| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-8页 |
| 第一章 前言 | 第8-24页 |
| ·GABA 及其受体的概述 | 第8-13页 |
| ·哺乳动物 GABA 受体 | 第8-11页 |
| ·鱼类 GABA 受体的研究进展 | 第11-13页 |
| ·基因克隆的步骤和方法 | 第13-16页 |
| ·目的 DNA 片段的获得 | 第13-14页 |
| ·载体的选择 | 第14页 |
| ·体外重组 | 第14-15页 |
| ·重组子的筛选 | 第15-16页 |
| ·蛋白表达 | 第16-21页 |
| ·原核体系 | 第16-18页 |
| ·大肠杆菌表达系统 | 第16-17页 |
| ·大肠杆菌表达载体的类型 | 第17-18页 |
| ·酵母表达 | 第18-19页 |
| ·以重组杆状病毒为载体的昆虫表达系统 | 第19-20页 |
| ·哺乳动物表达 | 第20-21页 |
| ·实时荧光定量 PCR 的概况和方法 | 第21-22页 |
| ·计算机模拟的概况和方法 | 第22页 |
| ·论文的研究内容，目的及意义 | 第22-24页 |
| ·论文研究内容 | 第22-23页 |
| ·论文研究目的及意义 | 第23-24页 |
| 第二章 鲫鱼 GABA_A受体β_3亚基基因的克隆与分析 | 第24-64页 |
| ·实验材料与仪器 | 第24-25页 |
| ·供试鲫鱼 | 第24页 |
| ·实验试剂 | 第24页 |
| ·实验仪器 | 第24-25页 |
| ·实验方法 | 第25-44页 |
| ·GABA_A受体β_3 亚基基因 BLAST 分析以及简并 PCR 引物设计 | 第25-26页 |
| ·总 RNA 提取以及 RT-PCR 反应 | 第26-29页 |
| ·鲫鱼总 RNA 的提取 | 第26-27页 |
| ·RNA 质量检测 | 第27-29页 |
| ·样品 cDNA 合成（RT-PCR） | 第29页 |
| ·鲫鱼 GABA_A受体β_3基因保守区克隆测序 | 第29-30页 |
| ·快速扩增 cDNA 末端反应( rapid amplification of cDNA ends, RACE) | 第30-38页 |
| ·鲫鱼 GABA_A受体β_3亚基 3' RACE 扩增 | 第31-33页 |
| ·鲫鱼 GABA_A受体β_3亚基 5′RACE 扩增 | 第33-38页 |
| ·鲫鱼 GABA_A受体β_3基因全长验证 | 第38-39页 |
| ·基因的克隆测序与分析 | 第39-40页 |
| ·鲫鱼 GABA_A受体β_3亚基的原核表达 | 第40-43页 |
| ·目的 NDA 片段获取 | 第40-41页 |
| ·载体与目的 DNA 片段的连接 | 第41页 |
| ·转化 | 第41页 |
| ·重组子的筛选、重组质粒的抽提与鉴定 | 第41-42页 |
| ·诱导表达 | 第42-43页 |
| ·荧光定量 PCR 分析 | 第43-44页 |
| ·RAN 样品的准备 | 第43页 |
| ·样品 cDNA 合成 | 第43页 |
| ·QRT-PCR 引物的设计 | 第43页 |
| ·荧光定量 PCR | 第43-44页 |
| ·鲫鱼β_3同源五聚体的同源模建 | 第44页 |
| ·结果与分析 | 第44-64页 |
| ·简并引物设计 | 第44-46页 |
| ·鲫鱼 GABA_A受体β_3亚基基因克隆 | 第46-49页 |
| ·重组质粒的构建与原核表达 | 第49-50页 |
| ·β_3基因功能预测和分析 | 第50-57页 |
| ·鲫鱼 GABA_A受体β_3的 QRT-PCR 分析 | 第57-60页 |
| ·鲫鱼β_3同源五聚体三维模型的构建和分子对接 | 第60-62页 |
| ·讨论 | 第62-64页 |
| 第三章 结论﹑展望与创新 | 第64-68页 |
| ·结论 | 第64-65页 |
| ·展望 | 第65-66页 |
| ·创新 | 第66-68页 |
| 参考文献 | 第68-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 作者简介 | 第77页 |
| 硕士期间取得成果 | 第77页 |
| 在校期间参与的科研项目 | 第77页 |
