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木奈果实酚类物质代谢关键酶基因的筛选与表达研究

摘要第1-10页
Abstract第10-13页
缩略词第13-14页
第一章 前言第14-21页
 1 研究背景第14-15页
 2 文献综述第15-20页
 3 本研究的主要内容第20页
 4 本研究的技术路线第20-21页
第二章 试验材料与方法第21-28页
 1 试验材料第21-22页
   ·植物材料第21页
   ·菌株和克隆载体第21页
   ·常用试剂第21-22页
   ·试剂盒第22页
   ·引物合成与测序第22页
 2 试验方法第22-28页
   ·(?)果实不同发育时期全长均一化cDNA文库的构建第22-23页
     ·(?)果肉总RNA的提取第22页
     ·cDNA文库的构建第22-23页
   ·cDNA文库的筛选第23-25页
     ·原始库的制备第23页
     ·原始库的筛选第23-24页
     ·一级库的制备第24页
     ·一级库的筛选第24页
     ·二级库的制备第24-25页
     ·二级库的筛选第25页
     ·阳性克隆的筛选第25页
   ·候选基因的生物信息学分析第25页
   ·候选基因5'端调控序列的克隆与顺式作用元件分析第25-26页
   ·候选基因在(?)果实不同发育时期的表达分析第26-28页
第三章 结果与分析第28-57页
 1 (?)果实不同发育时期全长均一化cDNA文库的构建第28-31页
   ·果肉总RNA的质量对双链cDNA扩增效果的影响第28-29页
   ·DSN浓度对LA-PCR扩增效果的影响第29-31页
   ·均一化全长cDNA文库的质量评价第31页
 2 (?)果实酚类物质代谢候选基因的筛选与生物信息学分析第31-51页
   ·(?)PsPAL2的分离与生物信息学分析第31-35页
   ·(?)PsC4H的分离与生物信息学分析第35-39页
   ·(?)PsCHS的分离与生物信息学分析第39-43页
   ·(?)PsLAR的分离与生物信息学分析第43-46页
   ·(?)PsCCOAOMT的分离与生物信息学分析第46-49页
   ·(?)PsPOD的分离与序列分析第49-51页
 3 PsPAL2、PsC4H与PsCHS 5'端调控序列的克隆与顺式作用元件分析第51-55页
   ·PSPAL2的5’端调控序列的克隆与顺式作用元件分析第51-52页
   ·PsC4H基因的5'端扩增与顺式作用元件分析第52-53页
   ·PsCHS基因的5'端扩增与顺式作用元件分析第53-55页
 4 候选基因在(?)果实不同发育时期的表达分析第55-57页
第四章 讨论第57-60页
 1 代表性强的均一化全长cDNA文库构建的技术关键第57页
 2 稀释池PCR法筛选目的基因的优越性与局限性第57-58页
 3 酚类物质代谢的基因调控第58-60页
参考文献第60-68页
附录一 PsPAL2启动子序列及元件第68-72页
附录二 PsCHS启动子序列及元件第72-76页
附录三 PsC4H启动子序列及元件第76-78页
致谢第78页

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