中文摘要 | 第1-18页 |
ABSTRACT | 第18-21页 |
第一章 文献综述 | 第21-42页 |
1 蝎氯毒素概述 | 第21-30页 |
·引言 | 第21页 |
·蝎氯毒素的来源与性质 | 第21-22页 |
·蝎氯毒素的来源和基本功能 | 第21-22页 |
·蝎氯毒素的化学性质 | 第22页 |
·蝎氯毒素基因组织结构和多肽序列分析 | 第22-24页 |
·基因组织结构 | 第22-23页 |
·多肽序列分析 | 第23-24页 |
·蝎氯毒素的结构与功能 | 第24-25页 |
·蝎氯毒素的结构特征 | 第24-25页 |
·蝎氯毒素结构与功能的关系 | 第25页 |
·氯毒素的药理学研究 | 第25-29页 |
·氯毒素治疗神经胶质瘤的研究 | 第25-26页 |
·氯毒素与神经胶质瘤结合位点分析 | 第26-27页 |
·蝎氯毒素抑制胶质瘤侵袭和迁移的机制探讨 | 第27页 |
·蝎氯毒素在胶质瘤临床诊断和治疗中的应用 | 第27-29页 |
·蝎氯毒素在其他神经疾病上的研究 | 第29页 |
·总结 | 第29-30页 |
2 神经胶质瘤概述 | 第30-35页 |
·引言 | 第30-31页 |
·神经胶质瘤的流行病学研究 | 第31-33页 |
·神经胶质瘤的分类 | 第31-32页 |
·神经胶质瘤的致病源 | 第32-33页 |
·神经胶质瘤的症状 | 第33页 |
·神经胶质瘤的治疗方法 | 第33-35页 |
·神经胶质瘤的传统治疗方法 | 第33-34页 |
·神经胶质瘤的生物治疗方法 | 第34-35页 |
·总结 | 第35页 |
3 腺病毒载体在神经胶质瘤治疗的应用 | 第35-38页 |
·引言 | 第35-36页 |
·腺病毒载体特征 | 第36-37页 |
·腺病毒载体在胶质瘤治疗中的应用 | 第37-38页 |
·腺病毒载体的优势 | 第37页 |
·腺病毒载体的改造 | 第37-38页 |
·腺病毒基因治疗胶质瘤的联合用药 | 第38页 |
4 本研究的立题背景及意义 | 第38-42页 |
·研究背景 | 第38-40页 |
·研究内容、技术路线和创新点 | 第40-42页 |
·研究内容 | 第40页 |
·技术路线 | 第40页 |
·创新点 | 第40-42页 |
第二章 重组腺病毒Ad-BmK CT的构建 | 第42-54页 |
1 引言 | 第42页 |
2 材料和方法 | 第42-48页 |
·实验材料 | 第42-44页 |
·质粒、菌株和细胞 | 第42-43页 |
·试剂和仪器 | 第43页 |
·缓冲液配制 | 第43-44页 |
·实验方法 | 第44-48页 |
·BmK CT基因优化合成 | 第44页 |
·pShuttle-BmK CT的构建 | 第44-45页 |
·重组腺病毒骨架质粒pAd-BmK CT的构建 | 第45-46页 |
·重组腺病毒Ad-BmK CT的包装扩增 | 第46页 |
·重组腺病毒Ad-BmK CT的收集纯化 | 第46-47页 |
·重组腺病毒Ad-BmK CT的滴度测定 | 第47页 |
·RT-PCR检测BmK CT的表达 | 第47-48页 |
3 实验结果 | 第48-52页 |
·pUC57-BmK CT的鉴定 | 第48-49页 |
·pShuttle-BmK CT的鉴定 | 第49页 |
·重组腺病毒骨架质粒pAd-BmK CT的鉴定 | 第49-50页 |
·重组腺病毒Ad-BmK CT的包装扩增监测 | 第50-51页 |
·重组腺病毒Ad-BmK CT的浓缩纯化结果 | 第51-52页 |
·重组腺病毒Ad-BmK CT的滴度测定结果 | 第52页 |
·BmK CT的表达测定 | 第52页 |
4 讨论 | 第52-54页 |
第三章 Ad-BmK CT对胶质瘤细胞迁移和凋亡的研究 | 第54-67页 |
1 引言 | 第54页 |
2 材料和方法 | 第54-57页 |
·实验材料 | 第54-55页 |
·病毒和细胞株 | 第54-55页 |
·试剂和仪器 | 第55页 |
·实验方法 | 第55-57页 |
·细胞培养 | 第55页 |
·腺病毒载体对神经胶质瘤细胞最佳感染效率分析 | 第55页 |
·RT-PCR检测BmK CT在胶质瘤细胞的表达 | 第55-56页 |
·MTT法分析细胞增殖和存活能力 | 第56页 |
·Boyden Chamber实验分析细胞迁移能力 | 第56页 |
·划痕实验 | 第56-57页 |
·流式细胞仪分析细胞凋亡 | 第57页 |
·数据处理 | 第57页 |
3 实验结果 | 第57-65页 |
·最佳感染效率的确定 | 第57-60页 |
·腺病毒载体对C6细胞最佳感染效率的确定 | 第57-59页 |
·腺病毒载体对U251细胞最佳感染浓度的确定 | 第59-60页 |
·BmK CT在Ad-BmK CT感染胶质瘤细胞后的表达水平 | 第60页 |
·Ad-BmK CT抑制胶质瘤细胞增殖能力 | 第60-62页 |
·Ad-BmK CT抑制C6细胞的增殖能力 | 第60-62页 |
·Ad-BmK CT抑制U251细胞的增殖能力 | 第62页 |
·Ad-BmK CT抑制U251细胞的迁移 | 第62页 |
·Ad-BmK CT诱导U251细胞的凋亡 | 第62-65页 |
4 讨论 | 第65-67页 |
第四章 Ad-BmK CT体内抑制胶质瘤增殖和迁移的研究 | 第67-76页 |
1 引言 | 第67页 |
2 材料和方法 | 第67-70页 |
·实验材料 | 第67-68页 |
·实验动物和细胞 | 第67页 |
·病毒和质粒 | 第67页 |
·实验仪器 | 第67-68页 |
·实验方法 | 第68-70页 |
·动物饲养和细胞培养 | 第68页 |
·C6/RFP稳定株的筛选 | 第68页 |
·C6/RFP细胞最适荷瘤浓度的分析 | 第68-69页 |
·Ad-BmK CT体内抑制胶质瘤增殖的研究 | 第69页 |
·Ad-BmK CT抑制皮下荷瘤肺转移的研究 | 第69页 |
·数据处理 | 第69-70页 |
3 实验结果 | 第70-73页 |
·C6/RFP稳定株的建立 | 第70-71页 |
·C6/RFP细胞最适荷瘤浓度的确定 | 第71页 |
·Ad-BmK CT体内抑制胶质瘤增殖 | 第71-73页 |
·Ad-BmK CT抑制皮下荷瘤肺转移 | 第73页 |
4 讨论 | 第73-76页 |
第五章 Ad-BmK CT对大鼠主要脏器的影响及病理变化 | 第76-83页 |
1 引言 | 第76页 |
2 材料和方法 | 第76-78页 |
·实验材料 | 第76页 |
·实验动物和细胞 | 第76页 |
·病毒株 | 第76页 |
·实验仪器 | 第76页 |
·实验方法 | 第76-78页 |
·动物实验 | 第76-77页 |
·石蜡切片的制作 | 第77-78页 |
3 实验结果 | 第78-81页 |
·荷瘤大鼠的鉴定 | 第78页 |
·Ad-BmK CT对大鼠肾脏的影响 | 第78-79页 |
·Ad-BmK CT对大鼠脾脏的影响 | 第79-80页 |
·Ad-BmK CT对大鼠肝脏的影响 | 第80-81页 |
·Ad-BmK CT对其他脏器的影响 | 第81页 |
4 讨论 | 第81-83页 |
第六章 Ad-BmK CT抑制胶质瘤增殖、迁移和诱导凋亡的机制探讨 | 第83-91页 |
1 引言 | 第83页 |
2 材料和方法 | 第83-86页 |
·实验材料 | 第83-85页 |
·细胞和病毒 | 第83-84页 |
·实验试剂 | 第84-85页 |
·实验方法 | 第85-86页 |
·细胞培养 | 第85页 |
·蛋白浓度测定 | 第85-86页 |
·Western-blo试验 | 第86页 |
3 实验结果 | 第86-88页 |
·Ad-BmK CT抑制胶质瘤细胞C-myc蛋白的表达 | 第86-87页 |
·Ad-BmK CT抑制胶质瘤细胞MMP-2蛋白的表达 | 第87-88页 |
·Ad-BmK CT诱导胶质瘤细胞凋亡的机制探讨 | 第88页 |
4 讨论 | 第88-91页 |
参考文献 | 第91-103页 |
总结与展望 | 第103-106页 |
总结 | 第103-105页 |
展望 | 第105-106页 |
附录Ⅰ 缩略词 | 第106-108页 |
附录Ⅱ 研究成果 | 第108-110页 |
致谢 | 第110-111页 |
个人简况及联系方式 | 第111-113页 |