| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-11页 |
| 第1章 绪论 | 第11-22页 |
| ·泛素-蛋白酶体降解途径 | 第11-13页 |
| ·蛋白质降解途径 | 第11页 |
| ·泛素蛋白酶体通路 | 第11-13页 |
| ·HECT 类泛素连接酶 | 第13-18页 |
| ·HECT 类泛素连接酶结构与分类 | 第14-15页 |
| ·NEDD4 家族泛素连接酶结构和功能 | 第15-17页 |
| ·NEDL1 和 NEDL2 研究现状 | 第17-18页 |
| ·RING 类泛素连接酶 | 第18-21页 |
| ·SCF 复合体与 APC/C 复合体结构 | 第18-20页 |
| ·APC/C 复合体、周期调控与肿瘤 | 第20-21页 |
| ·本论文研究目的 | 第21-22页 |
| 第2章 材料与方法 | 第22-28页 |
| ·材料 | 第22页 |
| ·方法 | 第22-28页 |
| 第3章 泛素连接酶 NEDL2 相互作用蛋白筛选 | 第28-31页 |
| ·NEDL2 酶活中心失活载体构建 | 第28页 |
| ·IP/MS 筛选及结果分析 | 第28-30页 |
| ·本章小结 | 第30-31页 |
| 第4章 APC/C-Cdh1 在 G1 期中下调 NEDL2 蛋白稳定性 | 第31-38页 |
| ·Cdh1 与 NEDL2 相互作用验证 | 第31页 |
| ·Cdh1 过表达下调 NEDL2 的蛋白水平 | 第31-32页 |
| ·Cdh1 下调 NEDL2 蛋白水平依赖于 APC/C | 第32-33页 |
| ·NEDL2 在 G1，S，G2，M 期蛋白水平检测 | 第33-35页 |
| ·NEDL2 在 M 期到 G1 期过程蛋白水平检测 | 第35页 |
| ·MG132 处理上调内源 NEDL2 蛋白水平 | 第35-36页 |
| ·敲低 Cdh1 上调内源 NEDL2 蛋白水平 | 第36页 |
| ·本章小结 | 第36-38页 |
| 第5章 NEDL2 参与细胞周期过程中-后期转换 | 第38-43页 |
| ·NEDL2 细胞定位分析 | 第38-39页 |
| ·敲低 NEDL2 引起细胞周期中期时间明显延长 | 第39-40页 |
| ·过表达 NEDL2 引起染色体不稳定 | 第40-41页 |
| ·本章小结 | 第41-43页 |
| 第6章 NEDL2 蛋白正常组织及肿瘤组织表达情况检测 | 第43-45页 |
| ·NEDL2 蛋白水平组织表达谱 | 第43-44页 |
| ·不同肿瘤样本中 NEDL2 表达水平检测 | 第44页 |
| ·本章小结 | 第44-45页 |
| 结论 | 第45-47页 |
| 参考文献 | 第47-51页 |
| 附录 A IP/MS 实验结果 | 第51-66页 |
| 附录 B 主要仪器设备和常用试剂的配制 | 第66-69页 |
| 1. 主要仪器设备 | 第66-67页 |
| 2. 常用溶液的配制 | 第67-69页 |
| 附录 C 表达载体构建引物 | 第69-70页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第70页 |
| 已投稿尚未发表的论文 | 第70-71页 |
| 致谢 | 第71页 |
