失导致生长素相关的表型缺陷第47-49页
 2 gsnor1-3体内生长素合成水平正常第49-51页
   ·拟南芥yuc1D不能恢复gsnor1-3的表型第49-50页
   ·Col-0和gsnor1-3体内生长素含量相当第50-51页
 3 gsnor1-3对生长素的敏感性降低第51-59页
   ·DR5-GUS和DR5-GFP在gsnor1-3中表达量降低第51-53页
   ·外源GSNO具抑制DR5-GUS在野生型幼苗根部积累的效应第53-54页
   ·gsnor1-3突变体中侧根的形成受到抑制第54-55页
   ·gsnor1-3中IAA介导的HT-AXR3NT-GUS降解速率减慢第55-56页
   ·GSNO抑制HS:AXR3NT-GUS的降解第56-58页
   ·SCF~(TIR1)蛋白复合体的组装并没有受到损坏第58-59页
 4 生长素的极性运输在gsnor1-3中受到抑制第59-64页
   ·生长素在gsnor1-3中的极性运输水平较Col-0降低第59-60页
   ·gsnor1-3中生长素输出载体蛋白PINs的积累水平明显降低第60-64页
 5 gsnor1-3中向地性反应受到影响第64-65页
第四章 讨论第65-69页
参考文献第69-81页
附录第81-84页
 1 实验常用抗生素、生长素及药品母液配制方法第81页
 2 常用培养基的配制第81-82页
 3 常见试剂和缓冲液配制方法第82-84页
致谢第84-85页
攻读硕士学位期间发表的学论第85-86页

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