摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-12页 |
缩略词 | 第12-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-26页 |
1 一氧化氮的研究进展 | 第13-18页 |
·一氧化氮的合成途径 | 第13-14页 |
·一氧化氮的生理作用 | 第14-16页 |
·亚硝基化作用 | 第16-18页 |
2 生长素在国内外的研究进展 | 第18-23页 |
·生长素在植物体内的合成 | 第18-19页 |
·生长素在植物体内的极性运输 | 第19-21页 |
·生长素在植物体内的信号传导 | 第21-23页 |
3 一氧化氮和生长素相互作用调控植物的生长发育 | 第23-24页 |
4 本研究的目的及科学意义 | 第24-26页 |
第二章 实验材料与方法 | 第26-47页 |
1 实验材料 | 第26-27页 |
·植物材料 | 第26页 |
·菌种 | 第26页 |
·实验试剂和仪器 | 第26-27页 |
2 实验方法 | 第27-47页 |
·拟南芥培养 | 第27页 |
·突变体与野生型表型图片的采集 | 第27-28页 |
·拟南芥侧根数目的统计 | 第28页 |
·拟南芥根长和下胚轴长度统计 | 第28-29页 |
·拟南芥株高和分蘖数目统计 | 第29页 |
·生长素诱导侧根的形成 | 第29页 |
·拟南芥转基因株系的创制 | 第29-30页 |
·提取拟南芥RNA | 第30-31页 |
·合成拟南芥cDNA | 第31-32页 |
·PCR扩增目的基因 | 第32-33页 |
·割胶回收 | 第33-34页 |
·PCR产物纯化 | 第34页 |
·载体的构建 | 第34-35页 |
·酶切 | 第35页 |
·连接 | 第35-36页 |
·制备大肠杆菌(JM109)感受态 | 第36页 |
·转化大肠杆菌(JM109) | 第36-37页 |
·阳性克隆鉴定、测序及结果分析 | 第37-38页 |
·PCR鉴定 | 第37页 |
·菌液鉴定 | 第37页 |
·酶切鉴定 | 第37-38页 |
·阳性克隆测序及结果分析 | 第38页 |
·质粒提取 | 第38-39页 |
·生长素和GSNO处理拟南芥 | 第39-41页 |
·生长素诱导侧根形成 | 第39页 |
·生长素处理Col-0/DR5-GUS和gsnor1-3/DR5-GUS | 第39-40页 |
·生长素和GSNO只处理Col-0/DR5-GUS | 第40页 |
·生长素处理Col-0/HS-AXR3-GUS和gsnor1-3/HS-AXR3.GUS | 第40-41页 |
·生长素和GSNO共同处理Col-0/HS-AXR3-GUS | 第41页 |
·拟南芥根尖GUS染色 | 第41-42页 |
·1×GUS染液配制 | 第41-42页 |
·GUS染色 | 第42页 |
·拟南芥杂交 | 第42-43页 |
·拟南芥根尖GFP荧光强度观察 | 第43页 |
·拟南芥根尖免疫定位分析 | 第43-44页 |
·组织固定 | 第43页 |
·4.2 组织渗透 | 第43-44页 |
·加一抗 | 第44页 |
·加二抗 | 第44页 |
·拟南芥根重力刺激分析 | 第44-45页 |
·不同PIN基因的荧光定量分析 | 第45-47页 |
·引物设计 | 第45页 |
·6.2 荧光定理PCR扩增 | 第45-47页 |
第三章 结果与分析 | 第47-65页 |
1 拟南芥GSNOR1功能缺失导致生长素相关的表型缺陷 | 第47-49页 |
2 gsnor1-3体内生长素合成水平正常 | 第49-51页 |
·拟南芥yuc1D不能恢复gsnor1-3的表型 | 第49-50页 |
·Col-0和gsnor1-3体内生长素含量相当 | 第50-51页 |
3 gsnor1-3对生长素的敏感性降低 | 第51-59页 |
·DR5-GUS和DR5-GFP在gsnor1-3中表达量降低 | 第51-53页 |
·外源GSNO具抑制DR5-GUS在野生型幼苗根部积累的效应 | 第53-54页 |
·gsnor1-3突变体中侧根的形成受到抑制 | 第54-55页 |
·gsnor1-3中IAA介导的HT-AXR3NT-GUS降解速率减慢 | 第55-56页 |
·GSNO抑制HS:AXR3NT-GUS的降解 | 第56-58页 |
·SCF~(TIR1)蛋白复合体的组装并没有受到损坏 | 第58-59页 |
4 生长素的极性运输在gsnor1-3中受到抑制 | 第59-64页 |
·生长素在gsnor1-3中的极性运输水平较Col-0降低 | 第59-60页 |
·gsnor1-3中生长素输出载体蛋白PINs的积累水平明显降低 | 第60-64页 |
5 gsnor1-3中向地性反应受到影响 | 第64-65页 |
第四章 讨论 | 第65-69页 |
参考文献 | 第69-81页 |
附录 | 第81-84页 |
1 实验常用抗生素、生长素及药品母液配制方法 | 第81页 |
2 常用培养基的配制 | 第81-82页 |
3 常见试剂和缓冲液配制方法 | 第82-84页 |
致谢 | 第84-85页 |
攻读硕士学位期间发表的学论 | 第85-86页 |