| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 第一章 绪论 | 第8-13页 |
| ·脂肪氧合酶的简介 | 第8-9页 |
| ·脂肪氧合酶的概述 | 第8页 |
| ·脂肪氧合酶的来源 | 第8-9页 |
| ·脂肪氧合酶的应用 | 第9页 |
| ·脂肪氧合酶研究现状 | 第9-11页 |
| ·脂肪氧合酶发酵生产的研究现状 | 第9-10页 |
| ·脂肪氧合酶热力学性质的研究现状 | 第10-11页 |
| ·立题依据及意义 | 第11-12页 |
| ·本论文的主要研究内容 | 第12-13页 |
| 第二章 材料与方法 | 第13-20页 |
| ·材料 | 第13-14页 |
| ·菌株和质粒 | 第13页 |
| ·培养基 | 第13页 |
| ·主要试剂 | 第13页 |
| ·主要仪器 | 第13-14页 |
| ·方法 | 第14-17页 |
| ·重组菌细胞的培养 | 第14页 |
| ·3L 罐上重组菌发酵 LOX 的优化 | 第14-15页 |
| ·重组 LOX 的纯化 | 第15页 |
| ·突变体的构建和筛选 | 第15-17页 |
| ·检测方法 | 第17-20页 |
| ·LOX 酶活的测定 | 第17页 |
| ·SDS-PAGE 电泳检测 | 第17页 |
| ·蛋白质浓度的测定方法 | 第17页 |
| ·LOX 最适反应温度和热稳定性的测定 | 第17-18页 |
| ·热失活速率的测定 | 第18页 |
| ·添加剂对 LOX 热失活的影响 | 第18页 |
| ·LOX 的动力学常数测定 | 第18页 |
| ·二级结构的分析 | 第18页 |
| ·荧光光谱分析 | 第18-19页 |
| ·蛋白质表面疏水性的测定 | 第19-20页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第20-33页 |
| ·重组脂肪氧合酶在 3 L 罐水平的发酵优化 | 第20-24页 |
| ·分泌促进剂对重组 LOX 生产的影响 | 第20-21页 |
| ·诱导起始菌体浓度对重组 LOX 生产的影响 | 第21-22页 |
| ·甘油初始浓度对重组 LOX 生产的影响 | 第22-23页 |
| ·碳源补料对重组 LOX 生产的影响 | 第23-24页 |
| ·脂肪氧合酶热力学性质及添加剂研究 | 第24-28页 |
| ·脂肪氧合酶的热力学性质研究 | 第24-26页 |
| ·化学稳定剂对 LOX 热稳定性的影响 | 第26-28页 |
| ·改造分子内部 L6 结构提高 LOX 热稳定性 | 第28-33页 |
| ·突变体的构建、表达和纯化 | 第28-29页 |
| ·突变体的酶学性质分析 | 第29-30页 |
| ·圆二色谱(CD)分析三种突变体及野生 LOX 的二级结构 | 第30-31页 |
| ·荧光光谱分析三种突变体及野生 LOX 的三级结构 | 第31页 |
| ·野生 LOX 及突变体表面疏水性的分析 | 第31-33页 |
| 主要结论与展望 | 第33-35页 |
| 致谢 | 第35-37页 |
| 参考文献 | 第37-41页 |
| 附录 作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第41页 |