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腺病毒介导东亚钳蝎氯毒素抑制神经胶质瘤的研究

中文摘要第1-18页
ABSTRACT第18-21页
第一章 文献综述第21-42页
 1 蝎氯毒素概述第21-30页
   ·引言第21页
   ·蝎氯毒素的来源与性质第21-22页
     ·蝎氯毒素的来源和基本功能第21-22页
     ·蝎氯毒素的化学性质第22页
   ·蝎氯毒素基因组织结构和多肽序列分析第22-24页
     ·基因组织结构第22-23页
     ·多肽序列分析第23-24页
   ·蝎氯毒素的结构与功能第24-25页
     ·蝎氯毒素的结构特征第24-25页
     ·蝎氯毒素结构与功能的关系第25页
   ·氯毒素的药理学研究第25-29页
     ·氯毒素治疗神经胶质瘤的研究第25-26页
     ·氯毒素与神经胶质瘤结合位点分析第26-27页
     ·蝎氯毒素抑制胶质瘤侵袭和迁移的机制探讨第27页
     ·蝎氯毒素在胶质瘤临床诊断和治疗中的应用第27-29页
     ·蝎氯毒素在其他神经疾病上的研究第29页
   ·总结第29-30页
 2 神经胶质瘤概述第30-35页
   ·引言第30-31页
   ·神经胶质瘤的流行病学研究第31-33页
     ·神经胶质瘤的分类第31-32页
     ·神经胶质瘤的致病源第32-33页
     ·神经胶质瘤的症状第33页
   ·神经胶质瘤的治疗方法第33-35页
     ·神经胶质瘤的传统治疗方法第33-34页
     ·神经胶质瘤的生物治疗方法第34-35页
   ·总结第35页
 3 腺病毒载体在神经胶质瘤治疗的应用第35-38页
   ·引言第35-36页
   ·腺病毒载体特征第36-37页
   ·腺病毒载体在胶质瘤治疗中的应用第37-38页
     ·腺病毒载体的优势第37页
     ·腺病毒载体的改造第37-38页
     ·腺病毒基因治疗胶质瘤的联合用药第38页
 4 本研究的立题背景及意义第38-42页
   ·研究背景第38-40页
   ·研究内容、技术路线和创新点第40-42页
     ·研究内容第40页
     ·技术路线第40页
     ·创新点第40-42页
第二章 重组腺病毒Ad-BmK CT的构建第42-54页
 1 引言第42页
 2 材料和方法第42-48页
   ·实验材料第42-44页
     ·质粒、菌株和细胞第42-43页
     ·试剂和仪器第43页
     ·缓冲液配制第43-44页
   ·实验方法第44-48页
     ·BmK CT基因优化合成第44页
     ·pShuttle-BmK CT的构建第44-45页
     ·重组腺病毒骨架质粒pAd-BmK CT的构建第45-46页
     ·重组腺病毒Ad-BmK CT的包装扩增第46页
     ·重组腺病毒Ad-BmK CT的收集纯化第46-47页
     ·重组腺病毒Ad-BmK CT的滴度测定第47页
     ·RT-PCR检测BmK CT的表达第47-48页
 3 实验结果第48-52页
   ·pUC57-BmK CT的鉴定第48-49页
   ·pShuttle-BmK CT的鉴定第49页
   ·重组腺病毒骨架质粒pAd-BmK CT的鉴定第49-50页
   ·重组腺病毒Ad-BmK CT的包装扩增监测第50-51页
   ·重组腺病毒Ad-BmK CT的浓缩纯化结果第51-52页
   ·重组腺病毒Ad-BmK CT的滴度测定结果第52页
   ·BmK CT的表达测定第52页
 4 讨论第52-54页
第三章 Ad-BmK CT对胶质瘤细胞迁移和凋亡的研究第54-67页
 1 引言第54页
 2 材料和方法第54-57页
   ·实验材料第54-55页
     ·病毒和细胞株第54-55页
     ·试剂和仪器第55页
   ·实验方法第55-57页
     ·细胞培养第55页
     ·腺病毒载体对神经胶质瘤细胞最佳感染效率分析第55页
     ·RT-PCR检测BmK CT在胶质瘤细胞的表达第55-56页
     ·MTT法分析细胞增殖和存活能力第56页
     ·Boyden Chamber实验分析细胞迁移能力第56页
     ·划痕实验第56-57页
     ·流式细胞仪分析细胞凋亡第57页
     ·数据处理第57页
 3 实验结果第57-65页
   ·最佳感染效率的确定第57-60页
     ·腺病毒载体对C6细胞最佳感染效率的确定第57-59页
     ·腺病毒载体对U251细胞最佳感染浓度的确定第59-60页
   ·BmK CT在Ad-BmK CT感染胶质瘤细胞后的表达水平第60页
   ·Ad-BmK CT抑制胶质瘤细胞增殖能力第60-62页
     ·Ad-BmK CT抑制C6细胞的增殖能力第60-62页
     ·Ad-BmK CT抑制U251细胞的增殖能力第62页
   ·Ad-BmK CT抑制U251细胞的迁移第62页
   ·Ad-BmK CT诱导U251细胞的凋亡第62-65页
 4 讨论第65-67页
第四章 Ad-BmK CT体内抑制胶质瘤增殖和迁移的研究第67-76页
 1 引言第67页
 2 材料和方法第67-70页
   ·实验材料第67-68页
     ·实验动物和细胞第67页
     ·病毒和质粒第67页
     ·实验仪器第67-68页
   ·实验方法第68-70页
     ·动物饲养和细胞培养第68页
     ·C6/RFP稳定株的筛选第68页
     ·C6/RFP细胞最适荷瘤浓度的分析第68-69页
     ·Ad-BmK CT体内抑制胶质瘤增殖的研究第69页
     ·Ad-BmK CT抑制皮下荷瘤肺转移的研究第69页
     ·数据处理第69-70页
 3 实验结果第70-73页
   ·C6/RFP稳定株的建立第70-71页
   ·C6/RFP细胞最适荷瘤浓度的确定第71页
   ·Ad-BmK CT体内抑制胶质瘤增殖第71-73页
   ·Ad-BmK CT抑制皮下荷瘤肺转移第73页
 4 讨论第73-76页
第五章 Ad-BmK CT对大鼠主要脏器的影响及病理变化第76-83页
 1 引言第76页
 2 材料和方法第76-78页
   ·实验材料第76页
     ·实验动物和细胞第76页
     ·病毒株第76页
     ·实验仪器第76页
   ·实验方法第76-78页
     ·动物实验第76-77页
     ·石蜡切片的制作第77-78页
 3 实验结果第78-81页
   ·荷瘤大鼠的鉴定第78页
   ·Ad-BmK CT对大鼠肾脏的影响第78-79页
   ·Ad-BmK CT对大鼠脾脏的影响第79-80页
   ·Ad-BmK CT对大鼠肝脏的影响第80-81页
   ·Ad-BmK CT对其他脏器的影响第81页
 4 讨论第81-83页
第六章 Ad-BmK CT抑制胶质瘤增殖、迁移和诱导凋亡的机制探讨第83-91页
 1 引言第83页
 2 材料和方法第83-86页
   ·实验材料第83-85页
     ·细胞和病毒第83-84页
     ·实验试剂第84-85页
   ·实验方法第85-86页
     ·细胞培养第85页
     ·蛋白浓度测定第85-86页
     ·Western-blo试验第86页
 3 实验结果第86-88页
   ·Ad-BmK CT抑制胶质瘤细胞C-myc蛋白的表达第86-87页
   ·Ad-BmK CT抑制胶质瘤细胞MMP-2蛋白的表达第87-88页
   ·Ad-BmK CT诱导胶质瘤细胞凋亡的机制探讨第88页
 4 讨论第88-91页
参考文献第91-103页
总结与展望第103-106页
 总结第103-105页
 展望第105-106页
附录Ⅰ 缩略词第106-108页
附录Ⅱ 研究成果第108-110页
致谢第110-111页
个人简况及联系方式第111-113页

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